Коростышев работа: Работа Коростышев – лучшие вакансии. Поиск работы и трудоустройство Коростышев на OLX.ua

Киев (Украина)

Маршрут Коростышев – Киев: Вопросы и ответы по маршруту

Сравните Коростышев и Киев

Поездка на такси в Коростышеве на 37% дешевле, чем в Киеве.

Проезд в автобусе в Коростышеве на 22% дешевле, чем в Киеве.

Крупное пиво в Коростышеве на 19% дешевле, чем в Киеве.

Бутылка воды в Коростышеве на 18% дешевле, чем в Киеве.

Поесть в Коростышеве на 4% дороже, чем в Киеве.

Автобусные маршруты из Коростышева и Киева

Гибридный кроссовер Toyota Yaris Cross – обзор и тест-драйв новинки с рынка Украины

Продажи нового малолитражного кроссовера Toyota Yaris Cross в Украине начнутся 19 ноября.Чтобы лучше узнать автомобиль, издатель «РБК-Украина Авто» взял его на двухдневный тестовый спринт: он отправился в гонку по маршруту Киев — Львов — Киев, попутно опробовав этот внедорожный переднеприводный автомобиль. внедорожник. .

Раз, два, три… Toyota Yaris Cross — уже шестая модель класса SUV в украинской линейке марки. И — самый маленький: при длине 4172 мм этот субкомпактный кроссовер класса B на 223 мм короче CH-R, а по колесной базе он меньше 90 мм.Разница в размерах позволяет не бояться внутренней конкуренции, да и целевая аудитория у машин разная.

Если CH-R нацелен на тех, кто ищет кросс-купе с элегантным дизайном и не особо заботится о вместимости, то Yaris Cross более практичен и, по мнению Toyota, должен понравиться молодым семьям.

Дизайн, салон и багажник

Подросткам понравится этот образ: «накачанные» колесные арки с некрашеной пластиковой окантовкой, рельефные боковины и выразительный передок.Ансамбль из фар головного света и двойной трапециевидной решетки радиатора чем-то напоминает морду французского бульдога. Забегая вперед, скажу, что Yaris Cross оказался во многом на него похож: маленький, но боевой.

Автомобиль разделяет платформу GA-B глобальной архитектуры TNGA с седаном Yaris (база одинакова для обеих моделей), поэтому в салоне меня встречает знакомый трехспицевый руль и 8-дюймовый дисплей мультимедийная система в верхней части центральной консоли. Диапазон регулировок руля (переменный по вылету и наклону) и сидений достаточен для комфортного размещения водителей любого роста.

Передние сиденья всегда придется регулировать вручную самому, но профиль хороший: 550 км до Львова, задние ни разу не просили пощады. Кроме того, две верхние комплектации имеют электрическую регулировку поясничного подпора.

Второй ряд не такой гостеприимный. При росте 186см я сидел «один» с минимальным пространством между коленями и спинкой переднего сиденья.Впрочем, иного от детского B-внедорожника и ждать не приходится — малолитражные городские кроссоверы рассчитаны в первую очередь на двоих впереди. Видимо, поэтому в Yaris Cross отсутствуют не только воздуховоды на галерее, но и потолочный свет.

А вот багажник хороший. По сравнению с вышеупомянутым CH-R его объем больше почти на 100 литров: 390 против 297 литров. Со сложенными задними сиденьями получаем 1090 литров: хороший результат для небольшого автомобиля.

А главное удобство погрузки и транспортировки.Багажник оснащен лампочкой и розеткой на 12 В, а съемный фальшпол разделен на две части в соотношении 40:60. Другими словами, вы можете грамотно и компактно упаковать в багажник грузы разного формата и размера, не складывая второй ряд сидений.

Трехцилиндровый и адаптивный круиз: комплектация и особенности Toyota Yaris Cross

Toyota и гибриды неразделимы, поэтому даже самый маленький внедорожник в линейке предлагается в гибридной версии.Зато открывает линейку обычный «бензин»: три цилиндра, полтора литра рабочего объема и мощность 125 «сил». Эта урезанная версия знакомой по RAV4 «четверки» сочетается на выбор с «механикой» или вариатором.

Под капотом гибридной версии Yaris Cross

У нас в руках гибрид Yaris Cross. Сам трехцилиндровый двигатель здесь имеет более высокую степень сжатия и работает по экономичному циклу Аткинсона, а вместе с электродвигателем суммарная мощность силовой установки достигает 116 лошадиных сил.

За «пустой» частью решетки радиатора: радар адаптивного круиз-контроля

По оснащению новая малолитражка Toyota способна конкурировать с автомобилями более высокого класса. Всего предлагается пять комплектаций, а начиная со второй за дополнительную плату можно заказать комплекс активной безопасности Toyota Safety Sense, который включает в себя систему автоматического торможения при лобовом столкновении, отслеживание дорожной разметки, дорожные знаки, и адаптивный круиз-контроль.В трех «старших» версиях этот впечатляющий набор входит в стандартную комплектацию.

литров на километр: расход топлива Yaris Cross

Двигатель своей трехцилиндровой конструкции лишь вначале издает характерный гул и, что немаловажно, не беспокоит на холостых оборотах низкочастотными вибрациями, характерными для «троек» меньшего объема. А дальше — по обычному для установок Hybrid Synergy Drive сценарию: электроника самостоятельно манипулирует энергией, активируя электродвигатель при разгоне и выключая ДВС на постоянной скорости и при достаточном заряде аккумулятора. Помощь электродвигателя позволит вам быть достаточно активным в городском потоке и безопасно выходить на обгон грузовиков.

Форсированный электрорежим можно активировать кнопкой на центральном тоннеле на скорости до 80 км/ч, но при отпускании «газа» автомобиль может перейти в электропривод даже на 130 км/ч. По городу можно легко уложиться в 4-5 л/100 км (при заявленных 3,4 л/100 км), а по трассе Львов-Киев при скорости 110-120 км/ч я вывел расход скорость 6.5 л/100 км.

Можно ехать быстрее, но оно того не стоит: с ростом скорости эффективность гибридной установки снижается и аэродинамика начинает работать в ущерб. Также любителям скоростных гонок на длинные дистанции будет полезно помнить, что у гибрида Yaris Cross объем топливного бака составляет всего 36 литров против 42 литров у бензиновой версии.

На обочине и вне ее: как Yaris Cross ездит

Изюминкой Yaris Cross является хорошо настроенная подвеска.Он создан для ровных европейских дорог, но наши неровности проглатывает на ура. И делает это грамотно: мягкий рывок и никакой раскачки после преодоления неровностей.

А что в данном случае означает название «кроссовер»? Автомобиль переднеприводный, а полный привод даже не доступен за доплату. В цифрах ответ 170 мм — это величина дорожного просвета. В сочетании с короткими свесами это позволяет безбоязненно ездить по асфальту: например, бегать по ухабистым грунтовкам и бурным холмам.

По пути во Львов я заехал на Коростышевский карьер, где машина ловко маневрировала по узким тропинкам среди деревьев и отважно карабкалась по камням. Но следует помнить, что безопасными эти упражнения будут только на суше, ведь в трансмиссии нет электронного помощника, который бы регулировал подаваемый на ведущие колеса крутящий момент в зависимости от типа обивки.

Рынок: цена и конкуренты Yaris Cross

После непродолжительного двухдневного знакомства новинка оставила приятное впечатление.Помимо компактности и простоты второго ряда, Yaris Cross удовлетворит ожидания любого, кто ищет современный компактный внедорожник для города. Мощности хватает, топлива немного расходует при умеренной езде, багажник удобный, подвеска радует своей энергоемкостью.

Базовая машина с бензиновым двигателем и «механикой» стоит 545 тысяч гривен, с вариатором — 587 тысяч. Самый дешевый гибрид Yaris Cross обойдется в 676 тысяч, а топовая версия Adventure, которую тестировало РБК-Авто, оценивается в 805 тысяч.

Основным конкурентом украинского представительства Toyota является VW T-Cross, который поначалу чуть дороже: от 647 тысяч гривен. В эту категорию попадают и другие B-внедорожники: Nissan Juke (512–779 тысяч гривен), Peugeot 2008 (612–808 тысяч) и Renault Captur (540–608 тысяч). Поэтому конкуренция в сегменте значительно усилится.

.

Чернобыль как модельная система

ПРИЛОЖЕНИЕ

Список экземпляров Myodes glareolus, собранных в Украине и

их соответствующих местонахождений.Ваучерные образцы и ткани внесены в каталог

в базе данных TK Лаборатории исследований естественных наук

Музея Техасского технологического университета (TTU) в

Лаббок, Техас, США. Ваучеры хранятся в ТТУ или

Международной радиоэкологической лаборатории в Славутиче,

Украина. Экземпляры группируются по общему местонахождению

(рис. 1) и последовательно располагаются по номеру гаплотипа

(табл. 2).Гаплотипы 1, 2, 4, 5, 6, 7, 8, 12, 13, 14 и 15

заархивированы в GenBank под номерами доступа от AY449642 до

AY449649 и от EF421408 до EF421411. Репрезентативные образцы для этих гаплотипов соответствуют ТК67632, ТК67631,

ТК67657, ТК68040, ТК67881, ТК68032, ТК67730, ТК95824,

ТК95798, ТК95К88 и ТК95К88.

А. Черниговский район

1. Nezamozhnya (51u35.3359N, 30u51.1389E), n522

гаплотипов 1: TK81441, TK81567, TK81572,

TK81583, TK81601, TK81604

гаплотип 4: TK81342 к TK81345, TK81448 ,

TK81449, TK81570, TK81573, TK81575,

TK81576, TK81578, TK81582, TK81603,

TK81617, TK81620

Haplotype 8: TK81571

2.Nedanchichy (51u30.0029N, 30u51. 5929E), N530

гаплотипов 1: TK81565

гаплотип 4: TK81529, TK81530, TK81532 к

TK81539, TK81542 к TK81544, TK81546 к

TK81554, TK81557, TK81559, TK81560,

TK81563, TK81566

гаплотипов 8: TK81540

гаплотипов 11: TK81531

3. Oranoe (51u02.6819N, 30u09.6709E), n565

гаплотипов 1: TK81015, TK81018, TK81019,

TK81023 к TK81028, TK81088 , TK81103,

TK81104, TK81106, TK81107, TK81109,

TK81116, TK81117, TK81127, TK81129,

TK81642, TK81650, TK81651, TK81654,

TK81657, TK81658, TK81670, TK81692 к

TK81694, TK81709, TK81712 , TK81770

гаплотип 3: TK81058, TK81565, TK81637,

TK81660

гаплотип 4: TK81004, TK81016, TK81021,

TK81022, TK81029, TK81030, TK81087,

TK81089, TK81090, TK81091, TK81092,

TK81108 , ТК81110, ТК8 1119, TK81120,

TK81122, TK81123, TK81125, TK81128,

TK81629, TK81659, TK81662, TK81718

гаплотипов 7: TK81017, TK81101, TK81115,

TK81631, TK81635, TK81638

4. Красный Лес (51u23.0409N, 30u03.7809E), n5231

гаплотипов 1: TK67027, TK67632, TK67634,

TK67638, TK67681, TK67726, TK67729,

TK67791, TK67807, TK67808, TK67813,

TK67877, TK67878, TK67914, TK67927,

TK67974, TK67983, TK67987, TK67990,

TK67992, TK67994, TK67995, TK68028 до

TK68030, TK68034, TK68041, TK74007,

TK74011, TK74062, TK74068, TK74082,

TK74089, TK74093, TK74119, TK74120,

TK74131, TK74133, TK74138, TK74151,

TK74152, TK74160, TK74171, TK74172,

TK74186, TK74188, TK74202, TK74204,

TK74205, TK74214, TK74224, TK74233,

TK74235, TK74238, TK74240, TK74242,

TK74243, TK74254, TK74257, TK74264,

TK74271, TK74272, TK74274, TK74276,

TK74279, TK74289, TK74290, TK74291,

TK74303, TK74304, TK74308, TK81148,

TK81163, TK81178, ТК81244, ТК81245,

ТК812 47, TK81257, TK81258, TK81260,

TK81263, TK81265, TK81267, TK81270,

TK81277, TK81279, TK81293 к TK81296,

TK81310, TK81422, TK81423 к TK81425,

TK81442, TK81444, TK81445, TK81452,

TK81470, TK81471

гаплотип 2: TK67631, TK67633, TK67635,

TK67636, TK67652, TK67670, TK67671,

TK67673, TK67674, TK67676, TK67789,

TK67883, TK67899, TK67901, TK67902,

TK67915, TK67928, TK67975 к TK67977,

TK67980, TK74059, TK74081, TK74099,

TK74132, TK74157, TK74162, TK74200,

TK74208, TK74210, TK74215, TK74223,

TK74229, TK74253, TK74270, TK74281,

TK74306, TK81151, TK81152, TK81259,

TK81264, TK81461, TK81462, TK81472,

TK81476, TK81481

гаплотип 4: TK67655, TK67657, TK67680,

TK67732, TK74008, TK74012, TK74014,

TK74043, TK74122, TK74123, TK74150,

TK74165, TK74170, TK74203, TK74227,

TK74232, TK74239, TK74244, TK74259,

TK74261, TK74292, TK74302, TK81150,

TK81162, TK81228, TK81229, TK81261,

TK81272, TK81273, TK81278, TK81299,

TK81304, TK81435, TK81443, TK81446,

TK81450, TK81487

гаплотипов 5: TK67895, TK68040, TK74009,

TK74010, TK74129, TK74149, TK74169,

TK74189, TK74190, TK74201, TK74212,

TK74231, TK74234, TK74237, TK74251,

TK74252, TK74256, TK74258, TK74260,

TK74262, TK74265, TK74273, TK74287,

TK81230, TK81269, TK81281

гаплотипов 6: TK67881, TK81459

гаплотипов 7: TK68032

гаплотипов 8: ТК67730, ТК67810, ТК67979,

ТК74004, ТК81166, ТК81231, ТК81232,

ТК81271, ТК81276, ТК81280, ТК81309,

Биологическое воздействие радиации на окружающую среду. Токсикол. хим. 28, 2009 1993

Воздействие радионуклидов окружающей среды связано с тканеспецифическим воздействием на экспрессию теломеразы и длину теломер

Abstract

Теломеры, защитные структуры на концах хромосом, могут укорачиваться, когда человек подвергается стрессу. У некоторых видов фермент теломераза экспрессируется во взрослых соматических тканях и потенциально защищает или удлиняет теломеры. Теломеры могут быть повреждены ионизирующим излучением и окислительным стрессом, хотя влияние хронического воздействия повышенных уровней радиации на поддержание теломер в природных популяциях неизвестно.Мы количественно определили экспрессию теломеразы и длину теломер (TL) в различных тканях рыжей полевки Myodes glareolus , собранных в Чернобыльской зоне отчуждения, окружающей среде, гетерогенно загрязненной радионуклидами, и на незагрязненных контрольных участках в других местах Украины. Проживание в Чернобыльской зоне отчуждения было связано со снижением TL в печени и яичках и повышением активности теломеразы в мозге и печени. Таким образом, активация теломеразы, по-видимому, не связана с более длинными теломерами, но может отражать защитные функции, отличные от поддержания теломер, или попытки поддерживать более короткие теломеры в стрессовой среде.Тканеспецифические различия в скорости изнашивания теломер и кажущейся радиочувствительности ослабляют внутрииндивидуальную корреляцию длины теломер между тканями полевок, подвергшихся воздействию радионуклидов. Наши данные показывают, что ионизирующее излучение изменяет гомеостаз теломер в популяциях диких животных тканеспецифическим образом.

Введение

Теломеры представляют собой нуклео-белковые комплексы, которые защищают концы линейных ( i . e . эукариотических) хромосом, главным образом, предотвращая слияние концов хромосом или распознавание двухцепочечных разрывов ДНК ¹ .Почти все последовательности теломер позвоночных состоят из мотива TTAGGG, который повторяется в виде длинного тандемного массива. Длина теломер (TL) уменьшается при клеточном делении из-за неполной репликации концов ¹ , при этом старение клеток запускается при критически короткой TL ² . Поскольку TL широко коррелирует с долголетием, здоровьем и физической подготовкой у людей и других животных, существует большой интерес к пониманию процессов, влияющих на динамику TL. Стрессовые факторы, такие как психологический стресс ^{3 , 4} , окислительный стресс ^{5 , 6} и загрязнение окружающей среды ⁷ и загрязнение окружающей среды ^{7 9086 коррелируют со скоростью укорочения теломеров у людей и коррелируют со скоростью укорочения телом у животных.}

Гомеостаз длины теломер более сложен, чем скорость укорочения per se . Ключевым механизмом, с помощью которого теломеры могут быть восстановлены или удлинены, является действие фермента теломеразы ⁸ . Экспрессия теломеразы различается в разных тканях и среди видов ^{9 , 10} . Примечательно, что мелкие (~2  кг или менее) грызуны ^{9 , 11 , 12} и некоторые птицы ¹³ экспрессируют теломеразу во многих соматических тканях во взрослом возрасте; и наоборот, многие крупные долгоживущие млекопитающие подавляют экспрессию теломеразы в соматических тканях во взрослом возрасте ^{14 , 15} , хотя и с некоторыми исключениями ( e . г . свинья ¹⁶ ). Более того, уровень экспрессии теломеразы различается в разных тканях ⁹ . У взрослых мышей ( Mus musculus и M . spretus) экспрессия теломеразы, как правило, выше в тканях с более длинными теломерами (таких как яички и печень), и слабее или отсутствует в тканях с более короткими теломерами (таких как селезенка). , почки и головной мозг) ¹⁷ . Аналогичная картина наблюдается у взрослых крыс, у которых теломераза сильно экспрессируется в печени, но имеет низкую экспрессию в тканях мозга ¹⁸ .Стресс также влияет на экспрессию теломеразы, но непредсказуемым образом: воздействие стресса способно стимулировать и подавлять активность теломеразы ^{3 , 19 – 22} . Как правило, неадекватная экспрессия теломеразы связана с ускоренным укорочением теломер и старением ^{1 , 2} . Однако увеличение экспрессии теломеразы не всегда полезно, например, раковые клетки становятся иммортализованными в результате сверхэкспрессии теломеразы ¹⁴ .Действительно, уровень экспрессии теломеразы для надлежащего поддержания теломер, вероятно, взаимодействует с историей жизни вида, особенно с тем, склонны ли животные подавлять или экспрессировать теломеразу в зрелом возрасте. Поскольку уровни экспрессии теломеразы у диких животных, подвергшихся стрессу, и ее влияние на динамику TL неизвестны, необходима количественная оценка динамики TL и экспрессии теломеразы в различных тканях и у животных в условиях стресса.

Загрязненная среда представляет собой комплекс стрессоров и последствий для здоровья диких животных ²³ .Многочисленные действия человека привели к аварийному выбросу радионуклидов в окружающую среду, в результате чего во всем мире осталось много загрязненных территорий ^{24 , 25} . Животный мир, населяющий территорию вокруг бывшей атомной электростанции (АЭС) в Чернобыле, Украина, представляет собой наиболее изученную модель биологических последствий воздействия радионуклидов окружающей среды ²⁶ . 26 апреля 1986 г. взрыв и последующий пожар на четвертом блоке Чернобыльской АЭС привели к выбросу более 9 × 10 ³ ПБк радионуклидов на большую (>200 000 км ² ) территорию Европы и востока России ²⁶ . Впоследствии Чернобыльская зона отчуждения (ЧЗО) была установлена ​​в радиусе 30 км вокруг объекта, чтобы ограничить воздействие загрязнения на человека. Организмы, населяющие районы вокруг Чернобыльской АЭС, подвергаются воздействию повышенных уровней радионуклидов с длительным периодом полураспада, особенно стронция-90 ( ⁹⁰ Sr), цезия-137 ( ¹³⁷ Cs) и плутония-239 (^{). 239} Pu), которые имеют периоды полураспада 29, 30 и 24 100 лет соответственно ^{26 , 27} .Сообщалось о различных геномных воздействиях на диких животных, населяющих районы вокруг Чернобыля ²⁵ , включая повышенный уровень повреждения ДНК ²⁸ и мутации ²⁷ . Однако в этих исследованиях не удалось выявить конкретные участки генома, чувствительные к повреждающим эффектам проживания в районах с повышенной радиоактивностью.

Мы предположили, что воздействие радионуклидов окружающей среды в пределах CEZ, вероятно, повлияет на гомеостаз теломер, поскольку теломеры представляют собой специфическую мишень для повреждающего действия ионизирующего излучения (IR), поскольку ожидается, что богатые G области генома будут радиочувствительными. Кроме того, вызванное ИР увеличение клеточных активных форм кислорода (АФК) и окислительный стресс могут нарушить поддержание теломер, поскольку теломеры чувствительны к окислительному повреждению ^{5 , 19 , 29} . Действительно, экспрессия как TL, так и теломеразы связана с радиочувствительностью in vitro : клеточные линии с короткими теломерами проявляют повышенную радиочувствительность, когда в них отсутствует функционирующая теломераза ¹⁹ (также in vivo у мышей ^{30 6)Другие клеточные линии демонстрируют уменьшение длины теломер и увеличение экспрессии теломеразы после воздействия ионизирующего излучения 31 , а радиочувствительные клетки имеют ускоренное укорочение теломер и дисфункцию теломер 32 , 33 . Степень, в которой дикая природа подвергается хроническому воздействию низких доз ионизирующего излучения, параллельна этим исследованиям клеточных линий, подвергшихся острому воздействию высоких доз радиации ( e . g .для клинического контекста) неизвестно.}

Радиочувствительность определяет относительную восприимчивость клеток, тканей, органов, организмов или других веществ к повреждающему действию радиации. Радиочувствительными клетками обычно являются клетки с высокой скоростью деления, высокой скоростью метаболизма и/или неспециализированные ³⁴ . Таким образом, TL в семенниках и коже мышей особенно чувствительны к хроническому окислительному стрессу из-за высокой скорости клеточного деления в этих типах клеток ³⁵ .Ткани печени, сердца и головного мозга имеют высокие метаболические потребности, но отличаются своими пролиферативными способностями и продукцией АФК ³⁶ . В то время как ткани неизменно справляются с присущим им окислительным стрессом, дополнительный стресс, вызванный воздействием радионуклидов (т.

Таким образом, разные ткани обладают принципиально разным балансом между эрозией и восстановлением теломер и их радиочувствительностью. Цель этого исследования заключалась в количественной оценке влияния хронического воздействия ионизирующего излучения, связанного с обитанием в ЦЭЗ, на гомеостаз теломер в диких популяциях путем количественного определения экспрессии теломеразы и TL в различных тканях рыжей полевки Myodes glareolus . .Этот вид представляет собой идеальную модель для количественной оценки биологических последствий воздействия радиации окружающей среды, поскольку он был одним из первых млекопитающих, повторно заселивших территории, загрязненные радионуклидами после чернобыльской аварии ³⁸ . Рыжие полевки, населяющие ЧЗО, могут испытывать значительные ( i , e . >10 мГр/сут, но в среднем около 3,7 мГр/сут) поглощенные дозы радиации ³⁸ . Доказательства генетического повреждения у рыжих полевок, населяющих ЦЭЗ, сомнительны: сообщения о повышенном уровне хромосомных аберраций контрастируют с отсутствием признаков повышенного образования микроядер (рассмотрено ²⁵ ) или накопления гетероплазматических мутаций в митохондриальной ДНК ³⁹ . Тем не менее, рыжие полевки, населяющие ЦЭЗ, активируют некоторые ферменты репарации ДНК ⁴⁰ .

Сбор проб

В течение 2015 г. рыжие полевки были отловлены в 13 точках отлова в пределах ЧЗО и в контрольных точках за пределами ЧЗО: Броды, Лубны и Коростышев (рис. ). ЧЗО представляет собой мозаику радионуклидного загрязнения с участками повышенного уровня загрязнения и относительно незагрязненными участками на широком ландшафте. Рыжие полевки могут перемещаться на расстояние 1  км во время сезона размножения ⁴¹ , и, таким образом, животные, отловленные в ЧЗО, имеют возможность подвергнуться воздействию радионуклидов до отлова.Напротив, контрольные участки расположены на расстоянии от 170 до 450  км от ЧЗО, и люди из этих мест не подвергались воздействию радионуклидов окружающей среды. Уровни фоновой радиации почвы на уровне земли в местах отлова в ЧЗО варьировались от 0,12 до 12,34 мкЗв/ч (места с повышенным загрязнением: среднее = 5,21 мкЗв/ч, SD = 2,71 и чистые участки с более низкими уровнями: среднее = 0,19 мкЗв/ ч, SD = 0,11). Внешнее облучение рыжих полевок в Чернобыле сильно коррелирует (r = 0.86, Pearson) с мощностью дозы амбиентного фона мест отлова (Lavrinienko et al . неопубликовано). Средние значения для незагрязненных контрольных территорий составили 0,13 мкЗв/ч, 0,14 мкЗв/ч и 0,13 мкЗв/ч для Бродов, Лубнов и Коростышева соответственно. Таким образом, уровень радиационного фона почвы значительно различался между ЧЗО и контрольными участками (t-критерий: t = 4,95, df = 58, P < 0,001).

Myodes glareolus место отбора проб. Расположение незагрязненных контрольных пробоотборных площадок ( a ) и Чернобыльской зоны отчуждения (ЧЗО, граница отмечена пунктиром) в Украине ( b ).Для мест отбора проб в ЧЗО ( b ) места с фоновым излучением > 1 мкЗв/ч отмечены красными кружками, а участки с уровнем излучения <1 мкЗв/ч отмечены зелеными кружками.

Все процедуры соответствуют законодательным требованиям и международным рекомендациям по использованию животных в исследованиях. Все необходимые разрешения на проведение экспериментов получены от Комитета по экспериментам на животных (разрешение № ESAVI/7256/04.10.07/2014).

Относительная длина теломер (RTL) и экспрессия теломеразы

Мы количественно определили относительную TL у рыжих полевок (N = 41) с использованием метода количественной полимеразной цепной реакции (qPCR), описанного Cawthon, в котором относительная длина теломер (RTL) представлена ​​как отношение T/S, где T — количество теломер в образце, а S — количество стандартного однокопийного гена (S).Кроме того, экспериментальные образцы сравнивают с эталонным «золотым стандартом» образца ДНК на каждом планшете для количественной ПЦР ⁴² . ТЛ количественно определяли в ткани печени, головного мозга, яичек, яичников и сердца. Экспрессию теломеразы количественно определяли с помощью количественной ПЦР в тканях печени, головного мозга, яичников и сердца. Экспрессия теломеразы представлена ​​в виде относительных величин (кратное изменение) по сравнению с эталонным образцом кДНК, который присутствовал на всех планшетах (см. дополнительную информацию для получения полной информации по обоим протоколам).

Статистический анализ

Различия в экспрессии TL и теломеразы между образцами, собранными в CEZ и контрольных областях, были проанализированы с использованием обобщенных линейных моделей (GLM) в R v.3.4.3 ⁴³ с использованием площади образца (CEZ , контроль) и пол как фиксированные факторы. Внутрииндивидуальные корреляции длины теломер были исследованы для CEZ и контрольных особей отдельно, и было выполнено попарное сравнение для всех тканей (корреляция Пирсона в R).Программное обеспечение REST 2.0.13 ⁴⁴ использовали для сравнения общих уровней экспрессии теломеразы в тканях.

Результаты

Длина теломер

Относительная длина теломер была оценена в тканях печени, головного мозга, сердца, семенников и яичников рыжих полевок в ЧЗО и контрольных животных из Украины, которые не подвергались воздействию повышенных уровней окружающего фонового излучения в окружающей среде. . Образцы из двух групп в пределах ЧЗО были объединены, так как животные из районов с повышенной радиацией и относительно чистых районов не различались по TL.Животные из ЦЭЗ имели более короткие теломеры по сравнению с контрольными животными в печени и семенниках. Образцы мозга, сердца и яичников не показали различий между двумя группами (таблица, рис.). У мужчин были более длинные теломеры во всех исследованных соматических тканях по сравнению с женщинами (дополнительная информация, рис. ^S1 ). В целом теломеры в печени и яичках были длиннее, чем в головном мозге, сердце и яичниках (таблица, рис. ).

Таблица 1

Сводка результатов GLM по относительной длине теломер (RTL) и экспрессии теломеразы у рыжих полевок в пределах CEZ и в контрольных участках за пределами CEZ, а также влияние пола.

		Длина теломер (RTL)				Экспрессия теломеразы
		B	SE	т	Р	Б	ЮВ	т	Р
Мозг	Intercept	1. 027	0,039	0,039	26.61	0,000	0,493	0,147	3.36	0,001	0.001
	Control	0.045	0.044	1.044	1.03	0.311	-0.481	0,167	-2.89	0 . . 000	−0,025	0,167	−0,15	0,883
	Сердце 9,120129 пересечение243	0. 068	18,35	0,000		-1,952 0,251		-7,79 0,000
		Control 0,064	0,076	0,84	0,407		-0,382 0,358	−1,066	0,292
Женщина		−0,375	0,076	−4,96	0 2 0 2 000	0,372	0,358	1. 038	0,305
Печень	перехватывают	1,784	0,162	11,03	0,000	1,033	0,290	3,56	0,001
	управления	0,435	0,187	2,33	0 . 026	−0,878	0,320	−2,75	0 . 008
	Женщина	−0. 508	0,187	−2,72	0 . 009		-0,311 0,320		-0,97 0,337
	Яичник перехватывают		0,104		9,86 0,000 0,105			0,118 0,896 0,380
	Контроль	−0,018	0,154	−0,12	0,908	−0. 105	0.163	-0.646	0.525	0.525
Testis	InterClex	1.594	0.258	0.258	6.17	0 . 000
Control	1.020	0.357	2,86	0 . 010

Длина теломер.Относительная длина теломер (ОТД) в различных тканях рыжих полевок из Чернобыльской зоны отчуждения (ЧЗО) и незагрязненных контрольных участков. Коробчатые диаграммы показывают медианы, квартили, 5- и 95-процентили и экстремальные значения. Статистически значимые сравнения отмечены * (значимы на уровне 0,05).

Таблица 2

Средняя относительная длина теломер (RTL) и относительная экспрессия теломеразы в тканях рыжих полевок животных из Чернобыльской зоны отчуждения (ЧЗО) и контрольных участков за пределами ЧЗО.

Ткань (N CEZ/контроль)	CEZ RTL (SD)	контроль RTL (SD)	комбинированный
7 РТЛ
мозг (20/21)	0. 89 (0,17)	0,94 (0.22)	0,92 (0.20)
Сердце (20/21)	1.06 (0.24)	1.13 (0,35)	1,10 (0,30)
Печень (19/21)	1,55 (0,46)	1.98 (0.76)	1.78 (0,66)
Яичника (12/10)	1.03 (0.18)	1.01 (0,49)	1.02 (0,35)
Testis (10/11)	1,59 (0,30)	2,61 (1,07)	2,13 (0,95)
Ткань (N ЦЭЗ/контроль)	CEZ теломераза (SD)	контроль теломеразы (SD)	комбинированный
Теломераза
Мозг (30/29)	1. 69 (0,92)	1.17 (0,62)	1.44 (0.82)
Сердце (25/24)	0,37 (0.28)	0.24 (0,17)	0,31 (0,25)
печень 28/28)	0,80 (0,43)	0.54 (0.34)	0,67 (0,40)
Яичник (12/13)	1.25 (0.31)	1.16 (0,33)	1.20 (0,32)

Теломераза

Экспрессия теломеразы была выше в тканях головного мозга и яичников по сравнению с печенью и сердцем (рис., Стол ). Между тканями с самой высокой и самой низкой экспрессией теломеразы, мозгом и сердцем, была разница в 5,5 раз. Две ткани показали значительное увеличение экспрессии теломеразы у животных из CEZ (таблица). Активация теломеразы повышалась (изменение в 1,4 раза) в мозговой ткани чернобыльских животных по сравнению с особями из контрольных участков за пределами ЧЗО, без различий между самцами и самками. При анализе трех групп не было обнаружено различий между животными CEZ из зон с повышенным уровнем радиации или из чистых зон.Повышение экспрессии теломеразы также наблюдалось в ткани печени чернобыльских полевок по сравнению с контрольными особями (изменение в 1,7 раза, различий между полами нет). В ткани яичников и сердца не было выявлено различий в экспрессии теломеразы между животными из Чернобыля и контрольных районов (или между полами для сердца).

Экспрессия теломеразы. Относительная экспрессия теломеразы в различных тканях рыжих полевок из Чернобыльской зоны отчуждения (ЧЗО) и незагрязненных контрольных участков.Коробчатые диаграммы показывают медианы, квартили, 5- и 95-процентили и экстремальные значения. Статистически значимые сравнения отмечены * (значимы на уровне 0,05).

Корреляция длины теломер между тканями

У животных из незагрязненных контрольных участков за пределами ЧЗО внутри отдельных корреляций между длинами теломер в разных тканях были положительными и значимыми (парные корреляции в диапазоне r = 0,50–0,82, исключая семенники, таблица), с самой высокой корреляцией, наблюдаемой между постмитотической тканью сердца и мозга (r = 0.82). Исключение составляли яички, где паттерны были слабыми и незначительными. Однако у животных из Чернобыля внутрииндивидуальные корреляции в TL между тканями были слабее, и, например, корреляции с участием ткани печени были ухудшены (r = 0,14 в TL печени и соматических тканей мозга и сердца) (таблица).

Таблица 3

Индивидуальные корреляции Пирсона для длины теломер в различных тканях.

	Мозг	Сердце	Liver	Яичника	Testis
Мозг		0. 40 *	0.14	0,14	0.58 *	-0.61 *
	0.82 ***				0.14	0.01	-0.21 *	-0.21 *
Liver	0.50 **	0.55 ***		-0.13	-0.13
0,64 **	0.84 **	0,73 **	0,73 **		–
	Testis	0. 27	0,14	0.40	—

Обсуждение

Генетическое повреждение является характерным биомаркером для организмов, населяющих районы, загрязненные радиоактивностью окружающей среды теломеразы радиочувствительные ^{19 , 45} . У рыжих полевок, населяющих ЦЭЗ, воздействие радиоактивности окружающей среды связано с активацией теломеразы (в основном в головном мозге и печени) и общим уменьшением длины теломер (TL) (в печени и семенниках).Кроме того, тканеспецифические различия в чувствительности к воздействию радионуклидов нарушают внутрииндивидуальную корреляцию в TL различных тканей. Насколько нам известно, это первое свидетельство того, что воздействие радионуклидов окружающей среды влияет на гомеостаз теломер у диких животных.

Половые различия в TL обычны для млекопитающих: взрослые самки имеют более длинные теломеры, чем самцы, из-за более медленного износа теломер на протяжении всей жизни ^{10 , 11} . Почему у самок рыжих полевок теломеры короче, чем у самцов, неясно, но это может отражать больший рост (деление клеток) у более крупных самок или более высокие затраты на размножение ⁴⁶ . Кроме того, среда внутриклеточного окислительного стресса может различаться у разных полов; например, самки крыс обладают большей защитой от окислительного стресса и более длинными теломерами ⁴⁷ . Тем не менее, мы не обнаружили взаимодействия между полом и эффектами воздействия радионуклидов на гомеостаз теломер.

Поскольку воздействие стрессовых событий влияет на динамику теломер ^{48 , 49} , а длина теломер (TL) эквивалентна среди тканей новорожденных животных ^{17 , 50 9 отражает тканеспецифические скорости эрозии ( e . g . деление клеток, окислительный стресс) и восстановления ( e . g . экспрессия теломеразы). У рыжей полевки явно высокая радиочувствительность семенников 34 ( i . е . уменьшение среднего значения и дисперсии TL, рис. ) согласуется с высокой скоростью деления клеток в этой ткани 35 . Тем не менее, теломеры семенников рыжей полевки длиннее, чем теломеры соматических тканей, что согласуется с тканеспецифическими вариациями TL среди мышей 17 , подразумевая, что важно поддерживать длинные теломеры в семенниках. Поддержание TL в семенниках рыжей полевки предположительно достигается за счет экспрессии теломеразы, поскольку семенники обычно характеризуются высокой экспрессией теломеразы, даже у видов, которые репрессируют теломеразу в соматических тканях во взрослом состоянии .Наши количественные ПЦР подтвердили экспрессию теломеразы в семенниках рыжей полевки во всех местах отбора проб, хотя мы не смогли определить относительную экспрессию теломеразы, связанную с воздействием радионуклидов (см. Дополнительную информацию). Репрессия теломеразы, связанная с обитанием в ЦЭЗ, маловероятна, учитывая общую тенденцию в соматических тканях рыжей полевки (рис.  ), и то, что отсутствие экспрессии теломеразы в семенниках имеет важные последствия для приспособленности (такие как истощение сперматозоидов, уменьшение размера семенников). и усиленный апоптоз, связанный с чрезмерным укорочением теломер) 52 .Более короткая TL семенников в загрязненных районах имеет важное значение, поскольку это означает, что загрязнение радионуклидами может повлиять на динамику TL нескольких поколений в популяциях диких млекопитающих. У людей и других млекопитающих есть доказательства того, что TL определяется отцовской TL в возрасте зачатия, при этом потомство наследует более длинные теломеры от старших отцов с более длинными теломерами в сперматозоидах 53 . Короткие теломеры у рыжих полевок, населяющих CEZ, могут отражать размножение более молодыми самцами, например, из-за ускоренной смертности в загрязненной среде и/или ускоренной эрозии теломер из-за стрессовой среды (и потенциально неадекватной репарации теломеразой). Независимо от механизма (механизмов), связанного с истощением теломер, молодые рыжие полевки, вероятно, начинают свою жизнь с более короткими теломерами, чем типичные для рыжих полевок, рожденных в незагрязненной среде.}

Хотя ткани яичников считаются чувствительными к радиационному повреждению ³⁴ , воздействие радионуклидов не оказало заметного влияния ни на экспрессию TL, ни на экспрессию теломеразы в яичниках. Низкая экспрессия теломеразы характерна для тканей зрелых яичников и ооцитов млекопитающих ( и . г . macaque Macaca fascicularis яичники ⁵⁴ , Mus spretus ооциты ⁵⁵ ) как у рыжей полевки. Некоторые исследования выявили роль наследования TL по материнской линии у млекопитающих ⁵⁶ . Хотя способ наследования теломер у рыжих полевок неизвестен, короткие TL в яичниках, возможно, согласуются с предполагаемой ролью отцовского, а не материнского способа наследования TL.

Различное влияние воздействия радионуклидов на TL тканей печени, головного мозга и сердца, по-видимому, согласуется с их сравнительной радиочувствительностью, без различий в TL между ЦЭЗ и контрольными образцами мозга и сердца (рис.), которые менее чувствительны к лучевому поражению, чем ткань печени ³⁴ . Однако сравнительно низкая TL в мозге и сердце рыжей полевки может указывать на то, что эти ткани естественным образом испытывают истощение теломер во время развития, а короткие теломеры у взрослых особей снижают статистическую способность обнаруживать эффект радиации. Образцы новорожденных и подростков рыжих полевок необходимы, чтобы определить, ускоряет ли воздействие радионуклидов эрозию теломер во время развития. Учитывая короткие теломеры в мозге и сердце рыжей полевки, примечательно, что экспрессия теломеразы низка или отсутствует в тканях мозга и сердца мыши и крысы ^{17 , 18 , 35} другие грызуны и птицы ^{9 , 13} . Однако в то время как экспрессия теломеразы также была низкой в ​​сердце рыжей полевки, наблюдалась относительно высокая экспрессия теломеразы в ткани головного мозга и активация этого фермента у полевок, населяющих ЦЭЗ. Это потенциально указывает на попытку предотвратить критическое укорочение теломер мозга у взрослых. Возможно, что в зрелом возрасте ткань мозга рыжей полевки несколько устойчива к истощению теломер, поскольку в мозге крыс не наблюдается возрастного укорочения теломер ¹⁰ , а в мозге грызунов наблюдается низкая продукция митохондриальных АФК ³⁶ .В качестве альтернативы, теломераза может иметь более широкие функции, чем поддержание теломер, такие как защита клеточной и митохондриальной функции во время окислительного стресса ⁵⁷ , ингибирование апоптоза ⁵⁸ и/или активация путей репарации ДНК ^{59 9966 Интересно, что небольшой размер мозга является характерным пороком развития у птиц, пострадавших от радиоактивных осадков из ЧЗО 60 , и у взрослых рыжих полевок, населяющих загрязненные районы ЧЗО (Kivisaari et al . не опубликовано). Небольшой размер мозга может означать меньшее количество клеточных делений во время развития, и это может быть дополнительным механизмом, который ограничивает степень разрушения TL воздействием радионуклидов. Может ли маленький размер мозга представлять собой «адаптацию» рыжих полевок, населяющих ЦЭЗ, является интригующей темой для дальнейшего изучения.}

Многие (но не все) мелкие грызуны экспрессируют теломеразу в своей печени во взрослом состоянии ^{9 , 18} и во взрослом состоянии имеют длинные (по сравнению с мозгом и почками мыши ¹⁷ ) теломеры.Длинные теломеры (относительно сердца и мозга) и экспрессия теломеразы указывают на необходимость поддержания длины теломер в печени взрослой рыжей полевки. Тем не менее воздействие экологического стресса влияет на динамику TL в ткани печени, поскольку обитание в CEZ было связано со снижением TL и активацией теломеразы. Чтобы подчеркнуть сложную взаимосвязь между экспрессией теломеразы и TL, повышенная экспрессия теломеразы в печени кажется недостаточной для удлинения/поддержания TL у рыжих полевок, населяющих CEZ, но, как отмечалось выше (для ткани мозга), теломераза может играть плейотропную роль, связанную с молекулярная реакция на стресс, помимо защиты теломер. Интересно, что экспрессия Mre11 , которая участвует в поддержании теломер, активируется в печени рыжей полевки CEZ ⁴⁰ . В любом случае, мы обнаружили, что ткань печени взрослых рыжих полевок проявляет некоторую радиочувствительность, как и ожидалось ³⁴ .

В дополнение к воздействию теломеразы гомеостаз длины теломер можно регулировать с помощью множества других механизмов, например альтернативного удлинения теломер, опосредованного рекомбинацией (ALT ⁶¹ ) или стохастических событий, таких как быстрые делеции теломер (TDR ^{). 62} ) может удлинять или укорачивать теломеры ^{63 , 64} .Однако актуальность этого неясна, особенно для видов и тканей, где теломераза экспрессируется постоянно, например, у рыжей полевки.

Сходные закономерности динамики теломер у животных, населяющих ЦЭЗ, независимо от фонового уровня загрязнения, интересны в свете недавних дебатов о возможной роли исторической дозы, влияющей на современный биологический ответ ⁶⁵ . Поскольку рыжие полевки могут рассеяться среди мозаики радионуклидного загрязнения в ЧЗО, животные, обитающие на явно незагрязненных территориях, в какой-то момент своей жизни могли подвергнуться радионуклидному загрязнению.Этот предшествующий опыт воздействия радионуклидов может вызвать стойкий биологический ответ, а эпигенетические эффекты могут даже сохраняться в поколениях ⁶⁶ . С другой стороны, изменения в гомеостазе теломер могут отражать постоянную адаптацию(и) к загрязнению радионуклидами, вызванную отбором в популяции рыжих полевок, повторно заселивших ЧЗО вскоре после аварии.

Несмотря на внутреннюю тканеспецифическую изменчивость скорости изнашивания теломер в течение жизни человека, положительная корреляция длины теломер между тканями внутри человека типична для человека ^{54 , 67} и других животных ^{54 , 68 , 69} .Эта внутрииндивидуальная корреляция в TL существует в естественных популяциях рыжих полевок, за исключением сравнений с участием семенников, где длина теломер длинна и изменчива. Важнейшим результатом нашего анализа является то, что воздействие радиоактивности окружающей среды (и, возможно, других стрессоров) ослабляет или устраняет внутрииндивидуальную корреляцию в TL, предположительно из-за тканеспецифических различий в радиочувствительности, которые влияют на гомеостаз теломер (90–100 i 90–101, 90–100 и 90–101). y скорость истощения теломер и эффекты теломеразы) в одних тканях больше, чем в других.

Воздействие стресса может индуцировать экспрессию теломеразы у животных ^{19 , 21 , 22} . Повышенная регуляция теломеразы и короткие TL характерны для рыжих полевок, подвергшихся воздействию радионуклидов окружающей среды в ЦЭЗ. Влияние на динамику теломер у человека неясно, поскольку в исследованиях поздних последствий воздействия радиоактивных осадков в Чернобыльской АЭС сообщалось о противоположных результатах либо небольшого удлинения ⁷⁰ , либо укорочения ⁷¹ теломер лейкоцитов. рабочие.Люди могут увеличивать экспрессию теломеразы в ответ на острый стресс ²⁰ , но экспрессия теломеразы, связанная с воздействием радиации окружающей среды у людей, неизвестна. Конечно, трудно сравнивать эти данные о людях с нашим исследованием, поскольку рыжие полевки постоянно подвергаются воздействию радионуклидов в почве и внутри организма через свой рацион; более того, мелкие и крупные животные имеют различный гомеостаз теломер, особенно в характере экспрессии теломеразы в соматических тканях взрослых ^{9 , 12} .Однако наши данные по теломеразе сопоставимы с исследованиями на клеточных линиях; активация теломеразы является обычным ответом клеточных линий на острое воздействие ионизирующего излучения (> 1 Гр) ^{19 , 31} . Учитывая тканеспецифические различия в экспрессии теломеразы и динамике теломер у рыжих полевок, требуется дальнейшая работа над другими механизмами, которые могут влиять на динамику теломер в ответ на стресс. Например, уровни метилирования в субтеломерных областях могут влиять на динамику теломер, регулируя частоту событий теломерной рекомбинации или экспрессию генов, участвующих в поддержании теломер ⁷² , и могут иметь отношение к поддержанию теломер у видов, населяющих CEZ, как радиация Было показано, что воздействие изменяет уровни метилирования всего генома у Pinus silvestris из CEZ ⁷³ .

В настоящее время экспрессия теломеразы игнорируется в нашем понимании динамики теломер в популяциях диких животных (но см. теломеразы в соматических тканях у взрослых. Таким образом, в то время как TL и скорость потери теломер широко связаны с продолжительностью жизни ⁷⁴ , экспрессия теломеразы является другим механизмом, связанным с (клеточным) долголетием ^{75 , 76} .Мы также предостерегаем от интерпретации, что обычно короткая длина теломер, связанная с CEZ, является доказательством того, что теломераза не поддерживает теломеры или что теломераза направлена ​​на другие молекулярные функции. Поскольку теломеры чувствительны к повреждению факторами, усиливающими окислительный стресс (такими как радиация), неясно, будут ли длинные теломеры сами по себе лучше адаптироваться к стрессовой среде. Например, клеточные линии мышей или мышей с короткими теломерами и отсутствием экспрессии теломеразы наиболее чувствительны к острому воздействию ионизирующего излучения ^{19 , 30 , 77} , что указывает на то, что теломераза может защищать короткие теломеры от радиации. наведенное повреждение ⁷⁸ .Более длинные теломеры представляют большую мишень (физическую длину) для радиационного повреждения, а чрезмерно длинные теломеры могут приводить к нестабильности генома ⁷⁹ . Следовательно, комбинация коротких теломер, которые лучше защищены/восстановлены (90–100 i 90 101. 90 100 e 90 101. посредством экспрессии теломеразы), а не попытки поддерживать длинные теломеры, может быть более эффективным методом поддержания клеточной функции и стабильности генома в областях.