Работа в николаеве без посредников: Работа в Николаеве. Вакансии в Николаеве — Work.ua

Содержание

Работа ᐈ Домработница без посредников Николаев – Вакансии Домработница без посредников

Как зарабатывать на сервисе Kabanchik.ua?

Kabanchik.ua – уникальный онлайн-сервис для поиска работы и подработки в 54 городах Украины в более чем 800 различных категориях услуг.

На сервисе вы можете найти подходящий вам вид работы: временную работу, удалённую работу, работу с неполной занятостью или просто ежедневную подработку с моментальной оплатой. Работать на Kabanchik.ua может каждый гражданин Украины, который достиг возраста 16 лет. На сервисе достаточно заказов как для опытных квалифицированных специалистов, так и для студентов.

Kabanchik.ua – удобный вид заработка в городе Николаев.

Как начать работать?

Чтобы стать специалистом на Kabanchik.ua, необходимо пройти процесс верификации аккаунта, после чего вы получите доступ к заказам в городе Николаев.

Для начала работы на Kabanchik.ua необходимо выполнить следующие шаги:

  1. Регистрация и подтверждение контактных данных
  2. Выбор подходящих категорий услуг для работы
  3. Заполнение анкеты на верификацию
  4. Поиск подходящих заказов
  5. Выполнение заказов и получение денег от заказчика

К выполнению заказа отнеситесь максимально ответственно, так как от этого зависит ваша оценка и отзыв заказчика. Проявите вежливость и внимательность, а также будьте пунктуальны. Высокий рейтинг и хорошие оценки заказчиков помогут вам получать прямые поручения от заказчика и больше зарабатывать.

Преимущества работы на Kabanchik.ua

Сервис заказа услуг Kabanchik.ua является самой большой площадкой для поиска подработки и дополнительного заработка в Украине. Услугами сервиса воспользовались уже более 60 000 заказчиков, ежемесячно публикуется более 15 000 заказов на услуги, средний чек заказа – более 500 грн.

Работая на Kabanchik.ua, вы можете самостоятельно планировать свой график работы. Вы можете использовать сервис как для дополнительного заработка, так и в роли основного места работы.

Для получения информации о новых заказах вам не нужно постоянно находится на сайте. Уведомления о новых заказах будут приходить вам на электронную почту, а о личных поручениях заказчиков мы уведомим вас с помощью СМС.

Для более удобной работы специалистов с сервисом мы разработали мобильные приложения для смартфонов на iOS и Android (только для верифицированных специалистов).

Начните зарабатывать с помощью Kabanchik.ua уже сегодня! Для начала регистрации нажмите кнопку “Зарегистрироваться”.

Работа охранник сторож в николаеве. Вакансии

  • Главная
  • Читать все
  • Работа орнитолог
  • Инженер конструктор донецк вакансии
  • Ищу работу ежедневная оплата грузчик
  • Работа дефектолог в москве
  • Работа в москве вакансии проводник
  • Работа в рязани вакансии водителя
  • Работа сварщиком вахтой в тюмени
  • Работа в волгограде помошник юриста
  • Вакансии хирурга в москве
  • Организация работы участкового педиатра
  • Аттестационная работа врача терапевта
  • Вакансии водитель юао
  • Перспективный план работы учителя дефектолога
  • Улан удэ вакансии журналист
  • Работа в новосибирске художник
  • Работа экономист тольятти
  • Шнейдер электрик вакансии
  • Работа в челябинске уборщица
  • Работа парикмахером в челябинске
  • Вакансии бухгалтера в ульяновске
  • Вакансии водителя в ломоносовском районе
  • Работа охранником в арзамасе
  • Работа в симферополе водитель экспедитор
  • Вакансии помощник бухгалтера без опыта
  • Формы работы с воспитателями
  • Аттестационная работа участкового фельдшера
  • Годовой план работы старшего воспитателя
  • Вакансии архитекторов в иваново
  • Работа психолога в психоневрологическом интернате
  • Работа в обнинске инженером
  • Списать домашнюю работу по математике
  • Работа инженер по обслуживанию зданий
  • Вакансия диагност электрик
  • Работа диджеем в клубе
  • Характеристика работы бухгалтера
  • Работа бухгалтер неполный рабочий день
  • Работа инженер менеджер
  • Ищу работу фельдшера в москве
  • Вакансии сергиев посад повар
  • Кинолог охранник работа
  • Ищу работу без посредников водителем
  • Работа в лаборатории лаборант
  • Ищу работу биолог
  • Вакансия водитель вечером
  • Работа в спб экспедитор грузчик
  • Парикмахер работа воронеж
  • Работа с файловыми менеджерами
  • Ищу работу сварщика в омске
  • Режим работы социального педагога
  • Вакансии трактористов в полтаве
  • Работа в уфе трактористом
  • Продажа сантехники вакансии
  • Энгельс работа экономист
  • Самоанализ работы учителя начальной школы
  • Авиарынок работа для летчиков
  • Учитель музыки вакансии в москве
  • Вакансии судебных приставов в костроме
  • Работа продавец вакансии в новосибирске
  • Работа слесарем ремонтником
  • Расточник вакансии
  • Нормы работы дворников
  • Внуково работа грузчик
  • Работа в новосибирске фотомоделью
  • Вакансии кассира в твери
  • Работа юриста в одессе
  • Работа сочи вакансии бухгалтер
  • Время работы терапевта
  • Вакансии водителя ванкорнефть
  • Работа фармацевт в сергиев посаде
  • Планирование своей работы аудитор осуществляет
  • Работа дизайнер херсон
  • Работа психологом в кирове
  • Работа уборщицы в витебске
  • Персональный водитель вакансии свао
  • Работа в кургане грузчик экспедитор
  • Работа в щелково дизайнером
  • Индивидуальные формы работы с педагогами
  • Водитель трамвая вакансии москва
  • Ищу работу в киеве кладовщик
  • Работа электриком в испании
  • Работа водитель с личным транспортом
  • Работа водителем в банке
  • Работа журналистом в саратове
  • Вакансии инженер водоснабжения
  • Работа продавец зарплата
  • Вакансии педагога в москве
  • Вакансии логопеда в нижнем новгороде
  • Орехово зуево работа фармацевтом
  • Модели нлп в работе психолога
  • План работы социального психолога
  • Работа в тольятти менеджер
  • Работа дизайнер штор харьков
  • Работа пожарным в санкт петербурге
  • Работа сварщик в иваново
  • Смотреть вакансии водителя
  • Новые вакансии рязань бухгалтер
  • Работа сварщик сочи вакансии
  • Вакансии бухгалтера в щелково
  • Работа в москве монтажник трубопровода
  • Опыт работы воспитателя
1 2 3
  • Меню

    • работа орнитолог
    • ищу работу ежедневная оплата грузчик
    • работа в москве вакансии проводник
    • работа сварщиком вахтой в тюмени
    • вакансии хирурга в москве
    • аттестационная работа врача терапевта
    • перспективный план работы учителя дефектолога
    • работа в новосибирске художник
    • шнейдер электрик вакансии
    • работа парикмахером в челябинске
    • вакансии водителя в ломоносовском районе
    • работа в симферополе водитель экспедитор
    • формы работы с воспитателями
    • годовой план работы старшего воспитателя
    • работа психолога в психоневрологическом интернате
    • списать домашнюю работу по математике
    • вакансия диагност электрик
    • характеристика работы бухгалтера
    • работа инженер менеджер
    • вакансии сергиев посад повар
    • ищу работу без посредников водителем
    • ищу работу биолог
    • работа в спб экспедитор грузчик
    • работа с файловыми менеджерами
    • режим работы социального педагога
    • работа в уфе трактористом
    • энгельс работа экономист
    • авиарынок работа для летчиков
    • вакансии судебных приставов в костроме
    • работа слесарем ремонтником
    • нормы работы дворников
    • работа в новосибирске фотомоделью
    • работа юриста в одессе
    • время работы терапевта
    • работа фармацевт в сергиев посаде
    • работа дизайнер херсон
    • работа уборщицы в витебске
    • работа в кургане грузчик экспедитор
    • индивидуальные формы работы с педагогами
    • ищу работу в киеве кладовщик
    • работа водитель с личным транспортом
    • работа журналистом в саратове
    • работа продавец зарплата
    • вакансии логопеда в нижнем новгороде
    • модели нлп в работе психолога
    • работа в тольятти менеджер
    • работа пожарным в санкт петербурге
    • смотреть вакансии водителя
    • работа сварщик сочи вакансии
    • работа в москве монтажник трубопровода
    • работа в карьере водителем
    • работа в саратове кладовщик вакансии
    • редактор фото вакансии
    • лабораторные работы по дискретной математике
    • работа логопеда с семьей
    • вакансии бухгалтера в копейске
    • договор найма продавца на работу
    • работа барменом м щелковская
    • работа в тольятти вакансии водитель
    • вакансии техник электрик
    • вакансии менеджер дизайнер
    • электрик работа в калуге
    • работа психолог онлайн
    • работа в омске врач терапевт
    • работа в рязани вакансии юриста
    • работа в днепропетровске офис менеджер
    • работа в москве врач стоматолог
    • вакансии бухгалтера в сао
    • работа в донецке вакансии бухгалтер
    • работа личный водитель в спб
    • работа вахта слесарь кипиа
    • режим работы менеджера
    • работа для начинающих парикмахеров
    • логопед дефектолог работа
    • воспитательная работа тренера преподавателя
    • работа пожарным спасателем
    • экспресс сочи вакансия водителя
    • работа в дмитрове менеджером
    • описание работы парикмахера
    • инженер электрик вакансии в челябинске
    • план работы по посланию президента
    • уборщица вечерняя вакансии минск
    • вакансии программист без опыта
    • работа монтажник сантехник
    • работа на судне поваром
    • машинист экскаватора без опыта работы
    • работа в курске сварщиком
    • менеджер по работе сперсоналом
    • работа в аппарате президента
    • работа массажистом без медицинского образования
    • работа продавец в краснодаре
    • помощник экономиста вакансии
    • удаленная работа инженер конструктор
    • работа резюме менеджер по туризму
    • краснодар работа художник
    • вакансии менеджер по кредитам
    • вакансии кондитера в петербурге
    • повар работа в николаеве
    • вакансии в москве врача эндокринолога
    • водитель по совместительству вакансии

Свежие вакансии %d0%a1%d0%b2%d0%b0%d1%80%d1%89%d0%b8%d0%ba %d0%9d%d0%b8%d0%ba%d0%be%d0%bb%d0%b0%d0%b5%d0%b2 от работодателей.

На поисковике работы UArabota
Робота в місті %d0%9d%d0%b8%d0%ba%d0%be%d0%bb%d0%b0%d0%b5%d0%b2 – важливий сайт з резюме і вакансіями по місту %d0%9d%d0%b8%d0%ba%d0%be%d0%bb%d0%b0%d0%b5%d0%b2

Вас цікавлять вакансії %d0%a1%d0%b2%d0%b0%d1%80%d1%89%d0%b8%d0%ba в місті %d0%9d%d0%b8%d0%ba%d0%be%d0%bb%d0%b0%d0%b5%d0%b2?
Тоді ви там де і потрібно!
Наш портал UArabota.com.ua допоможе вам задовольнити всі потреби в пошуку роботи. Робота %d0%a1%d0%b2%d0%b0%d1%80%d1%89%d0%b8%d0%ba в місті %d0%9d%d0%b8%d0%ba%d0%be%d0%bb%d0%b0%d0%b5%d0%b2. – Це реальна можливість легко, безкоштовно і максимально швидко знайти цікаву та високооплачувану роботу %d0%a1%d0%b2%d0%b0%d1%80%d1%89%d0%b8%d0%ba в %d0%9d%d0%b8%d0%ba%d0%be%d0%bb%d0%b0%d0%b5%d0%b2

У Мережі є безліч сайтів, готових допомогти у працевлаштуванні. Однак ви вибрали нас, адже ми забезпечуємо:

  • максимальне число вакансій в %d0%9d%d0%b8%d0%ba%d0%be%d0%bb%d0%b0%d0%b5%d0%b2 завдяки об єднанню різних джерел інформації;
  • щосекундне оновлення бази вакансій в місті %d0%9d%d0%b8%d0%ba%d0%be%d0%bb%d0%b0%d0%b5%d0%b2;
  • простоту інтерфейсу та юзабіті;
  • інтуїтивно зрозумілу навігацію;
  • підписку на нові вакансії email;
  • повністю безкоштовні послуги;
  • виключно актуальні, в т. ч. «Гарячі» вакансії %d0%a1%d0%b2%d0%b0%d1%80%d1%89%d0%b8%d0%ba в місті %d0%9d%d0%b8%d0%ba%d0%be%d0%bb%d0%b0%d0%b5%d0%b2.

События, происходящие на Украине в течение последних нескольких лет, привели к коренным изменениям в самосознании нашего народа, повышению гражданской ответственности. Жители страны все активнее проявляют патриотические настроения – носят вышиванки, патриотические футболки, многие украшают одежду голубыми и желтыми лентами, значками, на машинах развиваются национальные флаги, проводятся флешмобы за единую Украину, а на подъездах многоэтажных домов появляются граффити с подсолнечниками.

Ситуация на 10.03. Ч.2. Итог: Карты, анализ. Мариуполь. Николаев. МО РФ об укрбиолабах. ХФТИ: пожар?

“Политическая пропаганда”. Итоговый выпуск подготовлен по ТК “Dambiev”, “Рыбарь”, “Реадовка”, “ДОНЕЦК 🅉 В МАКЕЕВКЕ”, “Николаев – пуп земли”.
Для начала дам карты на конец 10 марта 2022 года. Сегодня в топе карт – ТК “Рыбарь”, так как военный картодел из ЖЖ “Драгонферст” взял паузу до 12 марта как минимум. Карта – кликабельна, после нажатия переходит на страницу с полноразмерной картой.


23:49 Карта боевых действий и территориального контроля на Украине к исходу 10 марта 2022 года

▪️ На Николаевском направлении значительно расширена зона контроля в сторону Никополя.
▪️ Под Донецком союзные силы продвигаются к Угледару и зачищают села к западу от Волновахи.
▪️ Бои под Броварами в Киевской области.
▪️ Продолжаются тяжелые бои за Мариуполь и Харьков.


02:13 Обстановка в Николаевской области к исходу 10 марта 2022 года
▪️ ВС РФ перемещаются преимущественно по рокадным дорогам через мелкие села и деревни в объезд укрепрайонов ВСУ и теробороны. Реального контроля за трассами к западу от Снигиревки ни у одной из сторон нет.


▪️ Ракетные войска и артиллерия ВС РФ наносили удары по объектам в Корабельном районе Николаева, аэродроме Кульбакино и Воскресенске. Возобновилось огневое поражение и стрелковые бои на севере — в районе Вознесенска.
▪️ Существенно расширена зона контроля на востоке области: ВС РФ берут под контроль населенные пункты по направлению Нововоронцовка — Никополь.

“Политическая пропаганда”. Ниже – отличная статья с элементами пропаганды из СРВ. Товарищи вьетнамцы вдарили по хохлам по полной, обвинив их в предательстве России! )))

18:22 09 марта 2022 года Интернет издание Торгово-промышленной палаты Социалистической Республики Вьетнам  diendandoanhnghiep.vn о специальной военной операции российской армии на Украине (“ПП” Скриншот – справа): “Украина сначала предала близкую страну Россию в угоду старшего брата (США), но когда пришла война никто не помог этой стране. У украинцев когда-то была возможность выбирать и определять направление своего национального развития. К сожалению, они делали ошибки, одну за другой, оставляя свой суверенитет и национальную безопасность в руках коллективного Запада”.



21:54 09 марта 2022 года Maxar Technologies публикует спутниковые снимки блокированного Мариуполя. 9 марта 2022 года.

19:56 Украина 2022 в одной фотографии. Нарочно такое придумать невозможно. (“ПП” Голожопый мародер примотан к флагу укров пищевой пленкой: данная композиция должна быть использована в большом гербе украины. Голожопого мародера можно поставить в качестве щитодержателя с трызубом. К щиту он должен быть обязательно примотан пищевой пленкой, ага.)

 
08:59 Военный корреспондент китайского телеканала Phoenix TV Лю Юй Гуан продолжает обозревать военную операцию по освобождению территории ДНР.
На данный момент журналист вещает из окрестностей Мариуполя и описывает непростую сложившуюся ситуацию. Так, Лю Юй Гуан, поговорив с местными жителями, лично убедился, что именно украинские национальные батальоны обстреливают дома и инфраструктуру, угрожают расправой за лояльное отношение с армией ДНР, а также не позволяют мирным гражданам воспользоваться гуманитарными коридорами.
Особое внимание китайский корреспондент уделил документу, обнародованному Министерством обороны Российской Федерации, в котором четко прописан план о готовящемся нападении украинской армии. К счастью, благодаря российским войскам данный сценарий удалось избежать. (“ПП” Если видеокадры с флагом СССР – не последующая вставка в репортаж, то получается, что Лю Юй Гуан уделил немало внимания и символике СССР на колоннах российской техники!)

16:45 Минобороны РФ обнародовало документы, подтверждающие разработки биологического оружия с использованием летучих мышей на Украине
В документах зафиксирован факт передачи биоматериалов из украинских лабораторий в Австралию и Германию, подробно расписан сам проект (https://t.me/readovkanews/27869) по изучению летучих мышей, а также проект по изучению мигрирующих птиц UP-4 и протокол отлова в России птиц с Украины. Помимо прочего, ведомство обнародовало и акты уничтожения доказательств в биолабораториях.
Все это, по словам ведомства, указывает на то, что США и их союзники намеревались создать биоагенты, «способные избирательно поражать различные этнические группы населения».


Видео. Брифинг по результатам анализа документов о военно-биологической деятельности США на Украине Опубликовано 10 марта 2022 года
Оригиналы и переводы документов
https://disk. yandex.ru/d/62hsNB8kC7MXPQ

“Политическая пропаганда”. Интересное наблюдение отмечено в комментариях. К видеовыступлению начальника РХБ войск ВС РФ И.А. Кириллова английские субтитры вроде как есть, но Ю-тьюб их цензурирует: “В них нет деталей о Конго-Крымской лихорадке, отсылке образцов и т д”.
Кстати, рекомендую выкачать образцы с Яндекс-диска по ссылке под видео, пока доступ к нему не закрылся.

16:45 Брифинг начальника войск РХБ защиты Игоря Кириллова об американских биолабораториях на Украине

▪️ Целью проекта UP-4, который реализовывался с участием лабораторий Киева, Харькова и Одессы и был рассчитан на период до 2020 года, являлось изучение возможности распространения особо опасных инфекций через мигрирующих птиц, в том числе высокопатогенного гриппа H5N1, летальность которого для людей достигает 50 процентов, а также болезни Ньюкасла.
▪️  Украина имеет уникальное географическое положение, где пересекаются трансконтинентальные пути миграции: в рамках данного проекта было изучено 145 биологических видов. Были выявлены как минимум два вида перелетных птиц, маршруты которых проходят преимущественно через территорию России. Одновременно обобщались сведения о маршрутах миграции, пролегающих через страны Восточной Европы.
▪️ Интересен проект Р-781, где в качестве переносчиков потенциальных агентов биологического оружия рассматриваются летучие мыши. Обозначено изучение бактериальных и вирусных патогенов, способных передаваться от летучих мышей человеку: возбудителей чумы, лептоспироза, бруцеллеза, а также коронавирусов и филовирусов.

“Политическая пропаганда”. Тут делаю паузу для “лирического отступления” и радуюсь тому, что мне осенью 2020 года было не лень расшифровать выступление украинского нардепа Рената Кузьмина (см. пост “ПП” от 01 октября 2020 года “Депутат Рады Р. Кузьмин: А не с украинских ли биолабораторий родом “корона”, поразившая Европу?”), который, в частности рассказывал такие вещи:
“После 2014 года министром здравоохранения была назначена гражданка США Ульяна Супрун, которая ликвидировала напрочь санитарно-эпидемиологическую службу украины и на базе бывших СЭС она организовала работу секретных биолабораторий США. Она фактически была куратором этих лабораторий. До сих пор эти лаборатории занимаются исследованиями и разработками в области биологического оружия…
Последние события в Одессе свидетельствуют о том,ч то это очень опасные предприятия. Я напомню, в центральной лаборатории в Одессе – Институте имени Мечникова – произошло массовое заражение сотрудников коронавирусом. ПОэтому надо задать вопрос к властям украины – а чем занимаются эти лаборатории? И не является ли украина источником распространения коронавируса в Европе? Нам демонстрируют китайский Ухань и говорят, что именно оттуда коронавирус попал в Европу из каких-то тамошних американских биолабораторий. Слушайте, ну гораздо ближе Украина к Италии и Испании. (“ПП” Особенно, если вспомнить количество гастарбайтеров, которые с украины ездят по Европам, а потом приезжают отдыхать в ту же Одессу или Скадовск Херсонской области).
“ПП” Видео с Кузьминым, “Ю-тьюбом”, естественно, удалено. Но я то его сохранил! Хахах! Возвращаемся к конспектированию телеграмм-каналами выступления И. А. Кириллова:

Исследования проводятся в непосредственной близости от границ России — в районах черноморского побережья и на Кавказе. Проект реализуется с привлечением подконтрольных Пентагону грузинской биолаборатории в кооперации с Политехническим институтом Вирджинии и Геологической службой США.
▪️ Проект UP-8 направлен на изучение вируса Конго-Крымской геморрагической лихорадки и хантавирусов на Украине. Один из документов подтверждает, что все серьезные исследования повышенной опасности проводятся под непосредственным руководством специалистов из США.
▪️ Подтверждается факт выплат Управлением министерства обороны США денежных средств за участие в исследованиях напрямую без привлечения посредников. Обращает на себя внимание крайне скромная, по американским меркам, оплата труда. Это свидетельствует о низкой оценке профессионализма украинских специалистов и пренебрежении к ним со стороны американских коллег.

▪️ Изученные материалы содержат предложения по расширению военно-биологической программы США на территории Украины. Так, обнаружилось свидетельство продолжения завершенных биологических проектов UP-2, UP-9, UP-10, направленных на изучение возбудителей сибирской язвы и африканской чумы свиней.
Пентагон интересует также насекомые переносчики, способные распространять опасные инфекционные заболевания. Анализ полученных материалов подтверждает факт передачи из биолаборатории в Харькове за рубеж более 140 контейнеров с эктопаразитами летучих мышей — блохами и клещами.
▪️ Из центра общественного здоровья министерства здравоохранения Украины в референс-лабораторию инфекционных болезней австралийского института Догерти было передано 350 криоконтейнеров с образцами сыворотки крови под предлогом определения титров антител.
▪️ В рамках финансируемого Германией проекта № 68727 ЕN по изучению возбудителей Конго-Крымской геморрагической лихорадки и хантавирусов в институт тропической медицины имени Бернанда Нохта (Гамбург) была передана одна тысяча образцов сыворотки крови граждан из различных областей Украины, относящихся исключительно к славянскому этносу.
▪️ Одной из задач США и их союзников является создание биоагентов, способных избирательно поражать различные этнические группы населения.
▪️ Американцам уже удалось эвакуировать из лабораторий Киева, Харькова и Одессы большую часть документации, включая базы данных, биоматериалы и оборудования во Львовский научно-исследовательский институт эпидемиологии и гигиены и в американское консульство в г. Львов. Не исключена вероятность перемещения части коллекции на территорию Польши.
По сути, своим высказыванием Нуланд косвенно подтвердила осуществление Пентагоном военно-биологической программы на Украине в обход действующих международных договоренностей.


20:35 Бои за освобождение Мариуполя на спутниковых снимках  Black Sky. 10 марта 2022 года.

22:39 В Харькове после серии взрывов горит институт с ядерным реактором
Местные жители сообщают, что в Харькове после серии взрывов загорелся физико-технический институт.
Ранее сообщалось, что СБУ и боевики нацбатальонов заминировали реактор экспериментальной ядерной установки, находящийся там.   (“ПП” В комментах некоторые пользователи заявляют: “Пожар в общаге рядом с институтом. Не пугайте народ, а то сейчас разнесут, что русские устроили ядерный взрыв”).

“Политическая пропаганда”. Теперь карта и анализ событий дня от ТК “Реадовка”.

23:43 Карта военных действий на 10 марта
Внимание! Мы уточнили границы фронтов на севере! Не пугайтесь, что красного стало меньше, мы не отступаем, как раз наоборот — на этих участках у нас продвижение и укрепление позиций, просто появилась более актуальная информация по этим местам. Мы стараемся давать вам максимально свежий и объективный материал!
В Мариуполе продолжается зачистка. Продвижение в северной и восточной частях города. Запорожье: ВС РФ обходит Гуляйполе с востока и продвигаются на северо-восток. С севера этот фронт давят силы ДНР. В Северодонецке — Лисичанске продолжаются бои в районе агломерации. В Киеве продолжаются бои к западу и востоку от города. Бровары пока под ВСУ, но у нас отмечается продвижение на юг и юго-запад, обтекают укрепрайон ВСУ.
Самые интересные движения сегодня в Николаевской области, началось успешное наступление в сторону Кривого Рога и Никополя. Так же были нанесены ракетные удары в этих районах.

23:46 Как видят ситуацию в Мариуполе националисты «Азова»?
Основные тезисы замкомандира нацполка (позывной «Калина»):
▪️ это циничное целенаправленное преступление против человечество;
▪️ Россия наносит удары по жилым домам;
▪️ Россия признала, что разбомбила роддом;
▪️ жителей Мариуполя лишили связи;
▪️ мы не простим.
Понимаете, там другая правда. И пока её ретранслируют вот такие вот «калины» — ничего иного доказать будет нельзя.
(“ПП” Разместил здесь, чтобы показать: “азовцам” для оправдания любые средства хороши. Вот и львовянин-бандеровец Святослав Паламар-“Калина” (ученик Андрея Парубия в нациковской организации “Патриоте украины”) делает вид, что во всем виновата Россия, а вверенные ему головорезы защищают город от россйиской агрессии. Я думаю, персонально для таких нациков надо будет ввести в ДНР смертную казнь для военных преступников и по традициям Нюрнберга всех осужденных вешать, чтоб не переводить на них патроны).

00:27 Пентагон снова заявил, что на Украине нет американских лабораторий по разработке биологического оружия.
По словам представителей оборонного ведомства США, те лаборатории, которые находятся на Украине, якобы использовались для уничтожения еще советского биологического оружия. Именно в уничтожение, а вовсе не в создание новых боевых вирусов американцы инвестировали миллионы долларов — в этом теперь пытаются убедить мировую общественность военные США.
Интересно, как тогда объяснить факт поспешного уничтожения (https://t.me/readovkanews/27824) украинцами материалов лабораторий после начала специальной военной операции? Ведь по новой логике Пентагона, на этих объектах не должно было происходить ничего запрещенного. (“ПП” То есть еще раз: Нуланд под присягой признала факт наличия таких лабораторий и разработок в них на слушании в Конгрессе, Такер Карлсон разнес эту новость по “Фокс-ньюс” на всю Америку, а Пентагон опять упираетсяя? ВИдите, с кого берет пример “Калина”! В американской парадигме никогда нельзя извиняться или признавать свои ошибки).


23:49 Очень любопытный расклад по Николаеву 🧐 (“ПП” ТК “Николаев-пуп земли” сделал пост со ссылкой на анализ “ПП” по ситуации в Николаеве).

“Политическа пропаганда”. А вот прогноз с ТК “Нечаев 017”.

00:39 Что там по Киеву? (10.03.2022)

Половина населения уже покинула город, заявил (https://t.me/vzglyad_ru/46985) Кличко. Как велись подсчеты — загадка, но по словам киевлян, внешне город действительно выглядит полупустым.
При этом спрос на эвакуацию все равно остается высоким и люди по-прежнему жалуются на невозможность свободного выезда из Киева ни по автодорогам, ни с помощью поездов. Кроме того, ВСУ продолжают блокировать выезд людей в сторону Белоруссии и России.
• Утром при странных обстоятельствах пропал видный публицист и сатирик, ревностный защитник канонического православия Ян Таксюр (https://t.me/Politnavigator/103117). По данным коллег, у него прошли обыски, и с тех пор не выходит на связь.
Также, по предварительным данным, СБУ приезжало домой к публицисту Дмитрию Скворцову и историку Александру Каверину. Их судьба остается невыясненной. Продолжаются проблемы и у Дмитрия Джангирова, ранее захваченного СБУ.
• На левом берегу Киева убит (https://t.me/boris_rozhin/30640) Дмитрий Демьяненко — это, на секундочку, бывший заместитель начальника Главного управления СБУ по Киеву и Киевской области. Причём убит силами МВД, что указывает на продолжающийся бардак среди силовиков. (“ПП” Видать, вели друг за другом слежку, уличая в сотрудничестве с нациками и теперь и полиция и сбу-шники бояться взаимного разоблачения).
• Левый берег Киева остаётся дугой стабильности и относительного порядка, несмотря на все более активные бои в Броварском районе Киевщины. Там, кстати, ВСУ умудрились победить (https://t.me/rybar/28150?single) инфраструктуру завода Coca-Cola.
• На правом берегу российские войска продолжают объятия древнерусской столицы. Благодаря режимам тишины и эвакуации населения интенсивность боев здесь не слишком велика, но это не мешает ВС России укреплять свои позиции.

Внешний контур:
Макрон не считает (https://t.me/vzglyad_ru/47035) возможным вступление Украины в ЕС в условиях военного конфликта. А Рютте напомнил (https://t.me/stranaua/30159) Зеленскому о том, что ускоренной процедуры по вступлению в Евросоюз не существует.
• Госдеп, похоже, поставил точку в истории с польскими самолетами: МиГ-29 не будут (https://t.me/rt_russian/98740) переданы ВСУ, потому что это прямая эскалация конфликта с Россией. Вдобавок Пентагон сообщил, что вопрос размещения на Украине ЗРК Patriot ни с кем не обсуждается (https://t.me/stranaua/30182).
• Лавров встретился (https://t.me/vzglyad_ru/46984) с Кулебой в Турции, где анонсировал избавление России от иллюзий надежности Запада и дал понять, что переговоры с представителями Зеленского носят действительно ритуальный характер.
В то же время главным бенефициаром встречи, как и прогнозировалось, стал Эрдоган, превративший свою внешнею политику в смесь византийщины и неосманизма.
На практике это выглядит так: Эрдоган осуждает спецоперацию России и поставляет БПЛА для ВСУ, но при этом выступает против антироссийских санкций, дискриминации русских на Западе, и сохраняет все контакты с Москвой. Многовекторность — она такая. (“ПП” Это называется “двоежопие” по заветам дедушки Леонида Кучмы, ага!)
Прогноз: В ближайшие дни, как справедливо отмечают (https://t.me/vzglyad_ru/47021) коллеги, мы увидим начало второй фазы (https://t.me/vzglyad_ru/46908) спецоперации. Она предполагает окружение основой части ВСУ в Донбассе, а также продвижение к Одессе, Кривому Рогу, Днепропетровску и Запорожью.
Кроме того, ожидается последовательная работа по окружению Киева. А там, вероятно, Кулеба еще раз захочет встретиться с Лавровым, однако список условий (https://t.me/dadzibao/6579) со стороны Москвы для команды Зеленского будет еще жестче.
Берегите себя!

“Политическая пропаганда”. Вместо Александра Семченко на его канале временно вещает Дмитрий Василец – украинский общественник. Анализа ситуации по фронтам на конец 10 марта он не провел, однако осветил ряд моментов из внутриполитической ситуации навукраине.


Видео. Вечер 10 марта. Война за Украину. Террор и запреты Опубликовано 10 марта 2022 года

Террор на украине против лидеров мнений. Захват аккаунтов в соцсетях, где начинают писать проукраинские посты. Василец взывает к какой-то законности в действиях сласти, которая состоялась только в ходе госпереворота. Право сильного – то право, которое и осталось в хохляндии. Вроде как Василец это понимает.
04:00 – начинается вроде как анализ. Противостояние НАТО и РФ на территории украины вошло в горячую фазу. Предрекает долгий и кровавый конфликт. Сценарии для украины либо плохие, либо очень плохие. Предлагает подписываться на телеграмм-каналы, потому что “Гугл” начинает закрывать Ю-тьюб-каналы украинских оппозиционеров.

“Политическая пропаганда”. Что касается Института изучения войны, то он сегодня набабарыкал изрядно, да так, что обзор на сегодняшний день не поместился на главной обновляемой странице проекта. Причем Институт вдарился в прогнозирование “фальш-флагов” со стороны РФ – этаких операций по дезинформации.


Оценка Российской наступательной кампании, 10 марта
10 марта, 4:00 вечера по восточному времени
Источник
Мейсон Кларк, Джордж Баррос и Екатерина Степаненко

Возрастает вероятность того, что украинские войска смогут остановить российские сухопутные войска, пытающиеся окружить и захватить Киев. Российские войска также, по-видимому, в значительной степени зашли в тупик вокруг Харькова и отвлеклись от захвата этого города. Российские наступления на юге вокруг Николаева и в направлении Запорожья, а также на востоке вокруг Донецка и Луганска также достигли незначительного прогресса за последние 24 часа. Россия, вероятно, сохраняет гораздо большую боевую мощь на юге и востоке и, вероятно, возобновит более эффективные наступательные операции в ближайшие дни, но эффективный охват и скорость таких операций сомнительны, учитывая общую эффективность российских вооруженных сил на сегодняшний день. Пока нет никаких признаков того, что российские вооруженные силы реорганизуются, реформируются, извлекают уроки или принимают другие меры, которые привели бы к внезапному изменению темпов или успеха их операций, хотя численные различия между Россией и Украиной оставляют открытой возможность того, что Москва сможет восстановить быструю мобильность или эффективную городскую войну на поле боя. (“ПП” Меня не покидает ощущение, что все американские эксперты и военные пытаются подгонять Россию за счет скорейшего уничтожения помех в быстром продвижении – жителей и гражданской инфраструктуры. Хороши советчики, мать их за ногу!)

Российские войска вокруг Киева не пытались возобновить наступательные операции в масштабе нескольких батальонов 10 марта после провала ограниченных усилий 8-9 марта. Украинские войска нанесли серьезный ущерб российской бронетанковой колонне в районе Броваров к востоку от Киева, что, вероятно, еще больше подорвало усилия России по созданию условий для наступательных операций на восточном берегу Днепра. Украинское сопротивление вдоль всех российских линий связи от восточного Киева до российской границы близ Сум продолжает подрывать усилия России по наращиванию боевой мощи вблизи столицы. Эпизодические, ограниченные и в значительной степени неудачные российские наступательные операции вокруг Киева все больше подтверждают неоднократные оценки украинского Генерального штаба о том, что России не хватает боевой мощи вблизи столицы для проведения успешных наступательных операций в больших масштабах. (“ПП” Ладно, это пиндосы так видят, хрен с ними!)

Выводы
Российские операции вокруг Киева оставались в значительной степени застопоренными в течение последних 24 часов.
Украинские войска серьезно повредили российское бронетанковое подразделение к востоку от столицы, что, вероятно, сорвало российские усилия по окружению или штурму города с востока. (“ПП” Блин, а кто сказал, что штурм предполагался и именно 10 марта? Только вы сами в своих предыдущих обзорах на этом и настаивали!)
ВС РФ продолжают бороться в попытках захватить город Чернигов и обеспечить безопасность длинных наземных линий связи от Сумы, которые все еще удерживают украинцы, до восточного Киева.
Новое российское вторжение из западной Беларуси, с поддержкой белорусских сухопутных войск или без нее, кажется все более маловероятным.
Российские войска по-прежнему скованы, пытаясь захватить Мариуполь осадой и бомбардировками.
Усилия России по обходу Николаева и созданию надежной наземной линии связи через реку Южный Буг к северу от Николаева по-прежнему зашли в тупик.
Операции украинских ВВС и ПВО продолжают препятствовать маневру российских сухопутных войск, вероятно, ограничивая российскую непосредственную воздушную поддержку и подвергая российские механизированные силы украинским воздушным и артиллерийским атакам.

Обновление предупреждения: Россия может провести химическую или радиологическую атаку под ложным флагом в качестве предлога для усиления агрессии против Украины
Кэтрин Лоулор с Екатериной Степаненко

Ключевой вывод: Кремль создал информационные условия, чтобы обвинить Украину в проведенной Россией или сфабрикованной Россией химической или радиологической атаке под ложным флагом против гражданского населения в качестве предлога для дальнейшей российской эскалации. (“ПП” То есть провокации “Азова” в Харькове по подрыву реактора ХФТИ – это провокация России? А Хиросима и Нагасаки – это тоже была провокация СССР против США?) Кремль, вероятно, все еще оценивает этот курс действий, но создает необходимые условия для оправдания более широкого насилия в отношении гражданских лиц (“ПП” Каких гражданских?). Этот риск необходимо устранить. Соединенные Штаты и НАТО должны “упреждать” такие усилия Кремля, заранее пресекать попытки Москвы создать информационное прикрытие для эскалации и сдерживать потенциальное применение Россией химического или радиологического оружия. (“ПП” Простите, что, бля? Это откуда такие выводы?)

Недавние сообщения российских государственных СМИ основаны на длительной информационной операции Кремля, направленной на ложное утверждение о том, что Украина, Соединенные Штаты и НАТО планируют химическую или радиологическую атаку на Россию или оккупированную Россией украинскую территорию. Россия может провести или сфабриковать такое нападение и обвинить Украину и НАТО, чтобы оправдать дополнительную агрессию против Украины. (“ПП” Интересно, а куда Институт биологическую атаку потерял, о которой 10 марта из всех утюгов в США вещалось?)

Кремлю давно пора забыть свои имперские мечты

Бывший канцлер МИД Эстонии Индрек Таранд в передаче “Интервью недели” сказал, что империалистические мечтатели, прежде всего, должны спросить себя, почему в их стране до сих пор не научились делать автомобили.

– Между Украиной и Россией прошел уже пятый раунд переговоров. Как я понимаю, Россия требует нейтральный статус от Украины, Украина – прекращение огня и вывод войск. Как вам кажется, удалось ли сторонам хоть сколько-то продвинуться в этих переговорах?
– Из-за военного и дипломатического тумана очень тяжело делать стопроцентные выводы. Между тем, тот факт, что переговоры идут, уже сам по себе важно. В ходе этих пяти раундов изменились начальные позиции сторон. Можно сказать, что дипломатический процесс пошел.
– Если говорить о том, как менялись позиции: украинская сторона утверждает, что позиции российской стороны в некотором смысле смягчились. Позволю себе процитировать: “страна стала адекватно понимать реалии окружающего мира”. О чем это может говорить? О том, что Россия, действительно, взглянула на вещи реально – что все пошло не по плану, о чем, кстати, заявил на днях один высокопоставленный военачальник, глава Росгвардии Виктор Золотов? Или на самом деле Россия притупляет бдительность?
– Затишье ли это перед бурей? Так ситуацию охарактеризовать нельзя, потому что буря уже случилась. В этой буре, к сожалению, много людей погибло, в том числе и мирных граждан. Поэтому никакого салюта (для россиян) не будет. Реальность такова – украинские вооруженные силы очень хорошо выполнили свой долг.
– То есть можно сказать, что Россия столкнулась с той реальностью, которую она не ожидала.
– Да. Можно провести параллели с Зимней войной 1939 г. между СССР и Финляндией. Сталин решил, что сможет завоевать Финляндию за два дня, а в итоге все вышло не по плану. После осознания реального положения на фронте политическое руководство в Москве поменяло свои планы. Начались переговоры. Да, тяжелые и несправедливые, но в целом стороны договорились.
– На днях к переговорам с украинской стороны привлекли министра юстиции Дениса Малюську. В Украине заговорили о том, что это хороший знак – если министр юстиции привлечен к переговорному процессу, значит, договариваются о каких-то конкретных шагах, согласовывают какие-то юридические моменты. Можем ли мы разделять этот оптимизм?
– В общем-то, согласен, если уже специалисты в какой-то степени работают с текстом договора, наверное, тексты уже имеют какой-то смысл. То, что стороны без посредников находятся в одной комнате и ведут переговоры, уже о многом говорит.
– Пока не договорились ни о каких политических нюансах и моментах, но могли бы договориться хотя бы в вопросах гуманитарной помощи. Если посмотреть, что происходит в Мариуполе – тысячи погибших людей, город уже две недели без воды, без электричества, женщины рожают в грязных подвалах. Только вчера заработал какой-то гуманитарный коридор, только вчера начали хоть как-то эвакуировать людей. Почему даже о таких вещах невозможно договориться?
– На первых раундах переговоров вроде бы договорились, а потом эти колонны гражданских беженцев попали под обстрел. Поэтому нет никакого доверия. В такой ситуации очень сложно договариваться.
– Кстати, мой следующий вопрос о доверии. Владимир Зеленский наряду с прекращением огня требует гарантий безопасности. Какие гарантии безопасности может предоставить Россия после всех этих бомбежек гуманитарных коридоров, после того, как в Украине продолжается война, глава МИД России Сергей Лавров заявляет, что мы на Украину вообще-то не нападали. Можно ли доверять в таких обстоятельствах?
– С дипломатической точки зрения, возможно, был бы хороший ход – заменить Лаврова кем-нибудь другим, потому что я не знаю, кто бы с ним хотел заключить договор.
– То есть вы считаете, что если Лаврова заменить, то переговоры пойдут лучше?
– Молотова меняли, во время перестройки Громыко поменяли на Шеварднадзе, чтобы новое лицо СССР показать. Сейчас, я думаю, это был бы очень умный шаг.
– А чего, как вам кажется, требует сейчас Россия? Или, если допустим гипотетическую ситуацию, просто представим на секунду, что Украина признает Крым, признает Донбасс, ей этого достаточно будет или все-таки требования России распространяются дальше?
– Думаю, Россия удовлетворилась бы Донбасом и Крымом. Украина, возможно, понимает, но внутриполитически это очень трудно представить, что все люди, кто воюет и защищает свой дом, смогли бы принять такой политический компромисс. Они обязательно зададут вопрос – за что мы боролись, если вы на такой компромисс пойдете? Но, возможно, и России этого будет достаточно, потому что в Кремле понимают, что нет сил оккупировать такую страну, как Украина.
– Тем не менее, 13 марта российский институт “Русстрат” опубликовал интересное чтиво о том, как будет расширяться Российская Федерация, как будет создан союз, в который войдут в общем-то уже подчиненная Беларусь, в скором времени – Украина. За ней последуют страны Балтии: Эстония, Латвия, Литва, которые сдадутся без боя, а потом будет оказано беспрецедентное давление на страны Восточной и Западной Европы. Таким образом, границы НАТО будут как в 1997 г. Учитывая эти имперские амбиции, можно ли сейчас говорить о том, что Россия действительно довольствуется Крымом и Донбассом или все-таки пойдет дальше?
– Мечтать не вредно. Может быть, кто-нибудь думает так, но это далеко от реальности. Империалистические мечтатели должны себя спросить, если Карл Бенц изобрел 150 лет автомобиль, а мы до сих пор не смогли его сделать, то о какой империи мы мечтаем? Любопытно другое, почему такая внешнеполитическая мысль была выдвинута именно сейчас.
– Да, причем, если вы обратили внимание, эта статья существует только на английском языке. То есть она направлена на внешнего потребителя, а не на российского. Мне, как ветерану холодной войны, смешно. Мечтать не вредно. И правительству России и россиянам было бы гораздо полезнее забывать об этих грандиозных планах, и чем быстрее, тем лучше. Сюда никто не войдет, а если войдет – плохо будет.
– Президент Украины Владимир Зеленский неоднократно призывал Путина встретиться лично или хотя бы лично провести переговоры. Он несколько раз выдвигал это предложение. Хотя официальный Кремль говорит, что им никто не звонил, но он взвешивает эти возможности. Как вы считаете, если бы два президента смогли лично переговорить, это бы ускорило окончание войны? И почему все-таки Путин отказывается от личных переговоров с Владимиром Зеленским?
– Потому что он чувствует, что у него позиции для переговоров слабые. У Зеленского позиция для переговоров сильнее на базе международного права, на базе гуманитарной катастрофы, которая возникла по приказу президента Российской Федерации. У него сильный моральный фундамент. Я не знаю, как именно в школах КГБ относились к переговорам, но есть теория, что переговоры – это только для слабаков. В их понятии переговоры – я получаю все, а ты уйдешь ни с чем.
– Как говорят, Путин понимает только силу?
– Да, так говорят. И в этом есть доля правды, что потому что все предложения, которые России сделали и американцы, и англичане, и финны, и французы, и другие никакого результата не принесли.
– Спекулируют, что война может закончиться уже через две недели, некоторые менее оптимистичные эксперты говорят – к маю, потому что военный потенциал России будет исчерпан. Как вам кажется, кто в состоянии закончить эту войну – дипломаты, военные, в результате дворцового переворота или, может быть, даже народ России, который прозреет?
– Может быть, все это вместе повлияет на окончание войны. У военных есть своя роль, есть и у дипломатов своя роль. Я бы добавил и изменения в российском обществе, потому что, несмотря на суровые законы и наказания, люди все-таки выражают альтернативную точку зрения, высказывают свое мнение о войне в Украине. Так что Россия не безнадежна. Не думаю, что возможен так называемый дворцовый переворот.
– Этот срок – май – кажется вам реалистичным?
– Моральный дух российских войск невысокий. Так что да, война может закончиться и к этому сроку, буквально за одну ночь. Но с ее последствиями нам придется жить десятилетия из-за того, что один человек решил, что он великий полководец на планете.

Заседание Межведомственного координационного штаба по гуманитарному реагированию на Украине. 10.03.2022 » E-News.su

Российская Федерация вчера исключительно в гуманных целях в очередной раз выступила с инициативой к «официальному Киеву» по открытию сегодня с 10 часов утра по московскому времени 14-ти гуманитарных коридоров и проведению эвакуации мирного населения и иностранных граждан из городов: Киев, Чернигов, Сумы, Харьков, Мариуполь – при этом по два коридора, один в направлении России и второй – через подконтрольные киевским властям территории.


И по одному гуманитарному коридору из городов Энергодар, Волноваха, Изюм – через подконтрольные киевским властям территории.

В 2 часа ночи украинская сторона в своем официальном ответе согласовала четыре маршрута: из Сум и прилегающих населенных пунктов в Полтавском направлении, из Мариуполя в Запорожье, из Волновахи в Покровск, из Изюма в Лозовую.

При этом Киев продолжает категорически воспрещать и не согласовывает выезд гражданского населения в сторону Российской Федерации.

Полностью понимая масштабы гуманитарной катастрофы в блокированных населенных пунктах мы согласились и с дополнительными маршрутами, предложенными украинской стороной.

Это коридоры из города Тростянец и поселка Краснополье Сумской области в Полтавском направлении, а также из города Коростеня Житомирской области в район Чернобыльской атомной электростанции для проезда ремонтной бригады к поврежденной националистами линии электропередач.

На вчерашние утверждения украинских властей, что обещанный «режим тишины» российскими Вооруженными Силами якобы не соблюдается, а также о якобы блокировании в ряде населенных пунктов автотранспортных колонн и гуманитарного груза, мы ответственно заявляем, что это очередная подлая ложь и наглая провокация со стороны официального Киева.

На блок-постах действительно проводятся досмотры автомобильного транспорта, но только с единственной задачей – не допустить выхода под видом мирных жителей, на освобожденные территории диверсионных групп и боевиков националистических батальонов, осознавших бесперспективность дальнейшего сопротивления или дезертирующих из районов боевых действий.

Кроме того, нами достоверно установлено, что националистами изъяты автобусы, в том числе школьные, а также другие транспортные средства, предназначенные для эвакуации беженцев, в целях использования их в качестве маневренных огневых точек.

Теперь вынужден снова вернуться к нелепому требованию со стороны украинских официальных лиц о разминирования силами российских подразделений гуманитарного маршрута из Мариуполя в Запорожье.

Это требование – невыполнимо, причина простая. Минно-взрывные устройства вблизи Мариуполя установлены националистами, и находятся в городской черте в зоне их огневого воздействия, а заминированный участок дороги гуманитарного коридора в Запорожье проходит через территории, подконтрольные батальонам территориальной обороны.

Прошу должностных лиц Украины, ответственных за согласование гуманитарных коридоров разобраться с обстановкой непосредственно на «земле» и прекратить выдвигать нам эти нелепые требования.

С сожалением должен констатировать, что от таких в кавычках «профессионалов» сейчас зависят жизни десятков тысяч мирных граждан, в том числе и иностранцев.

Сегодня с 10 часов утра в соответствии с достигнутыми договоренностями на маршрутах, инициированных Российской Федерацией и дополнительных, открытых по просьбе украинской стороны, Вооруженными Силами России введены «режимы тишины», которые в настоящее время неукоснительно соблюдаются.

Но при этом, с 10:19 отмечены многочисленные перегруппировки отдельных подразделений батальонов территориальной обороны и огневое воздействие по позициям Вооруженных Сил России, а также формированиям Луганской и Донецкой народных республик, практически на всех направлениях при этом вблизи гуманитарных коридоров.

Таким образом, режим тишины используется националистами только для улучшения своих позиций.

Украинская сторона всячески препятствует эвакуации мирных жителей и иностранных граждан, запуганных неонацистами физической расправой людей, во-первых, никто не оповещает о наличии гуманитарных коридоров, а во-вторых, те кто и узнают об этих коридорах, физически туда попасть не могут, ввиду массового террора, устроенного киевскими властями.

И тому свидетельство приказ министра обороны Украины о категорическом запрете выхода мирных жителей из блокированных населенных пунктов, в первую очередь в сторону Российской Федерации.

Вырваться из блокированных националистами населенных пунктов удаётся только отдельным гражданам и одиночным автомобилям.

За сутки – 117 таких счастливых случаев, это те люди, которые на личных автомобилях, а также пешком, хорошо зная местность, по так называемым «партизанским тропам» вырвались на территорию Российской Федерации. В результате, таким образом, удалось выбраться 341-му человеку.

Сегодня по личной просьбе к руководству Российской Федерации главы дипломатической службы Ватикана Пола Ричарда Галлахера приняты беспрецедентные меры безопасности и проведена успешная гуманитарная операция на киевском направлении по эвакуации детей-сирот из детского дома. Эвакуированы в безопасное место 52 ребенка и 23 человека из числа сопровождающего персонала.

Отмечаю, что данная эффективная гуманитарная операция проведена при содействии украинской стороны.

В настоящее время мы тесно взаимодействуем с украинскими представителями по проведению гуманитарных операций еще на трех направлениях. При этом Вооруженными Силами России обеспечено уже гарантированная безопасность гуманитарных колон:

из города Тростянец в составе 75 автобусов для эвакуации мирных жителей;

в город Энергодар колона с гуманитарной помощью;

из города Коростень перемещение ремонтной группы в составе 15 человек к поврежденной националистами линии электропередач.

Надеемся, что эти гуманитарные операции также завершаться успешно, теперь уже на подконтрольных Киеву территориях. Вооруженные Силы России свою гуманитарную миссию на этих направлениях в полном объеме уже выполнили.

К сожалению, на остальных направлениях, сегодняшняя операция по открытию гуманитарных коридоров каких-либо существенных позитивных результатов исключительно по вине киевских властей в очередной раз не принесла.

Не смотря на это, мы официально заявляем, что гуманитарные коридоры в сторону Российской Федерации будут в одностороннем порядке, без всяких согласований открываться теперь ежедневно с 10 часов утра, а на других направлениях по согласованию с украинской стороной.

На подконтрольных Вооруженным Силам России территориях мы гарантируем обеспечение полной безопасности.

Просим Международный Комитет Красного Креста и ООН на местах плотно работать с украинскими властями, для информирования населения Украины об этой российской инициативе.

В целом, гуманитарная ситуация на всей территории Украины продолжает к сожалению ухудшаться.

Украинские власти с 9 марта начали тотальную рассылку гражданам своего государства сообщений о немедленном прибытии на пункты мобилизации для призыва на военную службу, а также санкционировали националистов на применение оружия по тем, кто предпримет попытки эвакуации в Российскую Федерацию, угрожая убить родственников, оставшихся на украинской территории.

Представители одной из иностранных диаспор, к сожалению, по понятным причинам, мы не можем назвать какой, но цитируем дословно: «Прошу о помощи! Все в отчаянии. Людей не выпускают из города, они фактически находятся в плену у батальона «Азов», устраивают провокации, в городе полное отсутствие власти, «Азов» творит, что хочет. Умоляю, спасите город от этой власти. Люди уже натерпелись от них сполна…».

Уверен, что скоро настанет то время, когда мы сможем показать всему миру живых свидетелей этой трагедии, у нас все задокументировано.

Кроме того, в средствах массовой информации украинский неонацист по фамилии Берёза объявил о тотальной охоте на российских корреспондентов, освещающих правдивую гуманитарную обстановку в зоне проведения специальной военной операции.

Цивилизованный Запад и возглавляемые им международные организации по-прежнему остаются в стороне от сложившейся на Украине катастрофической гуманитарной ситуации, а простые украинцы и иностранные граждане остаются жертвами неонацизма, который фактически поглотил поглотил киевскую власть.

К сожалению, все наши просьбы к международным организациям, прежде всего к Международному Комитету Красного Креста о принятии эффективных мер по воздействию на мэров украинских городов и официальный Киев выполнить в полном объеме комплекс мероприятий по подготовке к проведению эвакуации гражданского населения, его оповещения о местах сбора, об открытии гуманитарных коридоров, формированию гуманитарных колонн остаются пока неуслышанными.

Вместо этого со стороны киевского режима не прекращаются бесконечные потоки политически мотивированной лжи о гуманитарной ситуации в их собственной стране и о якобы отсутствии желающих выехать по гуманитарным коридорам на территорию России.

Вместе с тем, только за истекшие сутки в официальные структуры Российской Федерации и непосредственно в Межведомственный координационный штаб Российской Федерации по гуманитарному реагированию на Украине по различным каналам обратились еще 27 439 мирных граждан Украины и иностранцев с просьбами об эвакуации в Россию.

Всего на сегодня в базе данных уже 2 617 349 желающих эвакуироваться почти из двух тысяч населенных пунктов Украины.

Радикалы из батальонов территориальной обороны продолжают убивать, пытать и удерживать в заложниках в качестве «живого щита» свыше четырех с половиной млн. мирных граждан, изъявивших желание немедленно эвакуироваться в безопасные районы от устроенных националистами ужасов и произвола.

Также в заложниках у украинских неонацистов остаются более семи тыс. граждан из 21 иностранного государства, официальные обращения от которых о спасении соотечественников, уже получил наш Межведомственный координационный штаб, но, к сожалению украинская сторона на официальные и не официальные обращения, в том числе и от международных партнёров практически никак не реагирует.

По судьбе указанных иностранных граждан организована круглосуточная работа с представителями соответствующих дипломатических ведомств.

Не смотря на перечисленные трудности и, казалось бы, на непреодолимые препятствия, нам удалось с начала проведения специальной военной операции без участия Киева из опасных зон Украины эвакуировать уже более 187-ми тыс. чел., из них 46 696 – детей, в том числе за сутки – 7 457 чел., из которых 1 260 –дети.

Через пункты пропуска проследовали свыше 22-х тыс. единиц личного автомобильного транспорта, в том числе за прошедшие сутки – 1 043.
В субъектах Российской Федерации продолжают функционировать более 9,5 тыс. пунктов временного размещения.

На пунктах пропуска и в местах временного размещения содержатся в постоянной готовности достаточное количество автобусов и обеспечивающего транспорта для перевозки беженцев.

Пункты пропуска оборудованы всем необходимым для временного пребывания, предусмотрено горячее питание, развернуты мобильные медицинские пункты, организована логистика для убытия в регионы России к избранным местам временного пребывания, а для иностранных граждан предусмотрена их доставка на родину.

Развернуты мобильные медицинские пункты, создан запас лекарственных препаратов.

Российской стороной на освобожденных от неонацистов территориях Украины, а также в Луганской и Донецкой народных республиках создаются все необходимые условия для мирной и безопасной жизни, обеспечивается беспрепятственный доступ населения к гуманитарной помощи.

Федеральными органами исполнительной власти совместно с субъектами России, различными общественными организациями, патриотическими движениями подготовлено более 16,5 тыс. тонн гуманитарной помощи.

На Украину уже доставлена 1 421 тонна гуманитарного груза, проведено 186 гуманитарных акций, в том числе за истекшие сутки 18 акций в Черниговской, Запорожской и Харьковской областях, а также в Донецкой и Луганской народных республиках, в ходе которых мирному населению освобожденных районов передано 34 тонны предметов первой необходимости, медикаментов и продуктов питания.

Сегодня проводятся 25 гуманитарных акций в Черниговской, Херсонской и Харьковской областях, а также в Луганской и Донецкой народных республиках, в ходе которых населению передается 250 тонн предметов первой необходимости, медикаменты и продукты питания.

Новостной сайт E-News.su | E-News.pro. Используя материалы, размещайте обратную ссылку.

Если заметили ошибку, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter (не выделяйте 1 знак)

Работа : без Опыта в Николаеве

Фильтры

5 вакансий в радиусе 25 км

  • Vigor, зал физической реабилитации

    • 15 000-20 000 грн в месяц

    Реабилитационный центр «Vigor» открывает вакансию, на должность: Инструктор ЛФК / Реабилитолог-массажист. Основные направления нашего Центра – ДЦП, инсульт, ЧМТ, грыжи, сколиоз, ле…

    Просмотреть похожие вакансии:

  • EGM Agency

    EGM Agency проводит набор сотрудников на вакансию переводчик/оператор чата брачного агенства, места ограниченны. EGM Agency сотрудничает с сайтом наших друзей и партнёров – Dream S…

    Просмотреть похожие вакансии:

  • Easyales

    • 10 000-16 000 грн в месяц

    Образованиене имеет значения Опыт работыне имеет значения Тип работыпостоянная Вид занятостиудалённая работа Описание вакансии Компания Easy Sales работает и развивается на…

    Просмотреть похожие вакансии:

  • Limerence Agency

    Мы крупное международное брачное агентство, которое имеет отличную репутацию и постоянно стремится развиваться вместе со своими сотрудниками. Ваша зарплата зависит только от ваше…

    Просмотреть похожие вакансии:

  • Easyales

    Образованиене имеет значения Опыт работыне имеет значения Тип работыпостоянная Вид занятостиудалённая работа Описание вакансии Компания Easy Sales работает и развивается на…

    Просмотреть похожие вакансии:

Получайте уведомления, подписавшись на новые


Вакансии в Николаеве

Недавно искали

Очистить историю
  1. без Опыта

    Николаев (в радиусе 25 км)

Миллиардер, покровитель Марии Бутиной, имел связи с российскими службами безопасности В декабре 2015 года она сопровождала N.

R.A. делегация, в которую входил ее бывший президент Дэвид Кин, посетила компанию Orsis, российского производителя оружия, который продает снайперские винтовки Национальной гвардии России.

Там они познакомились со Светланой Николаевой, женой г-на Николаева, которая является главой материнской компании Orsis, Группы «Промтехнологии».В бизнес-плане проекта ночного видения на 2013 год указывалось, что г-н Николаев «контролирует группу «Промтехнологии», которой принадлежит бренд Orsis», и что «Промтехнологии» «готовы закупать значительные объемы продукции проекта».

В разное время среди руководителей «Промтехнологий» были Александр Беседа, еще один сын генерала ФСБ, и Алексей Рогозин, сын бывшего вице-премьера. Старший г-н Рогозин, находящийся под западными санкциями, также встречался с Н.Р.А.группа во время поездки в Москву с г-жой Бутиной.

Представитель г-на Николаева сказал, что участие миллиардера в компании прекратилось в 2014 году и что это был «самостоятельный коммерческий бизнес, не связанный с российским правительством». Он добавил, что Александр Беседа и Алексей Рогозин работали там «недолго» и уволились в 2012 году. с г.Ротенберг, сын друга Путина. Судя по всему, г-н Беседа консультировал «СканЭкс» по возможным контрактам с российским правительством, в том числе с ФСБ и ГРУ, российской разведывательной службой.

В письме, написанном на имя г-на Николаева, упоминались государственные клиенты «СканЭкс», в которых говорилось, что фирма имеет лицензию «ФСБ на проведение работ, связанных с использованием сведений, составляющих государственную тайну». Представитель сказал, что такие лицензии являются «стандартными» для предприятий, которые собирают «географические данные для коммерческого использования».

«Это не указание на связь с российскими спецслужбами», — сказал он.

Постановление Конференции Николаевского областного профсоюза работников малого и среднего бизнеса «ЕДНАННЯ»

Главная / Официально / Постановление Конференции Николаевского областного профсоюза работников малого и среднего бизнеса «ЕДНАННЯ»

Николаевский областной профсоюз работников малого и среднего бизнеса «Еднання» считает необходимым снять с обсуждения проект Налогового кодекса Украины, утвержденный в первом чтении, предложенный Кабинетом Министров Украины, как противоречащий стратегической цели Президент Украины, что является вхождением Украины через десять лет в двадцатку ведущих стран мира. Учитывая, что сегодня страна, обладающая бесценным ресурсом плодородной земли и работоспособным населением, по уровню конкурентоспособности национальной экономики находится на 82-м месте (одна из слаборазвитых стран).

Достижение стратегической цели состоит в том, чтобы обогнать более 60 стран мира при такой системе налогообложения нереально. Предлагаемая система налогообложения создаст надежную основу для существования в Украине теневой экономики и коррупции еще долгие годы.

Страна, занимающаяся не наращиванием объемов производства, а только торговлей товарами импортного производства, никогда не станет страной с развитой экономикой. Основной проблемой украинской экономики является морально и технологически отсталая и малорентабельная, энергоемкая и материалоемкая индустриально-аграрная структура национального производства при доминировании импортного общественного потребления конечной продукции. Такая структура производства может обеспечить только отстающий или вечно догоняющий тип экономического развития, но никак не опережающий!

Соответственно, основной задачей достижения стратегической цели должно стать как быстрое изменение структуры национального производства с существующей в сторону доминирования очень прибыльных, высокоинтеллектуальных производств конечного продукта, ориентированных на экспорт, так и изменение структуры общественного потребления с возможно импортное производство на отечественном. Решение данной проблемы возможно только путем реализации комплексного подхода к реформированию всех основных подсистем народнохозяйственного механизма, одной из которых является налоговая система.

Предприниматели Николаевской области требуют разработки принципиально новой концепции налоговой системы Украины, которая в случае реализации будет:

Во-первых, эффективным инструментом ускорения всех экономических процессов;

Во-вторых, способствовать интенсификации изменения структуры национального производства в сторону создания крупных очень прибыльных и высокоинтеллектуальных производств.

Предлагаем такие пункты: полная отмена НДС, налог на прибыль, единый налог оставить только для малого бизнеса, осуществляющего торговлю на рынках.

Таким образом бизнес будет полностью освобожден от налогов, связанных с получением любого дохода, что создает идеальные, уникальные условия для максимально интенсивного развития бизнеса.

Вместо упраздняемых налогов ввести «Налог с оборота» или «Налог на покупку» в размере до 5%, который платит потребитель (налог рассчитывается Всеукраинским союзом ученых-экономистов Украины) , при этом отечественному производителю (малым предприятиям с объемом производства до 10 млн. грн.) предоставить льготу в размере 50% ставки.

Считаем, в условиях отсутствия большого количества налогов будет обеспечена стабильность поступлений налогов, а соответственно и предсказуемость состояния.

Неизбежно существенное улучшение и стабилизация экономики, так как нет смысла покрывать те налоги, которых нет. Мы считаем, что в бюджет поступит гораздо больше налоговых поступлений, чем поступает при таком объеме налоговой нагрузки.

Уплата данного налога в пользу государства будет осуществляться потребителем в момент покупки.Социальная функция бизнеса состоит в том, чтобы передать государству эти деньги, что достаточно легко.

Введение налога на покупку сделает невыгодными или вообще убыточными многоуровневые коррупционные каналы сбыта с большим количеством посредников и будет стимулировать развитие реального сектора экономики.

Предлагаемая система абсолютно прозрачная, простая и социально справедливая. Чем богаче человек, он делает особенно дорогие покупки, тем больше платит налог, чем беднее – тем меньше покупок, меньше налогов.

Существенно сократится время и соответственно непроизводственный персонал, необходимый для администрирования налогов на предприятиях. Значительно сократятся расходы государства на администрирование налогов, сборы налоговой службой и службами фондов.

Считаем, данная реформа послужит экономическим рычагом для формирования гражданского общества, предпосылки к движению в сторону тоталитаризма не усилятся.

От имени лидеров 14 профсоюзных организаций Николаевской областиПредседатель Николаевского областного профсоюза работников малого и среднего бизнеса «Еднання»

Е.Герасимчук

 

09.04.10

Передача сигналов цАМФ в субклеточных компартментах

Abstract

В сложном микрокосме клетки безопасность информации и ее точная передача имеют решающее значение для поддержания внутренней стабильности. Для достижения скоординированного ответа всех своих частей на любой раздражитель клетка должна защищать полученную информацию от потенциально мешающих сигналов. Физическое разделение цепочки передачи информации гарантирует, что только объекты, способные выполнять закодированную задачу, имеют доступ к соответствующей информации.Внутриклеточный сигнальный путь цАМФ является важной системой передачи сигнала, ответственной за наследственную реакцию «беги или сражайся» и участвующей в контроле критических функций, включая частоту и силу сердечных сокращений, энергетический метаболизм и транскрипцию генов. Становится все более очевидным, что сигнальный путь цАМФ использует компартментализацию как стратегию координации большого количества ключевых клеточных функций, находящихся под его контролем. Пространственное ограничение позволяет формировать «горячие точки» передачи сигналов цАМФ в дискретных субклеточных доменах в ответ на специфические стимулы, приближая информацию к соответствующим эффекторам и их реципиентам, таким образом достигая специфичности действия.В этом отчете мы обсуждаем, как различные составляющие пути цАМФ являются мишенями и участвуют в формировании разделенных событий передачи цАМФ. Мы иллюстрируем несколько примеров локализованной передачи сигналов цАМФ, уделяя особое внимание ядру, саркоплазматическому ретикулуму и митохондриям. Наконец, мы обсуждаем терапевтический потенциал вмешательств, направленных на локальное нарушение конкретных каскадов цАМФ.

Ключевые слова: цАМФ, компартментализация, ПКА, ФДЭ, АКАП, передача сигналов

1.Введение

Спустя более полувека после открытия (Rall, Sutherland, 1958) 3’–5′-циклический аденозинмонофосфат (цАМФ) остается объектом пристального научного интереса (Beavo, Brunton, 2002; Perera, Nikolaev, 2013; Скотт и др., 2012). Известно, что циклический АМФ регулирует многие разнообразные и иногда противоположные клеточные функции, включая, среди прочего, транскрипцию генов (Yamamoto et al., 1988), миграцию клеток (Burdyga et al., 2013; Zimmerman et al., 2013), митохондриальный гомеостаз. (Ди Бенедетто и др., 2013а; Valsecchi et al., 2013), пролиферацию клеток (Stork and Schmitt, 2002) и гибель клеток (Suen et al. , 2008; Andersen and Kornbluth, 2013). Сигнальный путь цАМФ включает несколько компонентов. Рецепторы, связанные с G-белком (GPCR), активируются на плазматической мембране при связывании лиганда. Высвобождается активный G-белок, который, в свою очередь, активирует связанную с мембраной аденилатциклазу (АС) с образованием цАМФ из АТФ. Затем цАМФ может связывать и активировать три основных эффекторных белка: ионные каналы, управляемые циклическими нуклеотидами (CNG) (Matulef and Zagotta, 2003), белки обмена гуанин-нуклеотидов, активируемые цАМФ (EPAC) (Kawasaki et al., 1998) и цАМФ-зависимой протеинкиназы (PKA) (Walsh et al., 1968; Taylor et al., 2013). Затем сигнал цАМФ прерывается действием ферментов, разлагающих цАМФ, фосфодиэстераз (ФДЭ) (Manganiello and Degerman, 1999), в то время как фосфатазы могут отключать эффекты PKA-опосредованного фосфорилирования (Heijman et al., 2013) (Sim and Scott). , 1999). Поскольку эффекты передачи гормонов через цАМФ были обнаружены вскоре после его открытия, стало очевидно, что первоначальная точка зрения о том, что рецепторы определяют спектр гормональной чувствительности клетки, а субстраты, доступные для фосфорилирования, определяют ответ, была слишком упрощенной. Вместо этого стало ясно, что одна и та же клетка может одновременно экспрессировать несколько рецепторов, которые передают сигналы через цАМФ, а также несколько мишеней PKA, фосфорилирование которых может вызывать очень разные функциональные результаты. С этим пониманием также стало ясно, что линейный каскад — генерация цАМФ в ответ на внешние стимулы с последующей активацией эффектора и прекращением через деградацию мессенджера фосфодиэстеразами (ФДЭ) — недостаточен для объяснения способности цАМФ. для передачи соответствующей информации с высокой точностью в ответ на множество внеклеточных стимулов.Исследования сердца, проведенные в начале восьмидесятых годов, ясно продемонстрировали, что клетки могут использовать цАМФ для преобразования сигнала, доставляемого различными гормонами, в различные клеточные функции. По сути, экспериментальные данные заключались в том, что лечение либо простагландином E 1 (PGE 1 ), либо агонистом β-адренергических рецепторов изопротеренолом (ISO) вызывало повышение уровня цАМФ в сердце, но только ISO вызывал ожидаемый эффект (т. е. положительную инотропию). ), тогда как PGE 1 не влиял на сократительную способность, несмотря на то, что оба стимула продуцировали одинаковое количество вторичных мессенджеров и сопоставимые уровни активации PKA.Для объяснения этих результатов была выдвинута гипотеза, что компоненты сигнального пути цАМФ организованы таким образом, что цАМФ генерируется в специфических внутриклеточных пространствах (Hayes et al., 1980).

Эти основополагающие исследования сначала на целых тканях (Hayes et al., 1979, 1980), а затем на клеточных препаратах (Buxton and Brunton, 1983) предоставили первые косвенные доказательства разделения сигналов цАМФ. Прямые доказательства существования и функциональной значимости субклеточных сигнальных событий цАМФ (Zaccolo and Pozzan, 2002; Nikolaev et al., 2006) появился почти 20 лет спустя и объединил модель разделенной передачи сигналов цАМФ (Zaccolo and Pozzan, 2002; Di Benedetto et al., 2008). Разработка молекулярных инструментов для обнаружения изменений цАМФ в реальном времени в интактных живых клетках (Berrera et al. , 2008; Gesellchen et al., 2011; Stangherlin et al., 2014) в значительной степени способствовала установлению понятия микродоменов цАМФ. Зонды, чувствительные к циклическому AMP и PKA, основанные на переносе энергии флуоресцентного резонанса (FRET), произвели революцию в исследованиях передачи сигналов цАМФ.Эти сенсоры используют домены связывания цАМФ, присутствующие в PKA (Zaccolo et al., 2000; Zaccolo and Pozzan, 2002) или EPAC (Ponsioen et al., 2004; Nikolaev et al., 2004), и сочетают чувствительность обнаружения в пределах физиологических уровней с очень высоким пространственным и временным разрешением. Более того, будучи генетически закодированными, эти инструменты могут быть легко нацелены на различные клеточные компартменты, что позволяет обнаруживать цАМФ в определенных внутриклеточных участках в режиме реального времени. Высокое разрешение этих зондов позволило установить, что цАМФ достигает специфичности действия благодаря точной организации молекулярных компонентов его пути в сложных «сигналосомах», расположенных в определенных клеточных местах (Stangherlin, Zaccolo, 2012).

2. Компартментализация компонентов сигнального пути цАМФ/ПКА

В то время как количество доказательств в поддержку компартментализованной передачи сигналов цАМФ растет, недавно разработанные технологии раскрывают непредвиденный уровень сложности механизмов, которые генерируют и регулируют функциональные компартменты цАМФ. Фактически теперь ясно, что генерация горячих точек цАМФ в субклеточных микродоменах включает сложную координацию событий на каждом этапе сигнального каскада цАМФ (Zaccolo, 2009; Houslay, 2010; Mika et al., 2012; Перера, Николаев, 2013).

2.1 Рецепторы, связанные с G-белками

В любой момент клетки подвергаются воздействию множества внеклеточных стимулов, которые действуют как «первые мессенджеры» и обнаруживаются рецепторами, связанными с G-белками (GPCR) на плазматической мембране. После связывания лиганда GPCR претерпевают конформационные изменения, приводящие к активации ассоциированных с ними гетеротримерных гуанозин-связывающих белков (G-белков). При активации субъединица Gα тримерного G-белка высвобождается и может свободно связываться и модулировать активность AC.В зависимости от типа связанной с ними субъединицы Gα, GPCR могут активировать (Gα s ) или ингибировать (Gα i ) продукцию цАМФ.

Большое количество GPCR придает значительный уровень разнообразия и специфичности передаче сигналов цАМФ. Клеточно-специфический паттерн экспрессии GPRC определенно определяет способность конкретной клетки отвечать на внеклеточные стимулы, а также интенсивность ответа. Однако есть доказательства того, что в пределах одной и той же клетки различная локализация отдельных GPCR на плазматической мембране может способствовать специфичности ответа.Например, в сердечных миоцитах β 1 адренорецепторы (β 1 AR) обнаруживаются как в кавеолярной, так и в некавеолярной фракциях мембран, тогда как β 2 AR преимущественно локализуются в кавеолах. β 2 AR также, по-видимому, способны выходить из кавеол при активации (Rybin et al. , 2000), тем самым добавляя в систему дополнительный потенциальный элемент динамической регуляции (Patel et al., 2008; DiPilato and Zhang, 2009) . Элегантное исследование Николаева и др. Комбинация цАМФ-чувствительных FRET-зондов со сканирующей микроскопией ионной проводимости показала, что β 1 АР равномерно распределены на плазмалемме кардиомиоцитов, тогда как β 2 АР обнаруживаются преимущественно в Т-трубочках и отсутствуют в нетубулярных областях кардиомиоцитов. мембрана.Это исследование также показало, что β 1 AR генерируют диффузный сигнал цАМФ, тогда как сигнал, генерируемый β 2 AR, сильно ограничен (Николаев и др., 2010). Поэтому заманчиво предположить, что различная локализация этих рецепторов на плазмалемме вместе с их способностью генерировать внутриклеточные сигналы цАМФ с различными свойствами могут способствовать функциональным различиям, наблюдаемым при селективной активации этих рецепторов с постоянной стимуляцией β 1 AR. вызывая токсические эффекты, включая апоптоз и гипертрофию миоцитов, и постоянную стимуляцию β 2 AR, приводящую к защитному действию на миокард (Talan et al., 2011).

Помимо дифференциальной экспрессии и компартментализации рецепторов на плазматической мембране, недавно описанная способность по крайней мере некоторых GPCR передавать сигналы после интернализации (Calebiro et al., 2009, 2010; аспект модели разделенной передачи сигналов цАМФ. Каноническая точка зрения состоит в том, что интернализация GPCR является частью процесса десенсибилизации рецепторов и включает фосфорилирование рецепторов рецепторными киназами, связанными с G-белком, рекрутирование бета-аррестина и последующую интернализацию GPCR (Kamal et al., 2012). После интернализации GPCR могут быть повторно экспонированы в их неактивном состоянии на плазматической мембране или, альтернативно, могут стать мишенью для деградации (Zhang and Eggert, 2013). Однако недавние исследования поставили под сомнение эту догму, показав, что интернализованные GPCR сохраняют свою способность запускать выработку цАМФ (Calebiro et al. , 2009; Ferrandon et al., 2009; Irannejad et al., 2013). Калебиро и др. использовали интактные фолликулы щитовидной железы трансгенных мышей с повсеместной экспрессией сенсора на основе цАМФ FRET, чтобы продемонстрировать, что интернализованные рецепторы тиреотропного гормона (ТТГР) продуцируют сигналы цАМФ, отличные от сигналов, генерируемых посредством активации ТРТГ, экспонированных на клеточной поверхности (Calebiro и другие., 2009). Дальнейшее подтверждение того, что каскады передачи сигнала, опосредованные GPCR, не запускаются исключительно на клеточной поверхности, было получено в исследованиях, в которых ряд конформационно-специфических однодоменных антител (нанотел), способных различать активное и неактивное состояния β 2 Рецептор -AR использовали в качестве биосенсоров для получения прямых доказательств того, что интернализованные GPCR способны генерировать сигналы цАМФ в интактных живых клетках (Irannejad et al., 2013). В контексте компартментализованной модели передачи сигналов цАМФ генерация цАМФ с помощью интернализированных GPCR особенно привлекательна, поскольку это обеспечит средства для генерации цАМФ из внутриклеточных «горячих точек» и разрешит загадку, связанную с тем, что источник цАМФ локализован в плазме. мембраны и необходимость избирательно активировать подмножества PKA, локализованные глубоко внутри клетки.Однако, действительно ли передача сигналов от интернализованных GPCRs приводит к генерации микродоменов cAMP и связаны ли они со специфическими функциональными результатами, еще предстоит определить.

2.2 Аденилатциклазы

Недавние исследования с использованием цАМФ-чувствительных репортеров FRET также поставили под сомнение идею о том, что АЦ однородно распределены на плазматической мембране и что они представляют собой единый источник цАМФ. Фактически, AC становятся ключевыми игроками в создании микродоменов cAMP.Существует десять различных генов, кодирующих два класса AC, девять связанных с мембраной (от TmAC1 до TmAC9) и растворимую аденилатциклазу (sAC) (Cooper and Crossthwaite, 2006; Tresguerres et al., 2011). Ряд исследований демонстрирует, что TmAC не являются взаимозаменяемыми, поскольку отдельные изоформы регулируются уникальным образом. Например, TmAC1 и TmAC8 активируются Ca 2+ , тогда как TmAC5 и TmAC6 ингибируются Ca 2+ (Cooper and Crossthwaite, 2006; Lefkimmiatis et al. , 2009; Willoughby et al., 2012). Используя дифференциально локализованные чувствительные к цАМФ репортеры на основе FRET, Wachten et al. показали, что в линии клеток гипофиза GH 3 B 6, TmAC8 не чувствителен к вазоактивному интестинальному пептиду (VIP) и активируется Ca 2+ , тогда как TmAC5 и TmAC6 реагируют на VIP повышенной активностью, но их действие ингибируется Ca 2+ (Wachten et al., 2010). Ca 2+ -зависимый контроль – не единственный механизм, участвующий в определении того, как TmACs связаны с нижестоящими сигнальными путями, о чем свидетельствует наблюдение, что, хотя TmAC5 и TmAC6 ингибируются Ca 2+ , делеция tmAC5, по-видимому, является защитной. против возрастной кардиомиопатии (Yan et al., 2007), тогда как делеция TmAC6 не защищает от кардиомиопатии, вызванной стимуляцией β-AR, и связана с повышенной смертностью во время стресса (Tang et al., 2013). Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что ключом к специфической функции TmAC является их организация в специфических макромолекулярных комплексах, включающих GPCR (Dupré et al. , 2007) и каркасные белки (Bauman et al., 2006; Piggott et al., 2008; Li et al., 2012). . Особое внимание привлекло специфическое взаимодействие между TmAC и каркасами, принадлежащими к семейству белков, заякоривающих A-Kinase (AKAPs, см. ниже).Например, было обнаружено, что белок AKAP Yotiao взаимодействует с рядом TmAC (AC1, AC2 и AC9) и по-разному регулирует по крайней мере два из них (AC2 и AC9). Yotiao связывается с амино-концом AC2, и это действие не изменяет базальную активность циклазы; однако было обнаружено, что он значительно снижает активность AC2 в присутствии активаторов, таких как форсколин, Gα s или их комбинации (Piggott et al., 2008). Хотя взаимодействие с Yotiao, по-видимому, не влияет на активность AC9, недавно было высказано предположение, что Yotiao действует как посредник для образования макромолекулярного комплекса, содержащего AC9 и PKA-регулируемый калиевый канал I ks (Li et al., 2012). Таким образом, взаимодействие AC9 с Yotiao должно привести источник цАМФ в непосредственной близости к конечной мишени, создавая действительно автономный миродомен цАМФ (Li et al. , 2012; Efendiev et al., 2013).

sAC также регулируется Ca 2+ , но, в отличие от TmAC, не регулируется G-белками и активируется бикарбонатом (Tresguerres et al., 2011; Bitterman et al., 2013) и АТФ (Zippin et al. др., 2013). Вскоре после его открытия было показано, что sAC является не только цитозольным, но также может локализоваться в определенных субклеточных участках, включая ядро, среднюю часть тела, центриоли и митохондрии (Zippin et al., 2003). Асин-Перес и др. предоставили биохимические доказательства того, что sAC локализован в митохондриальном матриксе и может продуцировать цАМФ в ответ на метаболически генерируемый бикарбонат (Acin-Perez et al., 2009). Последующие исследования с использованием репортеров cAMP-FRET подтверждают наличие активности sAC в митохондриальном матриксе в ответ как на Ca 2+ (Di Benedetto et al., 2013a), так и на бикарбонат (Di Benedetto et al., 2013b; Lefkimmiatis et al. , 2013). Учитывая непроницаемость внутренней митохондриальной мембраны для цАМФ (Acin-Perez et al. , 2009; Ди Бенедетто и др., 2013b; Lefkimmiatis et al., 2013), эти данные свидетельствуют о том, что митохондриальный матрикс может содержать сигнальный путь цАМФ, который отвечает на метаболические изменения и не зависит от цитозольных сигналов цАМФ.

2.3 Фосфодиэстеразы

После образования цАМФ расщепляется большим и разнообразным семейством ферментов, называемых фосфодиэстеразами (ФДЭ) (Omori and Kotera, 2007). Как единственный механизм, ответственный за терминацию сигнала цАМФ, ФДЭ являются критическими компонентами сигнального каскада, и было показано, что они играют важную роль в компартментализации цАМФ.

Из-за своей гидрофильной природы цАМФ в принципе обладает высокой способностью к диффузии, при этом экспериментально рассчитанный коэффициент диффузии составляет около 500 мкм 2 с -1 (Николаев и др., 2004). Ожидается, что быстрая диффузия приведет к одновременной и глобальной активации всех эффекторов цАМФ и, следовательно, противоречит понятию микродоменов цАМФ (Zaccolo, 2009, 2011; Houslay, 2010). В то время как буферизация цАМФ (Chen et al., 1999) и вязкость цитозоля (Feinstein et al., 2012) может играть роль в замедлении диффузии цАМФ в определенных субклеточных местах, важную роль в ограничении цитозольного распространения цАМФ играют ФДЭ.

Существует 8 различных семейств ФДЭ, разлагающих цАМФ (ФДЭ1, 2, 3, 4, 7, 8, 10, 11). Каждое из этих семейств может включать несколько генов и ряд вариантов сплайсинга, что значительно увеличивает количество изоформ (Conti and Beavo, 2007; Zaccolo, 2009; Mika et al., 2012). Различные изоформы ФДЭ имеют различное распределение в тканях, и большинство отдельных клеток экспрессируют несколько изоформ.Каталитический домен, расположенный в карбоксиконцевой области каждого гена PDE (Conti and Beavo, 2007), является высококонсервативным. Напротив, N-конец этих белков очень разнообразен и придает уникальные регуляторные свойства и последовательности-мишени, которые приводят к привязыванию отдельных PDE к стратегическим субклеточным сайтам (Zaccolo, 2009, 2011; Mika et al. , 2012).

Доказательства участия ФДЭ в генерации разделенных сигналов цАМФ были предоставлены в начале 90-х Hohl и Li.Эти авторы показали, что примерно половина цАМФ, образующегося при обработке сердечных миоцитов изоцианатом, находится во фракции твердых частиц, тогда как, когда стимуляция изоцианата сочетается с ингибированием ФДЭ, общий цАМФ увеличивается почти в 4 раза, но, что удивительно, доля мессенджера, обнаруживаемая в фракция твердых частиц снижается с 45% до примерно 20%. Эти результаты были интерпретированы как результат ограничения цАМФ фракцией частиц вследствие высокой активности деградации цАМФ в цитозоле и намекнули на роль PDE в поддержании микродоменов цАМФ (Hohl and Li, 1991).Более прямое подтверждение ключевой роли, которую играют PDE в формировании внутриклеточных микродоменов цАМФ, пришло с использованием сенсоров на основе FRET, чувствительных к цАМФ. С помощью таких инструментов впервые удалось визуализировать градиенты цАМФ в неонатальных кардиомиоцитах живых крыс и показать, что эти градиенты зависят от активности ФДЭ (Zaccolo and Pozzan, 2002). Последующие исследования с использованием изоформ-специфических ингибиторов ФДЭ показали, что в сердечных миоцитах маргинальное ингибирование ФДЭ4 приводит к значительному увеличению уровня цАМФ, генерируемого в ответ на катехоламины, тогда как полного ингибирования ФДЭ3 недостаточно для аналогичного повышения уровня цАМФ, что указывает на предпочтительное сочетание отдельные ФДЭ с сигнальным каскадом, запускаемым специфическими GPCR (Mongillo et al., 2004). Функциональная связь локализованных ФДЭ с локальным сигналом цАМФ, генерируемым специфическими гормонами, была также продемонстрирована в клетках НЕК293, где было показано, что пространственное смещение эндогенных изоформ ФДЭ экзогенно экспрессируемыми каталитически неактивными мутантами ферментов ФДЭ было достаточным для нарушения градиентов цАМФ, что демонстрирует решающую роль привязки PDE к специфическим субклеточным сайтам в формировании внутриклеточных пулов вторичных мессенджеров (Terrin et al., 2006). В другом исследовании вытеснение PDE4D3 из центросомы приводило к избирательному увеличению цАМФ в этом месте и изменению хода клеточного цикла (Terrin et al. , 2012).

2.4 A Белки, закрепляющие киназу (AKAP)

Основным эффектором цАМФ является PKA. В неактивной форме PKA представляет собой тетрамер, состоящий из двух регуляторных (R) и двух каталитических (C) субъединиц. Существует четыре гена, кодирующих отдельные регуляторные субъединицы (RIα, RIβ, RIIα и RIIβ), и три гена, кодирующие каталитические субъединицы (Cα, Cβ и Cγ). Последние отвечают за ферментативное действие PKA и преимущественно фосфорилируют мишени, содержащие мотив [R/K][R/K/X]X[pS/pT].В отсутствие цАМФ димер субъединиц R связывает и подавляет активность двух субъединиц С (Taylor et al., 2013). цАМФ связывается с R-субъединицами, вызывая конформационные изменения, которые ослабляют ингибирующее действие на C-субъединицы, позволяя фосфорилировать PKA-мишени (Taylor et al., 2005). Роль субъединиц R не ограничивается ингибированием аналогов C, поскольку они также ответственны за связывание холофермента PKA со специфическими белками, закрепляющими A-киназы (AKAP). AKAP играют критическую роль в разделенной передаче сигналов цАМФ, поскольку они ограничивают PKA определенными субклеточными местоположениями в физической близости к мишеням PKA (Marx et al., 2002; Хьюм и др., 2003; Критцер и др., 2012; Скотт и др., 2012 г.; Трегер и др., 2012).

Взаимодействие PKA-AKAP происходит посредством связывания относительно короткой аминокислотной последовательности, называемой доменом димеризации-стыковки (D/D). Этот домен, расположенный на N-конце субъединицы R, связывается с родственным амфипатическим доменом, обнаруженным в большинстве известных AKAP. Этот короткий (14–18 а.о.) домен является наиболее консервативным признаком среди более чем 50 членов, идентифицированных на сегодняшний день в семействе белков AKAP (Scott et al., 2012). Эти каркасные белки служат основой для образования фокальных сигнальных доменов цАМФ или сигналосом, поскольку они могут закреплять не только PKA, но и многие другие компоненты пути цАМФ, включая рецепторы (Malbon et al. , 2004; Malbon, 2007), ACs. (Piggott et al., 2008; Dessauer, 2009), фосфатазы (Dodge-Kafka et al., 2010) и ФДЭ (Scott et al., 2012). Большинство AKAP предпочтительно связывают субъединицы R типа II, однако существуют также AKAP, которые связывают как RI, так и RII, и AKAP, которые избирательно связывают субъединицы R типа I (Kovarich et al., 2010; Минс и др., 2011; Скотт и др., 2012). Важным вкладом в наше понимание функционального значения передачи сигналов с помощью AKAP-заякоренных подмножеств PKA стала разработка серии пептидов-разрушителей, которые использовались для вытеснения PKA с ее якорных участков на AKAP и для оценки результирующего клеточного эффекта (Carr и др., 1992). Особый интерес представляют пептиды, которые могут избирательно нарушать взаимодействие между AKAP и либо PKA типа I, либо PKA типа II. Например, фрагмент под названием RIAD (разрушитель заякоривания RI) проявляет в 1000 раз большее сродство к PKA типа I по сравнению с типом II (Carlson et al., 2006), в то время как разрушитель под названием SuperAKAP- IS в 10000 раз более селективен в отношении RII (Gold et al. , 2006). Более поздними дополнениями к набору экспериментальных инструментов являются пептиды-разрушители, сконструированные с целью вытеснения PKA из индивидуальных AKAP (Gold et al., 2013a). Одним важным недостатком использования этих пептидов-ингибиторов является их ограниченная диффузия и стабильность. Для преодоления этих проблем недавно была разработана альтернативная стратегия, включающая малые молекулы, такие как терпиридины.Терпиридины и их производные могут мешать взаимодействиям AKAP-PKA, они демонстрируют более высокую клеточную проницаемость и более стабильны, чем пептиды, хотя последние остаются более селективными (Christian et al., 2011; Tröger et al., 2012; Schäfer). и др., 2013).

Закрепление подмножеств PKA на разных AKAP определяет уникальный паттерн фосфорилирования ниже киназы, как показано, например, в работе Di Benedetto et al. В этих исследованиях сенсоры на основе FRET, чувствительные к цАМФ, были нацелены на RI- или RII-связывающие AKAP с целью оценки степени изменений цАМФ вокруг этих различных сигнальных комплексов PKA-AKAP в сердечных миоцитах. Восстановление флуоресценции после фотообесцвечивания (FRAP) использовали для демонстрации того, что в этих клетках как PKA типа I, так и PKA типа II преимущественно закреплены на субклеточных сайтах. Что наиболее важно, было обнаружено, что стимуляция ISO вызывает ответ цАМФ, который избирательно ограничен AKAP, связывающими PKA II типа. Этот ответ был связан с фосфорилированием фосфоламбана (PLN) и тропонина I и был чувствителен к ролипраму, селективному ингибитору ФДЭ4, что предполагает присутствие ФДЭ4 в том же компартменте.Напротив, домен, определяемый AKAP, связывающими PKA I типа, реагировал на стимуляцию простагландином 1 и глюкагоном, был чувствителен к специфичным ингибиторам PDE2, но активация пула PKA I типа не приводила к фосфорилированию PLN и тропонина I (Di Benedetto и др., 2008). Интересно, что расположение некоторых AKAP может изменяться в ответ на клеточные состояния, изменяющие функциональный результат сигналов цАМФ. Интересным примером патофизиологического значения является нацеливание AKAP на липидные рафты. В нормальных условиях эти белки находятся в липидных рафтах, где они координируют важные клеточные функции, такие как презентация антигена (Schillace et al., 2011), активность AC (Delint-Ramirez et al., 2011) и ремоделирование цитоскелета (Su et al. , 2013). Во время повышенной продукции АФК липиды окисляются, и их биофизические свойства резко меняются (Jin et al., 2011), что приводит к высвобождению AKAP из липидных рафтов с потенциальным воздействием на нижестоящую функцию. Например, было показано, что AKAP12 важен для нацеливания на мембраны и подавления метастатических эффектов онкогенной src-тирозинкиназы (Su et al., 2013), и было высказано предположение, что окислительный стресс может изменять AKAP12, и это может высвобождать src из липидных рафтов, тем самым повышая метастатический потенциал клетки.

Другим механизмом, с помощью которого окислительный стресс может влиять на передачу сигналов PKA, является образование дисульфидных связей в PKA типа I и последующая независимая от цАМФ активация фермента (Brennan et al. , 2006; Burgoyne and Eaton, 2009, 2013). Циклическая AMP-независимая активация PKA была предложена также для PKA типа II. В соответствии с этой парадигмой передача сигналов через связанную с AKAP PKA дает возможность C-субъединицам фосфорилировать целевой белок без диссоциации от R-субъединиц (Akimoto et al., 2013; Taylor et al., 2013), особенность, которая ограничивала бы диапазон действия PKA и, таким образом, способствовала бы генерации разделенного сигнала. Доказательства в поддержку этого механизма недавно были получены Smith и соавторами с использованием комплекса AKAP18γ-PKA type II в качестве модели (Smith et al., 2013). Хотя концепция цАМФ-независимой активации PKA интригует, ее актуальность для клеточной физиологии еще предстоит установить.

3. Микродомены циклического АМФ

По мере того, как обнаруживаются данные о специфических клеточных процессах, регулируемых отдельными пулами цАМФ, появляется новая тема, заключающаяся в том, что уникальные сигнальные домены цАМФ связаны с различными органеллами. Возможно, это неудивительно, учитывая, что органеллы представляют собой физические компартменты, предназначенные для очень специфических задач. Несколько примеров обсуждаются ниже.

3.1 Ядро

Одним из хорошо известных действий цАМФ является регуляция транскрипции посредством РКА-зависимой активации белка, связывающего цАМФ-чувствительный элемент (CREB) (Yamamoto et al., 1988; Altarejos and Montminy, 2011). Последовательность событий, которая завершается активацией CREB, включает связывание цАМФ с холоферментом PKA, диссоциацию активных субъединиц С и их транслокацию в ядро ​​посредством диффузии (Harootunian et al., 1993). Оказавшись в ядре, PKA фосфорилирует CREB по серину 133, облегчая его взаимодействие с CREB-связывающим белком и усиливая транскрипцию его генов-мишеней. Затем сигнал прекращается путем связывания субъединицы C с ингибитором протеинкиназы (PKI), экспорта полученного комплекса из ядра (Taylor et al., 2005; Dalton and Dewey, 2006) и дефосфорилирования CREB Ser/Thr фосфатазами. (PP1 и PP2A) (Yamamoto et al., 1988; Altarejos and Montminy, 2011). Предполагается, что кинетика этого процесса будет относительно медленной из-за времени, необходимого субъединицам С для миграции в ядро.

Ядро быстро достигает ядра с помощью цАМФ, генерируемого на плазматической мембране с помощью TmACs, что указывает на то, что ядерная оболочка не является препятствием для диффузии цАМФ (Terrin et al., 2006). Другие исследования, однако, предполагают, что sAC может быть альтернативным ядерным источником цАМФ (Zippin et al., 2003). Недавно Сэмпл и его коллеги объединили методы визуализации живых клеток с компьютерным моделированием и представили доказательства, указывающие на присутствие в ядре клеток HEK-293 субпопуляции PKA-чувствительных к sAC (Sample et al., 2012). На основании этих исследований была предложена модель, в которой помимо перемещения субъединиц С в ядро ​​в ответ на цАМФ, продуцируемый TmAC, ядро ​​содержит функциональный пул спящих PKA; когда цитозольный цАМФ достигает ядра, уровень ФДЭ4 остается ниже порога активации локального холофермента ПКА, но когда цАМФ продуцируется локально и выше этого порога, может происходить активация локальной ПКА, что приводит к более быстрой кинетике активации (Sample et al. , 2012) . Однако в другом исследовании первичных кардиальных миоцитов новорожденных крыс не удалось подтвердить наличие пула холофермента ядерной ПКА, локально активируемого цАМФ, и предоставить доказательства различной кинетики активности ядерной ПКА, ограниченной диффузией и зависимым от ИПК ингибированием ядерной активности. Субъединицы (Янг и др., 2013).

3.2 Саркоплазматический ретикулум

В сердечно-сосудистой системе цАМФ, образующийся в результате адренергической стимуляции, увеличивает частоту и силу сердечных сокращений и увеличивает расслабление. Ключевой функцией под контролем каскада цАМФ в сердце является диастолический обратный захват Ca 2+ через саркоплазматический ретикулум (SR) Ca 2+ -ATPase (SERCA2) (Мовсесян, 1998). цАМФ оказывает свое регулирующее действие не непосредственно на SERCA, а на ассоциированный с ним белок PLN.В состоянии покоя SERCA2 ингибируется нефосфорилированным PLN. В присутствии катехоламинов PLN фосфорилируется с помощью PKA, и его ингибирующее действие на SERCA2 высвобождается, что позволяет более эффективно пополнять SR и, как следствие, более быстрое снижение свободного цитозольного Ca 2+ (MacLennan and Kranias, 2003). Используя междисциплинарный подход, Lygren и др. продемонстрировали, что фосфорилирование PLN зависит от расположенного в SR каскада цАМФ, организованного AKAP18δ (Henn et al., 2004). Эти авторы обнаружили, что AKAP18δ действует как каркас для привязки PKA к SR и вблизи PLN и SERCA2 (Lygren et al., 2007). Важность SR-связанной PKA была продемонстрирована нарушением взаимодействия AKAP18δ-PLN, что привело к 50% снижению цАМФ-зависимого фосфорилирования PLN и 50% снижению скорости обратного захвата Ca 2+ в SR, демонстрируя, что регуляция SERCA2 в значительной степени зависит от локального пула PKA (Lygren et al., 2007). Независимое исследование, проведенное Керфантом и его коллегами, показало, что сигналы цАМФ, контролирующие активность SERCA2, формируются как ФДЭ3, так и ФДЭ4 (Kerfant et al., 2007).

Мыши с дефицитом PDE4 (PDE4 -/- ) демонстрируют повышенную сократимость миокарда и повышенное фосфорилирование PLN, что позволяет предположить, что PDE4 участвует в регуляции локальных уровней цАМФ и, следовательно, активности SERCA2 (Beca et al. , 2011). Роль PDE3 в этом сайте также была оценена в недавнем исследовании с использованием нокаутных мышей с дефицитом PDE3A (PDE3A -/- ) или PDE3B (PDE3B -/- ). Фармакологическое ингибирование всех изоформ PDE3 у мышей PDE3A -/- не влияло на сердечную сократимость, тогда как ингибирование PDE3 у животных PDE3B -/- показало увеличение, сходное с их однопометниками дикого типа.Эти эксперименты предполагают, что PDE3A является изоформой PDE3, вносящей вклад в сигналы цАМФ, которые регулируют функцию SERCA2 (Beca et al., 2013). Эксперименты по иммунопреципитации и жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектроскопии показали, что PDE3A находится в комплексе с SERCA2, в то время как эксперименты по совместной иммунопреципитации подтвердили, что PDE3A взаимодействует также с PLN, AKAP18, PKA-RII и протеинфосфатазой типа 2A (Beca et al., 2013). В совокупности эти исследования убедительно подтверждают существование в SR локализованного микродомена цАМФ, предназначенного для регуляции фосфорилирования PLN и активности SERCA2 в ответ на адренергические стимулы (12).

Сигналосомы cAMP-PKA в саркоплазматическом ретикулуме

На схеме показаны две сигналосомы, обнаруженные в SR, сформированные вокруг AKAP18δ и mAKAP (слева и справа соответственно). AKAP18δ рекрутирует PKA типа II рядом с комплексом SERCA/PLN. В исходных условиях PDE3A и PDE4D поддерживают низкие уровни цАМФ и неактивность PKA. В ответ на повышение уровня цАМФ (например, во время катеколамин-зависимой передачи сигналов) PKA активируется и может фосфорилировать PLN. Фосфорилированный PLN не может эффективно подавлять функцию SERCA, обеспечивая более эффективное восполнение SR Ca2 + .Локальный сигнал прерывается скоординированным действием ФДЭ и протеинфосфатаз (РР2А). Точно так же mAKAP действует как платформа для цАМФ-чувствительной сигналосомы, состоящей из PKA типа II; ФДЭ4D3; ПП1 и ПП2А. Было показано, что этот мультибелковый комплекс локализуется вблизи и фосфорилирует Ca2 + -канальный рианодиновый рецептор.

SR содержит другой сигнальный домен цАМФ, организованный вокруг mAKAP и включающий каналы высвобождения Ca 2+ , рианодиновые рецепторы, протеинфосфатазу 1, протеинфосфатазу 2A и PKA типа II (Marx et al. , 2000) (). Функциональная роль этого сигнального домена была подтверждена экспериментами, показывающими, что генетическая аблация PDE4D усугубляет постинфарктный сердечный фенотип, и наблюдением, что в сердечной недостаточности человека снижена ассоциация PDE4D3 с рецепторами Ryanodine (Lehnart et al., 2005).

3.3 Митохондрии

Другой органеллой, в которой передача сигналов цАМФ, по-видимому, однозначно регулируется, являются митохондрии. Фактически, каждый митохондриальный компартмент, внешняя митохондриальная мембрана (OMM), межмембранное пространство (IMS) и митохондриальный матрикс потенциально содержат отдельный и функционально обособленный микродомен цАМФ.Доказательства показывают, что эти субмитохондриальные каскады различаются по большинству определяющих аспектов локальной передачи сигналов цАМФ, включая источник цАМФ, задействованные эффекторы и терминаторы ответа (12).

Митохондриальные AKAP

Межмембранное пространство содержит PKA типа I, специфичный для AKAP, названный SKIP. PKA, связанный в межмембранном пространстве через SKIP, может фосфорилировать белок chchd3. На внешней митохондриальной мембране обнаружены 3 разных AKAP, Rab32; АКАП2 и АКАП121.AKAP2 и AKAP121 могут образовывать комплексы с PKA типа I и типа II, тогда как Rab32 может образовывать комплексы только с PKA типа II. Одной из хорошо известных целей PKA, связанной с AKAP121, является регулятор деления Drp1. Фосфорилированные формы Drp1 не могут способствовать делению митохондрий, поэтому высокая активность PKA на внешней митохондриальной мембране блокирует деление митохондрий, что приводит к удлинению органелл.

В ранней работе ДиПилато и его коллеги использовали чувствительные к цАМФ датчики на основе FRET для измерения внутримитохондриальных мессенджеров и пришли к выводу, что цитозольный цАМФ может достигать каждого митохондриального компартмента, включая матрикс (DiPilato et al., 2004). Эти результаты позже были оспорены Асин-Пересом и его коллегами, которые, используя биохимический подход, предоставили доказательства того, что внутренняя митохондриальная мембрана не проницаема для цитозольного цАМФ, и предположили, что вторичный мессенджер in situ генерируется локальной изоформой sAC (). Асин-Перес и др., 2009). Представление о том, что цитозольный цАМФ не может достичь митохондриального матрикса, было подтверждено в более поздних исследованиях с использованием биосенсоров на основе FRET, показывающих, что цАМФ генерируется локально в матриксе в ответ на бикарбонат или Ca 2+ (Di Benedetto et al., 2013б; Лефкиммиатис и др., 2013). Таким образом, внутренняя митохондриальная мембрана, по-видимому, действует как барьер для диффузии цАМФ, что дает возможность того, что передача сигналов цАМФ в OMM и IMS может быть независимой от передачи сигналов цАМФ в матриксе (Lefkimmiatis et al., 2013; Valsecchi et al., 2013). ).

Было высказано предположение, что митохондрии содержат два эффектора цАМФ, EPAC и PKA (Schwoch et al., 1990; Sardanelli et al., 2006; Chen et al., 2008). EPAC, по-видимому, локализуется в митохондриях в зависимости от клеточного цикла; однако его точная субмитохондриальная локализация и действие до сих пор неизвестны (Qiao et al., 2002). Недавние данные, показывающие, что обработка изолированных митохондрий EPAC-специфическими активаторами не влияет на потребление кислорода и активность окислительного фосфорилирования, позволяют предположить, что этот белок, если он присутствует в митохондриальном матриксе, не влияет на дыхание (Acin-Perez et al. , 2009). . С другой стороны, было описано, что PKA присутствует во всех митохондриальных компартментах. Локализация в OMM и IMS достигается за счет привязки к ряду различных AKAP.

Было обнаружено, что по крайней мере три различных AKAP ассоциированы с наружной митохондриальной мембраной: AKAP1 (который включает ряд сплайс-вариантов) (Affaitati et al., 2003; Feliciello et al., 2005), Rab32 (Alto et al., 2002; Bui et al., 2010) и AKAP2 (Wang et al., 2001). Присутствие нескольких AKAP в этом сайте предполагает, что OMM является важным микродоменом цАМФ, гипотеза, которая подтверждается недавней работой, показывающей, что действия PKA на OMM сохраняются дольше, чем в цитозоле, возможно, как следствие локального обогащения киназой и/или или более низкой активности фосфатазы в этом сайте (Lefkimmiatis et al., 2013). PKA, связанный с OMM, активируется цитозольным цАМФ и участвует в контроле как митохондриальной морфологии, так и митохондриальной функции.OMM-PKA был связан с путем фосфорилирования и ингибирования проапоптотического белка BAD (Harada et al. , 1999). Кроме того, известно, что PKA в OMM фосфорилирует Dynamin-1-подобный белок (Drp1), крупную GTP-ase, участвующую в регуляции баланса деления-слияния митохондрий (10). PKA-опосредованное фосфорилирование Drp1 по Ser637 блокирует его способность стимулировать деление, что приводит к удлинению митохондрий и повышению выживаемости клеток в модели нейронных клеток (Chang and Blackstone, 2007; Cribbs and Strack, 2007; Dagda et al., 2011; Меррилл и др., 2011; Слупе и др., 2013; Меррилл и Страк, 2014 г.). Действие PKA, привязанного к AKAP121, направленное на выживание, также подтверждается его влиянием на продукцию АФК. В сердечных миоцитах подавление или замещение AKAP121 приводит к митохондриальной дисфункции, увеличению продукции АФК и гибели клеток (Livigni et al., 2006; Perrino et al., 2010). В совокупности эти данные позволяют предположить, что PKA, связанный с OMM, может быть важным регулятором митохондриальной функции.

Интересно, что сообщалось, что во время ишемии или ацидоза sAC транслоцируется в митохондрии, где предположительно активирует локальный пул PKA, повышая активность проапоптотического белка BAX (Kumar et al. , 2009; Appukuttan et al., 2012), предполагая возможность того, что разные митохондриальные пулы цАМФ могут оказывать противоположное влияние на гибель и выживание клеток.

Недавно в IMS был описан новый AKAP (Means et al., 2011). Было показано, что этот белок, называемый сфингозинкиназным взаимодействующим белком (SKIP), специфически взаимодействует с регуляторными субъединицами PKA типа I (Kovarich et al., 2010; Means et al., 2011). Эта особенность представляет особый интерес, поскольку субъединицы RI имеют более высокое сродство к цАМФ по сравнению с субъединицами RII.Как следствие, популяция IMS-PKA может реагировать на уровни свободного цАМФ, которые недостаточны для активации связанного с OMM пула PKA. Было показано, что IMS-PKA фосфорилирует ChChd3, митохондриальный белок, который находится в IMM, обращенном к IMS. Поскольку ChChd3 является важным регулятором поддержания крист и производства энергии (Darshi et al., 2011), будет интересно понять, как фосфорилирование PKA влияет на действия этого белка.

4. Значение для разработки лекарств

Теперь ясно, что локализованная передача сигналов цАМФ имеет решающее значение для функционирования многих типов клеток.Поэтому ожидается, что нарушение регуляции разделенных сигналов цАМФ может привести к заболеванию. Этот прогноз подтверждается рядом исследований in vitro (Николаев и др., 2010; Перера и Николаев, 2013) и растущим числом экспериментов на животных моделях (МакЛеннан и Краниас, 2003; Бека и др., 2011, 2013). Например, несколько распространенных патологий связаны с нарушением локальной передачи сигналов AKAP/PKA, в том числе катаракта, диабет, рак и сердечно-сосудистые заболевания (Zakhary et al., 2000; Чен и др., 2007 г.; Виртбергер и др., 2007 г.; Голд и др., 2013b). По мере того, как наше понимание механизмов, лежащих в основе компартментализованной передачи сигналов, растет, также развиваются идеи о том, как избирательно манипулировать этим сигнальным путем локально в терапевтических целях. Например, нацеливание на интерфейс между взаимодействующими белками в определенном месте, чтобы нарушить локальную ветвь сигнального каскада, обеспечит гораздо большую селективность, чем нарушение всего каскада путем воздействия на рецептор на поверхности клетки (Houslay et al. , 2005; Закколо, 2011).

В случае локализованных сигналосом цАМФ вмешательство в белок-белковое взаимодействие может обеспечить способ тонкой настройки локального сигнала (Tröger et al., 2012). Например, замещение резидентной PDE может привести к увеличению локальных концентраций цАМФ и повышенной активации PKA, тогда как удаление PKA приведет к избирательному снижению уровня цАМФ-зависимого фосфорилирования соседних мишеней (Hundsrucker and Klussmann, 2008; Lee et al., 2008). др., 2013).

Примером потенциальной терапевтической ценности манипулирования локализованными сигналами цАМФ может служить исследование небольшого белка теплового шока 20 (Hsp20). Во время ишемического инсульта повышенное PKA-опосредованное фосфорилирование Hsp20 обеспечивает кардиозащиту (Qian et al., 2009). Недавно было показано, что в сердечных миоцитах фосфорилирование Hsp20 находится под контролем компартментализованного сигнального каскада цАМФ и что Hsp20 может непосредственно секвестрировать компоненты сигнального пути, а именно членов семейства PDE4 (Sin et al. , 2011). Показано, что нарушение взаимодействия между Hsp20 и PDE4 с конкурирующим пептидом приводит к повышению доступности цАМФ в микроокружении, окружающем Hsp20, и к усилению его фосфорилирования с помощью PKA. В присутствии гипертрофических стимулов нарушения взаимодействия между изоформами Hsp20 и PDE4 было достаточно, чтобы усилить фосфорилирование Hsp20 в сайте серина 16 PKA и защитить от гипертрофии в модели in vitro (Sin et al., 2011).

Место взаимодействия с Hsp20 было картировано в пределах каталитического домена PDE4, и поэтому разрушающий пептид не мог различать разные изоформы PDE4.Это не относится к другому классу пептидов, способных избирательно нарушать взаимодействие изоформы PDE4D5 с двумя взаимодействующими белками-партнерами, рецептором активированной С-киназы 1 (RACK1) и β-аррестином. Фактически, пептиды-разрушители, которые избирательно препятствуют связыванию PDE4D5 либо с RACK1, либо с β-arrestin (Bolger et al., 2006; Smith et al., 2007), использовались в клинически значимой модели полярности и миграции раковых клеток. RACK1 взаимодействует с протеиновой киназой фокальной адгезии (FAK) в зарождающихся протрузивных структурах, которые формируются по мере распространения клеток на внеклеточный матрикс.Роль RACK1 будет заключаться в том, чтобы действовать как промежуточный каркас, переносящий PDE4D5 в комплекс. С помощью селективных разрушителей взаимодействия RACK1-PDE4D5 было показано, что локальная активность PDE4D5 имеет решающее значение для приобретения этими клетками «распространенного» фенотипа (Serrels et al., 2010). Путем прямого сравнения двух пептидов эти авторы обнаружили, что в отличие от разрушителя PDE4D5-β-аррестина, который не влиял на полярность и миграцию раковых клеток, пептид, разрушающий PDE4D5-RACK1, ингибировал как полярность, так и миграцию клеток (Serrels et al., 2010).

Хотя пептиды зарекомендовали себя как бесценные исследовательские инструменты, их ограниченная проницаемость через мембраны и плохая доступность для перорального применения ограничивают их использование в терапевтических целях. Ограничения пептидов-разрушителей могут быть преодолены путем скрининга небольших молекул, которые избирательно нарушают белок-белковые взаимодействия, альтернативная стратегия, которая уже использовалась для локального манипулирования сигнальным путем cAMP/PKA (Christian et al., 2011).

Воздействие на белок-белковые взаимодействия является многообещающим терапевтическим направлением.Однако основным недостатком его разработки является отсутствие чувствительного, мощного анализа, который можно было бы использовать в установке с высокой пропускной способностью. В случае разделенной передачи сигналов цАМФ такой анализ был бы оптимальным в сочетании с чувствительными инструментами визуализации живых клеток. Таким образом, задачей на будущее является разработка надежных репортеров, способных эффективно измерять вариации цАМФ в конкретных мультимолекулярных комплексах и их применение в системах с высокой пропускной способностью. Разработка таких инструментов позволит проводить скрининг большого количества молекул на предмет их действия на различные микродомены цАМФ, обеспечивая средства для идентификации молекул с беспрецедентной специфичностью действия.

Фармакологическое лечение, нацеленное на сигнальный каскад цАМФ, до сих пор в значительной степени основывалось на глобальном ингибировании или активации пути и часто ассоциировалось с неблагоприятными вторичными нецелевыми эффектами. Накопление информации о механизмах, лежащих в основе локальной передачи сигналов этого мессенджера, дает теперь возможность для разработки терапевтических вмешательств, специфичных для места и действия.

собственники, учредители, руководство, реквизиты (ИНН 6317095267)

01.13,6 Выращивание грибов и трюфелей
01.19.2 Цветоводство
01.30 Выращивание рассады
01.49.5 Разведение домашних животных
01.7 Охота, отлов и отстрел диких животных, в том числе оказание услуг в этих сферах
02.10 Лесное хозяйство и прочая лесохозяйственная деятельность
02. 30.11 Сбор дикорастущих грибов
03.11 Морское рыболовство
03.12 Пресноводная рыбалка
41,2 Строительство жилых и нежилых зданий
41,20 Строительство жилых и нежилых зданий
42.91.2 Строительство гидротехнических сооружений
42.91,4 Производство дноочистных, дноуглубительных и берегоукрепительных работ
42,99 Строительство прочих инженерных сооружений, не включенных в другие группировки
43.11 Снос
43,12 Подготовка места
43.12.1 Расчистка строительной площадки
43.12.3 Производство земляных работ
55.10 Гостиницы и аналогичные средства размещения
55,2 Отдых и другое краткосрочное размещение
55,20 Отдых и другое краткосрочное размещение
55,30 Кемпинги, стоянки транспортных средств для отдыха и стоянки трейлеров
55,90 Другое жилье
56,1 Предоставление продуктов питания и напитков
56. 10 Предоставление продуктов питания и напитков
56.10.1 Деятельность ресторанов и кафе с полным ресторанным обслуживанием, столовых, ресторанов быстрого питания и ресторанов самообслуживания
56.10.3 Деятельность ресторанов и баров по обеспечению питанием в железнодорожных вагонах-ресторанах и на судах
56,29 Прочая деятельность в сфере общественного питания
56.3 Деятельность по раздаче напитков
56,30 Деятельность по раздаче напитков
59,13 Деятельность по распространению кино-, видеофильмов и телевизионных программ
59,14 Деятельность по демонстрации кинофильмов
62,02 Консультации по компьютерам
68,1 Покупка и продажа собственного недвижимого имущества
68. 10 Покупка и продажа собственного недвижимого имущества
68.10.1 Подготовка к продаже собственной недвижимости
68.10.11 Подготовка к продаже собственной жилой недвижимости
68.10.12 Подготовка к продаже собственной нежилой недвижимости
68.10.21 Купля-продажа собственной жилой недвижимости
68.10.22 Купля-продажа собственных нежилых зданий и помещений
68.10.23 Купля-продажа земли
68,2 Аренда и управление собственным или арендованным недвижимым имуществом
68,20 Аренда и управление собственным или арендованным недвижимым имуществом
68.20.1 Аренда и эксплуатация собственного или арендованного жилого недвижимого имущества
68. 20.2 Аренда и эксплуатация собственного или арендованного нежилого недвижимого имущества
68.3 Операции с недвижимым имуществом за вознаграждение или на договорной основе
68,31 Деятельность агентств недвижимости за вознаграждение или на договорной основе
68.31.1 Посреднические услуги при купле-продаже недвижимого имущества за вознаграждение или на договорной основе
68.31.11 Посреднические услуги при купле-продаже жилой недвижимости за вознаграждение или на договорной основе
68.31.12 Посреднические услуги при купле-продаже нежилой недвижимости за вознаграждение или на договорной основе
68.31.2 Посреднические услуги по аренде недвижимого имущества за вознаграждение или на договорной основе
68.31.21 Посреднические услуги по аренде жилой недвижимости за вознаграждение или на договорной основе
68. 31.22 Посреднические услуги по сдаче в аренду нежилого недвижимого имущества за вознаграждение или на договорной основе
68.31,3 Консультационные услуги по купле-продаже недвижимого имущества за вознаграждение или на договорной основе
68.31.31 Консультационные услуги по купле-продаже жилой недвижимости за вознаграждение или на договорной основе
68.31.32 Консультационные услуги по купле-продаже нежилой недвижимости за вознаграждение или на договорной основе
68.31.4 Консультационные услуги по аренде недвижимого имущества за вознаграждение или на договорной основе
68.31.41 Консультационные услуги по аренде жилой недвижимости на возмездной или договорной основе
68.31.42 Консультационные услуги по вопросам аренды нежилого недвижимого имущества на возмездной или договорной основе
68. 31.5 Посреднические услуги по оценке недвижимого имущества за вознаграждение или на договорной основе
68.31.51 Посреднические услуги по оценке жилой недвижимости за вознаграждение или на договорной основе
68.31.52 Посреднические услуги по оценке нежилой недвижимости за вознаграждение или на договорной основе
68,32 Управление недвижимостью за вознаграждение или на договорной основе
68.32.1 Управление эксплуатацией жилищного фонда за вознаграждение или на договорной основе
68.32.2 Управление операциями с нежилым фондом за вознаграждение или на договорной основе
77.11 Прокат и лизинг автомобилей и легковых автомобилей
77,21 Аренда и лизинг товаров для отдыха и спорта
77,22 Прокат видеокассет и дисков
77.29.1 Аренда и лизинг телевизоров, радиоприемников, видеомагнитофонов, аудиомагнитофонов и аналогичного оборудования
77.29.2 Аренда и лизинг мебели, электрических и неэлектрических бытовых приборов
77.29,3 Аренда и лизинг музыкальных инструментов
77.29.9 Аренда прочих предметов домашнего обихода и личного пользования для домашних хозяйств, предприятий и организаций, не включенных в другие группировки
77,31 Аренда и лизинг сельскохозяйственных машин и оборудования
77,32 Аренда и лизинг строительных машин и оборудования
77,33 Аренда и лизинг офисной техники и оборудования (включая компьютеры)
77.33.1 Аренда и лизинг офисных машин и оборудования
77,34 Аренда и лизинг оборудования водного транспорта
77,35 Аренда и лизинг авиатранспортного оборудования
77,39 Аренда и лизинг прочих машин, оборудования и материальных ценностей, не включенных в другие группировки
77.39.12 Аренда и лизинг железнодорожного транспорта и оборудования
81.22 Прочая строительная и промышленная уборка
81.29.9 Прочая уборка и уборка, не включенные в другие группировки
87 Деятельность по уходу в стационаре
88 Социальная работа без проживания
90,0 Творческая, художественная и развлекательная деятельность
92,1 Азартные игры и пари
93.1 Занятия спортом
93.11 Эксплуатация спортивных сооружений
93,19 Другие виды спорта
93,2 Развлекательные и развлекательные мероприятия
93,29 Прочие развлечения и развлечения
93.29.2 Деятельность танцевальных площадок, дискотек, танцевальных школ
93.29,9 Прочие развлечения и развлекательная деятельность, не включенные в другие группировки
94,99 Деятельность других членских организаций, не включенных в другие группировки
96,0 Прочие виды индивидуального обслуживания
96.01 Стирка и (химическая) чистка текстильных и меховых изделий
96,02 Парикмахерские и другие косметические услуги
96.03 Похороны и связанные с ними действия
96,04 Физическое благополучие

Жизнь внутри Николаева, осажденного украинского города

Портовый город Николаев каждый день подвергается артиллерийскому обстрелу со стороны российских войск. Тела свалены в морг. Но жители отказываются поддаваться.


НИКОЛАЕВ, Украина — Алла Рябко стояла во дворе городского морга, дрожа от горя и ярости.Ее сын, капитан Роман Рябко, погиб в боях в первый день войны на Украине, но прошло две недели, а его тело еще не подготовили к погребению.

— Он там лежит в мешке, — сказала она, указывая на накрытые тела на земле. «Мне его даже не дают, чтобы я его помыла. Я должен унести его в мешке, мешке для мусора».

Морг переполнен. Тела отдают семьям в том же виде, в каком они прибыли, полуодетые в рваную военную форму, заляпанные кровью и почерневшие от огня.Тела в коридоре, в административных кабинетах, во дворе, в сарае рядом. Это солдаты и гражданские лица, завернутые в простыни или ковры или вообще ничего.

Пока госпожа Рябко кричала от боли, артиллерийские удары сотрясали землю под ее ногами. В тот день в морге было уже 132 тела. Больше будет на подходе.

В Николаеве каждый день обстрелы. Обычно это начинается перед рассветом в виде грохота, удара или удара. Он электризует воздух и посылает толчок в живот, и те, кто предпочитает оставаться в постели, а не бежать в подвал, могут закрыть глаза и позволить своим ушам нарисовать картину битвы, бушующей в темноте.

Русские войска хотят взять Николаев, потому что он стоит у них на пути. Варваровский мост в городе — единственный проезд на многие километры через широкое устье реки Южный Буг. Захватив мост, российские истребители могут продвинуться вдоль побережья Черного моря на запад к Одессе, штабу ВМС Украины и крупнейшему гражданскому порту страны.

Чтобы добраться до моста, им нужно пройти через украинских бойцов, которые пока не сдвинулись с места. И поэтому российские войска бомбят беспорядочно и без разбора, нанося удары по кварталам, больницам и супермаркетам, предпочитая террор без военной выгоды.По данным местных властей, в минувшие выходные в результате авиаударов погибло не менее десятка мирных жителей.

Но есть и отказ поддаться. Мусор все еще собирают, и городские рабочие начали агрессивную кампанию по обрезке деревьев, хотя обстрелы повалили некоторые из этих деревьев.

Семья закрыла элитный бизнес по дизайну интерьеров и теперь целый день ездит по городу, доставляя еду нуждающимся жителям, лишь изредка останавливаясь, чтобы спрятаться в подвале.Есть группа местных ребят, которые объединились, чтобы попытаться починить подбитый в бою российский танк, чтобы его могли использовать украинские военные.

В нескольких кварталах от морга кафе Coffee Go процветает, даже когда артиллерийский огонь сотрясает стеклянные окна. Когда владельцы попытались закрыться, их сотрудники-подростки взбунтовались, говорит Виктория Куплевская, 18-летняя бариста с оранжевой прядью в волосах.

«Мы хотели работать», — сказала она. «Я ничего не боюсь.

Когда-то центр судостроения Российской империи, Николаев был одним из первых мест, подвергшихся нападению после того, как 24 февраля президент России Владимир Путин отдал приказ о вторжении. оттеснить, оставив после себя сгоревшие туши бронетехники.

Никто не знает, сколько продержатся украинские защитники. Российские войска атаковали с применением танков, артиллерии и истребителей, обстреляв город с трех сторон.Каждый день приносит больше смертей. Но и неповиновение.

Губернатор

«Доброе утро. Мы из Украины».

Так начинается типичное утреннее видеообращение от губернатора области Виталия Кима. Среди горожан шутят, что никто не выйдет из дома, пока мистер Ким не скажет, что здесь безопасно, и никто не сможет спать спокойно, пока мистер Ким не пожелает им спокойной ночи. Это лишь небольшое преувеличение. Его оптимистичные видео в Facebook и Telegram, которые он неизменно открывает, показывая знак мира и зубастую улыбку, обычно собирают полмиллиона просмотров, что примерно равно населению города.

«Когда он улыбается, мы можем идти спать», — сказала Наталья Станиславчук, которая занимается доставкой еды нуждающимся. «Если Ким говорит, что мы можем спать спокойно, значит, мы можем спать спокойно».

Г-н Ким публикует видеоролики в течение дня, смесь заверений и резкого очернения русских сил, которых он называет попеременно идиотами, ублюдками и орками, злой кривозубой армией востока в «Властелине колец» Толкина. ” Сообщения призваны поднять настроение горожанам, даже если грохот, который они слышат, звучит ужасно близко.

«Что сказать, 17-й день войны, все хорошо, настроение отличное», — сказал г-н Ким в сообщении на выходных, которое началось с сообщения об авиаударе по жилому кварталу. «У нас есть свобода, и мы боремся за нее. И все, что у них есть, это рабство. Мы хотим, чтобы все наши мечты сбылись, и мы движемся в этом направлении. Вместе к победе».

Месяц назад основными приоритетами г-на Кима были улучшение дорог и туристической инфраструктуры региона, в том числе большие планы по развитию курорта на живописном участке побережья Черного моря.

«Это были дорогостоящие, большие, красивые проекты, которые были необходимы, и в один день они были уничтожены», — сказал г-н Ким.

Сейчас координирует с военными оборону города. Встретившись для интервью в областной администрации, г-н Ким был одет в зеленые брюки карго, а на поясе у него был висел черный пистолет.

Он предсказал, что любые попытки русских захватить Николаев приведут к кровавым и разрушительным уличным перестрелкам. На каждом углу есть куча шин и готовая зажигательная бомба рядом с ней.Если российские войска войдут в город, жители готовы быстро погрузить их в дымную тьму, прикрываясь тем, что украинские защитники пытаются один за другим отстреливать российские танки.

Это будет апокалипсис, сказал мистер Ким.

«Моя стратегия состоит в том, чтобы быть намного более радостным, чем это уместно в такой ситуации», — сказал он. «Это не значит, что я не понимаю, насколько все серьезно».

Мишени

Огненный шар осветил ночное небо, как ранний рассвет.Начался очередной день русских обстрелов.

Это было в понедельник, 7 марта, и российские войска начали утреннюю атаку, в результате которой местные жители вскочили с кроватей. Они бежали в импровизированные бомбоубежища, подвалы, которые многие жители оборудовали матрасами и транспортировочными поддонами для сна, потому что теперь они проводят там так много времени.

«Они бесчестно, цинично напали на наш город, пока люди спали», — сказал г-н Ким в одном из своих сообщений.

Крылатая ракета попала в казарму, заполненную спящими солдатами 79-й десантно-штурмовой бригады Украины.Восемь человек были убиты, еще восемь пропали без вести, их тела погребены под грудой обломков. Забастовка открыла казарму, как кукольный домик, открывая жутковатый взгляд на повседневную солдатскую жизнь: серые стальные двухъярусные кровати, правила, вывешенные на стене.

Могло быть и хуже, если бы ракета сначала не врезалась в линию тополей, немного отбросив ее от цели.

«Нам очень повезло, что эти тополя были здесь, потому что, если бы это был прямой удар, мы все были бы облажались», — сказал солдат по имени Вова, который помогал искать тела.«Тополя искривили траекторию ракеты».

То же самое было в этот день по Николаеву. В одном из районов плотно застроенных многоквартирных домов жители попеременно убирали свои разрушенные дома и бросались в подвальные бомбоубежища во время продолжающихся ударов. Одна женщина, когда к ней подошел репортер, обрушила на г-на Путина такой поток ненормативной лексики, что почувствовала необходимость извиниться, а затем расплакалась.

В результате ракетных ударов были выбиты окна и разбросаны осколки по мебели, стенам и приборам.

«Посмотрите, как русский мир спасает нас», — сказала Марина Бабенко, мать двоих детей, саркастически ссылаясь на заявление г-на Путина о том, что Россия ведет освободительную войну. «Мы жили хорошо и имели все необходимое. Сейчас бомбят жилые кварталы, женщин и детей. У нас нет оружия. Все, что мы можем сделать, это спрятаться в подвале. У нас нет сил ни на что другое».

В благоустроенном районе Балабановки жители убирали территорию после того, как российские самолеты рано утром сбросили боевую нагрузку, в результате которой были снесены дома и погибло несколько жителей.

Бомба проделала большую воронку на том месте, где когда-то был задний двор Романа Никоры, и три цыпленка сидели рядом с искореженными остатками их хижины. В воздухе висел едкий запах.

«Пойдемте, я покажу вам, как мы выжили», — сказал г-н Никора, ведя посетителя в неглубокий подвал, где он прятался во время бомбежки с женой, ребенком и родителями.

Подвал выглядел так, будто его перевернули вверх дном и потрясли. Шкафы были сорваны со стены; часть заднего двора была просунута через окна.

«Они хуже фашистов, — сказал 32-летний бизнесмен Никора о российских войсках. «Они говорят, что нацелены только на военные объекты, военные сооружения. Ну, ничего подобного здесь нет».

Несмотря на свой страх новых бомбежек, г-н Никора сказал, что он и его семья не собираются никуда уезжать.

«Мы восстановим», — сказал он. — У меня еще есть руки.

Непокорный

Две пожилые женщины сидели на скамейке в городском парке и смотрели, как играют трое маленьких детей, когда их разговор был прерван зловещим гудящим звуком.Сирена воздушной тревоги. Женщины продолжали говорить. Через несколько минут они медленно встали, усадили младшего ребенка в коляску и не торопясь ушли.

Российские ракетные удары теперь могут задавать ритм жизни в Николаеве, но многие жители полны решимости играть песню в выбранной ими тональности.

«Паники нет», — сказала г-жа Станиславчук, так восхищенно отзывавшаяся о г-не Киме, губернаторе. «Наши люди хладнокровно оценивают ситуацию и помогают друг другу».

До войны г-жаСтаниславчук и ее муж Александр планировали открыть второй филиал своего бизнеса по дизайну интерьеров в Буче, многообещающем пригороде Киева, куда их сын Егор переехал в стильный недавно построенный дом.

На прошлой неделе они вместо этого катались по Николаеву, своему родному городу, раздавали еду и нервно ждали новостей от Егора. Он пытался сбежать из Бучи со своим домашним кроликом Дивой после того, как несколько дней прятался в подвале от российских войск, оккупировавших пригород.

«Бывают моменты, когда боевой дух падает и настроение портится», — сказала госпожа Станиславчук, несущая православную икону Богородицы. «Но когда видишь, что кому-то нужна твоя помощь и поддержка, приходится вставать и двигаться. Тогда ты понимаешь, что этому придет конец, потому что правда на нашей стороне».

Российско-украинская война: что нужно знать


В течение последних двух недель из Николаева происходил исход. По утрам большие колонны автомобилей и автобусов, некоторые с самодельными картонными табличками с надписью «Дети», пробивают движение на Варваровском мосту.

Мост – это путь к отступлению. Это также приз, которого жаждут российские силы.

Но если они войдут в город, то помимо украинских вооруженных сил российским войскам придется столкнуться с такими людьми, как Дмитрий Дмитриев, местный журналист, отложивший ручку в пользу автомата. Во время недавнего визита в офис его интернет-издания было больше оружия, чем журналистов, а на полу валялись ящики с патронами.

«Мы все участвуем в сопротивлении», г-н.— сказал Дмитриев.

Российским силам также предстоит сразиться с Николаем Билящатом, 54-летним водителем автобуса. На прошлой неделе г-н Билящат был с соседями, с болтающимися изо рта сигаретами, заглядывая в открытый моторный отсек российского танка Т-90.

Днем ранее украинские силы взорвали мост, когда танк переходил через него. Он все еще работал, но мог ездить только по кругу. Белая буква Z, которую российские войска использовали для обозначения своей техники, была закрашена зеленым цветом, а на мачте антенны танка красовался украинский флаг.

Господин Билящать хотел запустить его и повернуть против русских войск.

«Мы просто местные жители. Я не механик. Я просто помогаю», — сказал он. «Что нам еще делать? Нам нужно как-то помочь. Я не собираюсь сидеть дома и прятаться».

Раненые

В городской больнице № 3 Анна Сметана сидела на койке и рыдала. Мать 40 лет, на ней было персиковое платье в черный горошек, ее плечо и нога были покрыты большими бинтами, пропитанными кровью.

Двумя днями ранее г-жа Сметана и шестеро ее коллег из местного детского дома ехали в маленькую деревню, куда детей эвакуировали в начале войны. По ее словам, примерно в 15 милях от города российская бронированная боевая машина с белой буквой Z открыла огонь по фургону.

«Сначала в нас стреляли из автоматов, — сказала г-жа Сметана. «Потом машина загорелась и наполнилась дымом».

«Уходи, убирайся», сказала она, солдаты сказали ей.«Они поставили нас на колени, наставили на нас оружие и забрали наши телефоны».

«Мы попросили их вернуть их», — сказала она. Их ответ: «Нет, нельзя. У нас есть заказы».

По ее словам, трое коллег г-жи Сметаны сгорели в огне, охватившем фургон. Г-жа Сметана получила два выстрела в плечо и один раз в ногу.

«Повсюду были ракеты, бомбы», — добавила она. «Все, что мы слышали, это звуки взрывов».

Всего за один день мисс.По словам главврача больницы Дмитрия Колосова, Сметана был одним из 25 пациентов, которые лечились от ранений в результате обстрелов и обстрелов. Он добавил, что ранее на этой неделе во дворе больницы разорвались снаряды, разбросав осколки во всех направлениях.

«Мы думали, что коронавирус — это кошмар», — сказал г-н Колосов. — Но это ад.

Защитники

Черные следы от обстрела винтового самолета, стоящего на взлетно-посадочной полосе небольшого международного аэропорта Николаева. Внутри зона досмотра выпотрошена, а в холле второго этажа лежат остатки солдатского обеда из консервированных сардин в томатном соусе.

В начале войны российские войска недолго удерживали аэропорт, но были быстро вытеснены украинскими боевиками. С тех пор российские силы продолжали попытки установить контроль, чтобы их транспортные самолеты могли перебросить войска и технику, чтобы поддержать их бой и продолжить наступление на запад.

Но пока украинцы их останавливают. На видео, снятом украинскими военными, видно, как они стреляют переносными ракетами с крыши аэропорта по российским истребителям внизу.

В недавнем визите развевался украинский флаг.

«У нас очень сильная позиция, и мы ждем их», — сказал сержант. Руслан Хода, который настоял на том, чтобы попрактиковаться в английском с репортером. «Нет ничего неожиданного. Мы знаем, что они прибывают и откуда они прибывают. И мы готовы сказать: «Здравствуйте, русские глупые мальчики». Они начинают атаки с севера и северо-востока, затем меняют направление и идут с юга. По его словам, часто нападениям предшествуют облеты российских беспилотников-разведчиков.

«Они пытаются напасть на нас с разных сторон, чтобы попробовать нашу защиту, попробовать нашу силу», — сказал он. «Русские войска не ожидали такой сильной армии».

Генерал-майор Дмитрий Марченко, командующий вооруженными силами Украины в Николаеве, заявил, что украинская стратегия заключается в том, чтобы сломить боевой дух путем безжалостного обстрела российских позиций. Но есть еще один критический фактор.

«Мы защищаем наши дома, наших женщин, наши семьи», — сказал он. «Нам не нужен их мир.Нам не нужен их язык.

Оставить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.