Бмт им амосова: Абитуриенту — ГАПОУ «Брянский медико-социальный техникум им.ак. Н.М.Амосова» - Санкт-Петербургское государственное бюджетное учреждение социального обслуживания населения

Содержание

Абитуриенту — ГАПОУ «Брянский медико-социальный техникум им.ак. Н.М.Амосова»

Перейти к содержимому ГАПОУ «Брянский медико-социальный техникум им.ак. Н.М.Амосова»

Главное меню

MENUMENU

Главная
Новости
Сведения об образовательной организации
- Основные сведения
- Структура и органы управления образовательной организацией
- Документы
- Образование
- Образовательные стандарты
- Руководство. Педагогический состав
- МТО и оснащенность образовательного процесса
- Стипендии и иные виды материальной поддержки
- Платные образовательные услуги
- Финансово-хозяйственная деятельность
- Вакантные места для приема (перевода)
- Доступная среда
- Международное сотрудничество
- История и достижения техникума
- Антикоррупционная политика
- Охрана труда
- Персональные данные
- Противопожарная безопасность
- Противодействие экстремизму и тероризму
Деятельность
- ФГОС ТОП -50
- ФГОС
- Методическая работа
- Научная работа
- Учебно-исследовательская работа
- Воспитательный процесс «Стратегия успеха»
- Инновационная деятельность
- Мы выбираем здоровье
Абитуриентам
- Абитуриенту
- Специальности
- Калькулятор среднего балла
- Нормативно-правовая база
- Перечень медицинских противопоказаний
- Список документов
- Стоимость обучения
- Требования к медицинской документации
- Список зачисленных
- Контакты
- Общежитие
Студентам
- Расписание
- Дипломная работа
- Курсовое проектирование
- Образец заявления для отработки пропущенных занятий
- Единые требования
- Порядок условного перевода на следующий курс обучающихся
- Требования к выпускникам
- Права и обязанности
- Трудоустройство
- Положение о социальной защите студентов
- Сотрудничество «Будущее медицины начинается в колледже»
- ЕГЭ
- Страничка педагога-психолога
Слушателям ДПО
- Информация
- Нормативно-правовая база
- Контакты ДПО
- Дополнительные услуги
- Правила приёма
- НМиФО
- Фармация
- Семинары конференции и форумы
- Дистанционные образовательные технологии (ДОТ)
- Отзывы и предложения
Первичная аккредитация
- Нормативно-правовая база по аккредитации
- Расписание аккредитации
- Протоколы
- Методический центр аккредитации специалистов
Движение WorldSkills
- WorldSkills
- WorldSkills в Брянской области
- Компетенция «Медицинский и социальный уход»
- Участники
- Результаты
- Фото
Информационная безопасность
- Локальные нормативные акты в сфере обеспечения ИБ
- Нормативное регулирование
- Педагогическим работникам
- Студентам техникума
- Родителям (законным представителям)
Библиотека
- Правила пользования библиотекой
- Список периодических изданий
- Новая учебная литература
- Электронные образовательные ресурсы
- Сведения о укомплектованности библиотечного фонда
- Медицинские и образовательные ресурсы Интернета
Независимая оценка качества образования (НОКО)
Дистанционное обучение
Закупки

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПОДАЧЕ ДОКУМЕНТОВ НА САЙТЕ ПРИЕМНОЙ КОМИССИИ

Методические рекомендации

для проведения вступительного испытания по специальности 43. 02.12 Технология эстетических услуг

Брянский медицинский техникум имени академика Н.М. Амосова

Я б в нефтяники пошел!

Пройди тест, узнай свою будущую профессию и как её получить.

Химия и биотехнологии в РТУ МИРЭА

120 лет опыта подготовки

Международный колледж искусств и коммуникаций

МКИК — современный колледж

Английский язык

Совместно с экспертами Wall Street English мы решили рассказать об английском языке так, чтобы его захотелось выучить.

15 правил безопасного поведения в интернете

Простые, но важные правила безопасного поведения в Сети.

Олимпиады для школьников

Перечень, календарь, уровни, льготы.

Первый экономический

Рассказываем о том, чем живёт и как устроен РЭУ имени Г.В. Плеханова.

Билет в Голландию

Участвуй в конкурсе и выиграй поездку в Голландию на обучение в одной из летних школ Университета Радбауд.

Цифровые герои

Они создают интернет-сервисы, социальные сети, игры и приложения, которыми ежедневно пользуются миллионы людей во всём мире.

Работа будущего

Как новые технологии, научные открытия и инновации изменят ландшафт на рынке труда в ближайшие 20-30 лет

Профессии мечты

Совместно с центром онлайн-обучения Фоксфорд мы решили узнать у школьников, кем они мечтают стать и куда планируют поступать.

Экономическое образование

О том, что собой представляет современная экономика, и какие карьерные перспективы открываются перед будущими экономистами.

Гуманитарная сфера

Разговариваем с экспертами о важности гуманитарного образования и областях его применения на практике.

Молодые инженеры

Инженерные специальности становятся всё более востребованными и перспективными.

Табель о рангах

Что такое гражданская служба, кто такие госслужащие и какое образование является хорошим стартом для будущих чиновников.

Карьера в нефтехимии

Нефтехимия — это инновации, реальное производство продукции, которая есть в каждом доме.

Фармакогнозия – Готовые практикумы

Тема 1.1. Основы фармацевтического товароведения.

Тема 1.2. Товары аптечного ассортимента. Классификация и кодирование.

Тема 1.3. Качество фармацевтических товаров. Технологические методы защиты товара: упаковка, маркировка.

Тема 1.4. Организация хранения лекарственных средств и других товаров аптечного ассортимента.

Тема 1.5. Система контроля качества лекарственных средств и других товаров аптечного ассортимента.

Тема 2.1. Федеральный закон РФ «Об обращении лекарственных средств».

Тема 2.2. Розничная торговля лекарственными средствами.

Тема 2.3. Отпуск лекарственных препаратов аптеками в медицинские организации.

Тема 2.4. Санитарный режим в аптечных организациях.

Тема 2.5. Организация внутриаптечного контроля качества лекарств.

Тема 2.6. Федеральный закон РФ «О наркотических средствах и психотропных веществах». Хранение наркотических средств и психотропных веществ.

Тема 2.7. Порядок оформления рецептов.

Тема 2.8. Порядок отпуска лекарственных средств.

Тема 2.9. Бесплатное и льготное обеспечение лекарственными средствами в рамках оказания государственной социальной помощи.

Тема 2.10. Таксирование рецептов.

Тема 2.11. Отпуск лекарственных средств, изготовленных в аптеке.

Тема 2.12. Порядок безрецептурного отпуска лекарственных средств и других товаров аптечного ассортимента.

Тема 3.1. Основы фармацевтической этики и деонтологии.

Тема 3.2. Техника продаж.

Тема 4.1. Информационные технологии и их применение в фармации.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

1. Комплект контрольно-оценочных средств по профессиональному модулю ПМ 01

2. https://www.vidal.ru

3. http://www.consultant.ru

Работа защищена на оценку “9” без доработок.

Уникальность свыше 40%.

Работа оформлена в соответствии с методическими указаниями учебного заведения.

Количество страниц – 197.

В работе также имеются следующие приложения:

Приложение 1 Алгоритм разработки чек-листа.

Приложение 2 Проверка цифрового штрихового кода лекарственных средств.

Брянский областной центр охраны здоровья семьи и репродукции. Официальный сайт

Влючение/выключение версии для слабовидящих
Перейти в версию для слабовидящих	Ctrl + Alt + S
Выйти из версии для слабовидящих	Ctrl + Alt + X
Выбор размера шрифта
Выбор обычного шрифта	Ctrl + Alt + 1
Выбор увеличенного шрифта	Ctrl + Alt + 2
Выбор большого шрифта	Ctrl + Alt + 3
Выбор контраста
Выбор обычного контраста	Ctrl + Alt + 4
Выбор усиленного контраста	Ctrl + Alt + 5
Выбор инвертированного контраста	Ctrl + Alt + 6
Выбор межбуквенного интервала
Выбор обычного межбуквенного интервала	Ctrl + Alt + 7
Выбор увеличенного межбуквенного интервала	Ctrl + Alt + 8
Выбор большого межбуквенного интервала	Ctrl + Alt + 9
Включение/отключение показа изображений
Показать изображения	Ctrl + Alt + I
Скрыть изображения	Ctrl + Alt + N
Навигация по сайту
Выполнитть действие	Enter
Переход вперед по последовательности элементов на веб-странице, в адресной строке и на панели ссылок	Tab
Прокрутка к началу документа	Page Up
Прокрутка к концу документа	Page Down
Переход в начало документа	Home
Переход к концу документа	End
Переход на следующую страницу	Ctrl + →
Переход на предыдущую страницу	Ctrl + ←

Брянская областная больница №1

Уважаемые родственники пациентов!

Получить официальную информацию о состоянии здоровья пациента, по вопросам получаемого им лечения, находящегося в ГАУЗ «БОБ №1», в том числе в госпитале для пациентов с новой коронавирусной инфекцией, Вы можете только по письменному запросу, в том числе в электронной форме с использованием электронной подписи посредством применения федеральной государственной информационной системы «Единый портал государственных и муниципальных услуг (функций)», единой системы идентификации и аутентификации федеральных государственных информационных систем в сфере здравоохранения, с предоставлением нотариально заверенных копий документов, удостоверяющих личность и подтверждающих степень родства или при наличии документов, подтверждающих Ваш статус (свидетельство о браке; документы, подтверждающие опекунство).

В случае наличия заполненного информированного добровольного согласия (далее – ИДС) пациента, информация предоставляется любому лицу, указанному в ИДС, при предъявлении им документов, удостоверяющих личность.

Информация не предоставляется в случаях, если пациент запретил сообщать информацию или не определил лицо, которому должна быть передана такая информация.

Основания:

1. Ст. 13, 22 Федерального закона от 21.11.2011г. №323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан РФ»

2. Приказ Минздрава России от 31.07.2020г №789 Н «Об утверждении порядка и сроков предоставления медицинских документов (их копий) и выписок из них

3. Приказ Минздрава России от 20.12.2012г. №11777 «Об утверждении Порядка дачи информированного добровольного согласия на медицинское вмешательство и отказа от медицинского вмешательства в отношении определенных видов медицинских вмешательств, форм информированного добровольного согласия на медицинское вмешательство и форм отказа от медицинского вмешательства»

Администрация больницы

Значение научно-исследовательской работы студентов специальности «Фармация в учебном процессе техникума» | Технологии, методики | Педтехнологии

Значение научно-исследовательской работы студентов специальности «Фармация в учебном процессе техникума»

Автор: Сухобокова Ирина Валентиновна, Анищенко Елена Валентиновна, Смоловская Наталья Михайловна

Организация: ГАОУ СПО БМТ им. ак. Н.М. Амосова

Населенный пункт: Брянская область, Брянск

Современный период развития общества характеризуется изменениями, которые затрагивают все сферы жизнедеятельности человека. Быстрый темп социально-экономических преобразований в стране, смена ценностных ориентаций в обществе, увеличивающийся объём информации и наметившаяся тенденция к расширению управленческих функций в профессиональной деятельности обусловили изменение требований, предъявляемых обществом к системе профессионального образования в вопросах подготовки будущих специалистов. Сегодня, как никогда, приобретают практическую значимость умения специалиста адекватно воспринимать сложные ситуации жизни, правильно их оценивать, быстро адаптироваться к новым познавательным ситуациям, целенаправленно перерабатывать имеющуюся информацию, искать и дополнять её недостающей, знать закономерности её оптимального использования, прогнозировать результаты деятельности, используя свой интеллектуальный и творческий потенциал.

В связи с этим в ГАПОУ Брянский медико-социальный техникум большое значение придается научно-исследовательской работе студентов. Современный специалист должен владеть не только необходимой суммой фундаментальных и специальных знаний, но и определёнными навыками творческого решения практических задач, постоянно повышать свою квалификацию, быстро адаптироваться к изменяющимся условиям. Все эти качества, в частности, формируются в ходе обучения студентов на специальности Фармация. Воспитываются они через активное участие студентов в научно-исследовательской работе, которая на современном этапе превращается в один из основных компонентов профессиональной подготовки будущего специалиста. При планировании и организации научно-исследовательской работы происходит овладение теоретическими знаниями, методиками проведения эксперимента, способами применения научных знаний. Такой поход формирует у студентов интерес к науке, познавательные потребности, развитие желания глубже познакомиться с проблематикой изучаемой области научного знания, разнообразием точек зрения, целеустремленности. Воспитывающая функция включает также воспитание профессионального призвания, профессиональной этики.

На специальности создано и успешно функционирует студенческое научно-исследовательское общество, включившее в себя дисциплины Общая и неорганическая химия, ПМ 01Фармакогнозия и Технологическое материаловедение, способствуя внедрению исследовательского компонента в студенческую жизнь. В его состав входят студенты 1-3 курсов. Деятельность СНО курируется заместителем директора по научной работе техникума Яковлевой З.Р.. Уже на первом курсе студенты вовлекаются в этот интереснейший мир исследований. В начале учебного года студенты совместно с заведующей отделения Фармация Сухобоковой И.В. и преподавателями Анищенко Е.В. и Смоловской Н.М. определяются с выбором темы исследования и работают над ней в течение учебного года. Научные руководители мотивируют, планируют, координируют и контролируют деятельность студентов.

Ежегодно студенты являются участниками и призерами внутренних, областных и межрегиональных конференций и конкурсов научно-исследова-тельских работ.

Так, студенты научно-исследовательского общества в 2013-2015 года занимали ведущие места среди студентов техникума и в 2015 году заняли первое и второе места на межрегиональной научно-практической конференции студентов среднего профессионального образования «Студент и наука», посвященной 70-летию Победы в Великой Отечественной войне 1941-1945.

Профессионально-практическая деятельность больше всего способствует формированию исследовательских умений. Работа над дипломным проектированием невозможна без проведения каких-то исследований, методикой которых студенты начинают овладевать в ходе работы научно-исследовательского общества.

Преподаватель, организуя исследовательскую деятельность, должен обладать определенными компетентностями:

сам быть творческой личностью
постоянно заниматься самообразованием
занимать активную педагогическую позицию, иметь собственное стремление к исследовательской деятельности
уметь прогнозировать перспективу собственной деятельности, так и деятельности студента
уметь налаживать деловые формы общения со студентами,
уметь диагностировать творческие способности студентов в определенной области

Развитие этих педагогических компетенций является одной из важнейших задач методической службы техникума. В методическом кабинете представлены рекомендации по организации научно-исследовательской деятельности, по оформлению НИР, сборники конференций различного уровня, проводится большая индивидуальная работа с научными руководителями студентов. Мастерство педагога должно проявиться в том, чтобы студент, постигая методы и формы исследовательской деятельности, не испугался теории и сложностей, не потерял интерес и шел все дальше, и дальше в своем постижении нового. Педагог ВДОХНОВЛЯЕТ – ОРГАНИЗУЕТ – НАПРАВЛЯЕТ.

В процессе исследовательской деятельности большую роль играет общение, которое взаимно обогащает и совершенствует как студентов, так и их руководителей.

Системная и грамотная работа по развитию исследовательской деятельности на специальности Фармация является действенным средством качественной подготовки компетентного фармацевта в современных условиях.

Самая большая награда для педагога – это образованный, всесторонне развитый выпускник, который сможет применить знания, полученные на занятиях кружка в своей практической деятельности.

Опубликовано: 12.02.2016

Длительная стабилизация заболевания после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток у пациента с рецидивом нейробластомы. Клиническое наблюдение и обзор литературы | Толкунова

1. Ward E., DeSantis C., Robbins A., Kohler B., Jemal A. Childhood and adolescent cancer statistics, 2014. CA Cancer J Clin 2014;64(2):83–103. doi: 10.3322/caac.21219.

2. Berthold F., Spix C., Kaatsch P., Lampert F. Incidence, Survival, and Treatment of Localized and Metastatic Neuroblastoma in Germany 1979–2015. Paediatr Drugs 2017;19(6):577–93. doi: 10.1007/s40272- 017-0251-3.

3. Cohn S., Pearson A., London W. et al.; INRG Task Force. The International Neuroblastoma Risk Group (INRG) classification system: and INRG Task Force report. J Clin Oncol 2009;27(2):289–97. doi: 10.1200/JCO.2008.16.6785.

4. Park J., Bagatell R., Cohn S. et al. Revisions to the International Neuroblastoma Response Criteria: A Consensus Statement From the National Cancer Institute Clinical Trials Planning Meeting. J Clin Oncol 2017;35(22):2580–7. doi: 10.1200/JCO.2016.72.0177.

5. Marachelian A., Villablanca J., Liu C. et al. Expression of five neuroblastoma genes in bone marrow or blood of patients with relapsed/refractory neuroblastoma provides a new biomarker for disease and progression. Clin Cancer Res 2017;23(18):5374–83. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-16-2647.

6. Tadeo I., Berbegall A., Castel V. et al. Extracellular matrix composition defines an ultra-high-risk group of neuroblastoma within the high-risk patient cohort. Br J Cancer 2016;115(4):480–9. doi: 10.1038/bjc.2016.210.

7. London W., Castel V., Monclair T. et al. Clinical and biological features predictive of survival after relapse of neuroblastoma: a report from the International Neuroblastoma Risk Group Project. J Clin Oncol 2011;29(24):3286–92. doi: 10.1200/JCO.2010.34.3392.

8. Simon T., Berthold F., Borkhardt A. et al. Treatment and outcomes of patients with relapsed, high-risk neuroblastoma: results of German trials. Pediatr Blood Cancer 2011;56(4):578–83. doi: 10.1002/pbc.22693.

9. Basta N., Halliday G., Makin G. et al. Factors associated with recurrence and survival length following relapse in patients with neuroblastoma. Br J Cancer 2016;115(9):1048–57. doi: 10.1038/bjc.2016.302.

10. London W., Bagatell R., Weigel B. et al. Historical time to disease progression and progression-free survival in patients with recurrent/refractory neuroblastoma treated in the modern era on Children’s Oncology Group early-phase trials. Cancer 2017;123(24):4914–23. doi: 10.1002/cncr.30934.

11. Moreno L., Rubie H., Varo A. et al. Outcome of children with relapsed or refractory neuroblastoma: a meta-analysis of ITCC/SIOPEN European phase II clinical trials. Pediatr Blood Cancer 2017;64(1):25–31. doi: 10.1002/pbc.26192.

12. Wolfl M., Jungbluth A., Garrido F. et al. Expression of MHC class I, MHC class II, and cancer germline antigens in neuroblastoma. Cancer Immunol Immunother 2005;54(4):400–6. doi: 10.1007/s00262-004- 0603-z.

13. Ladenstein R., Potschger U. , Hartman O. et al.; EBMT Paediatric Working Party. 28 years of high-dose therapy and SCT for neuroblastoma in Europe: lessons from more than 4000 procedures. Bone Marrow Transplant 2008;41 Suppl 2:S118–27. doi: 10.1038/bmt.2008.69.

14. Hale G., Arora M., Ahn K. et al. Allogeneic hematopoietic cell transplantation for neuroblastoma: the CIBMTR experience. Bone Marrow Transplant 2013;48(8):1056– 64. doi: 10.1038/bmt.2012.284.

15. Sivori S., Parolini S., Marcenaro E. et al. Involvement of natural cytotoxicity receptors in human natural killer cell-mediated lysis of neuroblastoma and glioblastoma cell lines. J neuroimmunol 2000;107(2):220–25. PMID: 10854660.

16. Perez-Martinez A., de Prada Vicente I., Fernandez L. et al. Natural killer cells can exert a graft-cs-tumor effect in haploidentical stem cell transplantation for pediatric solid tumors. Exp Hematol 2012;40(11):882–91.e1. doi: 10.1016/j.exphem.2012.07.004.

17. Venstrom J., Zheng J., Noor N. et al. KIR and HLA genotypes are associated with disease progression and survival following autologous hemopoietic stem cell transplantation for high-risk neuroblastoma. Clin Cancer Res 2009;15(23):7330–4. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-09-1720.

18. Erbe A., Wang W., Carmichael L. et al. Neuroblastoma patients’ KIR and KIR-ligand genotypes influence clinical outcome for dinutuximab-based immunotherapy: a report from the Children’s Oncology Group. Clin Cancer Res 2018;24(1):189–96. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-17-1767.

19. Neal Z., Imboden M., Rakhmelevich A. et al. NXS2 murine neuroblastomas express increased levels of MHC class I antigens upon recurrence following NK-dependent immunotherapy. Cancer Immunol Immunother 2004;53(1):41–52. doi: 10.1007/s00262-003- 0435-2.

20. Lang P., Toporskj J., Handgretinger R. et al. Haploidentical stem cell transplantation in children with relapsed neuroblastoma. Bone Marrow Transplant 2009;43(S1):S42. doi: 10.1007/s00262-003-0435-2.

21. Lang P., Illhardt T., Ebinger M. et al. Haploidentical stem cell transplantation and subsequent immunotherapy with antiGD2 antibody for patients with relapsed metastatic neuroblastoma. J Clin Oncol 2015;33(Suppl; abstr. 10056). doi: 10.1007/s00262-003-0435-2.

22. Kanold J., Paillard C., Tchirkov A. et al. NK cell immunotherapy for high-risk neuroblastoma relapse after haploidentical HSCT. Pediatr Blood Cancer 2012;59(4):739–42. doi: 10.1002/pbc.24030.

23. Suzuki M., Kushner B., Kramer K. et al. Anti-GD2 immunotherapy in adults with high-risk neuroblastoma (HR-NB): The Memorial Sloan Kettering Cancer Center (MSKCC) experience. J Clin Oncol 2017;35(15s): abstr. 10550. doi: 10.1007/s00262-003-0435-2.

24. Marachelian A., Shimada H., Sano H. et al. The signifiance of serial histopathology in a residual mass for outcome of intermediate risk stage 3 neuroblastoma. Pediatr Blood Cancer 2012;58(5):675–81. PMID: 22493777.

25. Okamoto Y., Kodama Y., Nishikawa T. et al. Persistent positive metaiodobenzyl-guanidine scans after autologous peripheral blood stem cell transplantation may indicate maturation of stage 4 neuroblastoma. Pediatr Hematol Oncol 2017;34(3):157–64. doi: 10.1080/08880018.2017.1348414.

26. Carpentieri A. , Cozzoli E., Scimeca M. et al. Differentiation of human neuroblas toma cells toward the osteogenic lineage by mTOR inhibitor. Cell Death Dis 2015;6:e1974. doi: 10.1038/cddis.2015.244.

Первая аутологичная гемопоэтическая ТСК при анкилозирующем спондилите: описание случая и ключи к пониманию терапии

Фарге Д., Лабопин М., Тиндалл А., Фассас А., Манкарди Г.Л., Ван Лаар Дж. и др. . Трансплантация аутологичных гемопоэтических стволовых клеток при аутоиммунных заболеваниях: обсервационное исследование, основанное на 12-летнем опыте Рабочей группы по аутоиммунным заболеваниям Европейской группы трансплантации крови и костного мозга. Haematologica 2010; 95 : 284–292.

Артикул Google ученый

Snowden JA, Saccardi R, Allez M, Ardizzone S, Arnold R, Cervera R et al . Гематопоэтическая СКТ при тяжелых аутоиммунных заболеваниях: обновленные рекомендации европейской группы по трансплантации крови и костного мозга. Пересадка костного мозга 2012; 47 : 770–790.

CAS Статья Google ученый

Хьюгл Т., ван Лаар Дж. М..Трансплантация стволовых клеток при ревматических аутоиммунных заболеваниях. Arthritis Res Ther 2008; 10 : 217.

Артикул Google ученый

Jantunen E, Myllykangas-Luosujarvi R, Kaipiainen-Seppanen O, Nousiainen T. Трансплантация аутологичных стволовых клеток пациенту с лимфомой с длительным анкилозирующим спондилитом в анамнезе. Ревматология 2000; 39 : 563–564.

CAS Статья Google ученый

Мамедов И.З., Британова О.В., Болотин Д.А., Чкалина А.В., Староверов Д.Б., Звягин И.В. и др. .Количественное отслеживание клонов Т-клеток после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. EMBO Mol Med 2011; 3 : 201–207.

CAS Статья Google ученый

Мамедов И.З., Британова О.В., Чкалина А.В., Староверов Д.Б., Амосова А.Л., Мишин А.С. и др. . Индивидуальная характеристика стабильно увеличенных клонов Т-клеток у пациентов с анкилозирующим спондилитом. Аутоиммунитет 2009; 42 : 525–536.

CAS Статья Google ученый

Price DA, Brenchley JM, Ruff LE, Betts MR, Hill BJ, Roederer M и др. . Жажда антигена формирует клональное доминирование в популяциях CD8 + Т-клеток, специфичных для устойчивых ДНК-вирусов. J Exp Med 2005; 202 : 1349–1361.

CAS Статья Google ученый

Вентури В., Чин Х.Й., Ашер Т.Э., Ладелл К., Шейнберг П., Борнштейн Е. и др. .Совместное использование бета-цепи TCR в ответах CD8 + Т-клеток человека на цитомегаловирус и EBV. J Immunol 2008; 181 : 7853–7862.

CAS Статья Google ученый

Сан В., Попат Ю., Хаттон Дж., Занг Ю.С., Кранс Р., Каррум Г. и др. . Характеристики репертуара рецепторов Т-клеток и миелин-реактивных Т-клеток, восстановленных из трансплантатов аутологичных гемопоэтических стволовых клеток при рассеянном склерозе. Brain 2004; 127 (Pt 5): 996–1008.

Артикул Google ученый

Мур Дж., Брукс П., Милликен С., Биггс Дж., Ма Д., Гендель М. и др. . Пилотное рандомизированное исследование, сравнивающее трансплантацию отобранных CD34 и необработанных гемопоэтических стволовых клеток при тяжелом, рефрактерном ревматоидном артрите. Arthritis Rheum 2002; 46 : 2301–2309.

CAS Статья Google ученый

Боггаки Т., Ацуми Т., Боггаки М., Фурусаки А., Кондо М., Сато-Мацумура К.С. и др. .Иммунологическое восстановление после трансплантации аутологичных гемопоэтических стволовых клеток у пациентов с системным склерозом: взаимосвязь между клиническими преимуществами и интенсивностью иммуносупрессии. J Rheumatol 2009; 36 : 1240–1248.

CAS Статья Google ученый

Daikeler T, Labopin M, Di Gioia M, Abinun M, Alexander T, Miniati I et al . Вторичные аутоиммунные заболевания, возникающие после ТГСК по поводу аутоиммунного заболевания: ретроспективное исследование Рабочей группы по аутоиммунным заболеваниям EBMT. Кровь 2011; 118 : 1693–1698.

CAS Статья Google ученый

Holmberg LA, Boeckh M, Hooper H, Leisenring W, Rowley S, Heimfeld S et al . Повышенная частота цитомегаловирусной болезни после трансплантации аутологичных CD34-отобранных стволовых клеток периферической крови. Кровь 1999; 94 : 4029–4035.

CAS PubMed Google ученый

Нэш Р.А., Дэнси Р., Сторек Дж., Жорж Г.Э., Боуэн Д.Д., Холмберг Л.А. и др. .Связанное с вирусом Эпштейна-Барра посттрансплантационное лимфопролиферативное заболевание после иммуносупрессивной терапии высокими дозами и трансплантации аутологичных CD34-селективных гемопоэтических стволовых клеток при тяжелых аутоиммунных заболеваниях. Пересадка костного мозга Biol 2003; 9 : 583–591.

Артикул Google ученый

Коно К., Нагафудзи К., Цукамото Х., Хориучи Т., Такасе К., Аоки К. и др. . Инфекционные осложнения у пациентов, получающих аутологичную трансплантацию CD34-отобранных гемопоэтических стволовых клеток по поводу тяжелых аутоиммунных заболеваний. Transpl Infect Dis 2009; 11 : 318–323.

CAS Статья Google ученый

Гёрнер М. , Вандт Х., Шафер-Эккарт К., Биркманн Дж., Дензел Т., Галлмайер ВМ. Использование CD34 + -селектированных PBPC после высокодозной химиотерапии у пациентов с раком груди связано с более длительным периодом выздоровления и увеличением инфекционных осложнений. J Hematother Stem Cell Res 1999; 8 : 387–391.

CAS Статья Google ученый

Шиллер Г.Дж., Вессио Р., Беренсон Дж. Цитомегаловирусная инфекция после трансплантации аутологичных CD34-отобранных клеток-предшественников. Кровь 2000; 96 : 1194

CAS PubMed Google ученый

de Kleer I, Vastert B, Klein M, Teklenburg G, Arkesteijn G, Yung GP et al .Трансплантация аутологичных стволовых клеток для лечения аутоиммунитета индуцирует иммунологическую самотолерантность путем перепрограммирования аутореактивных Т-клеток и восстановления иммунной регуляторной сети CD4 + CD25 +. Кровь 2006; 107 : 1696–1702.

CAS Статья Google ученый

Дубинский А.Н., Бурт Р.К., Мартин Р., Мураро П.А. Клоны Т-клеток, сохраняющиеся в кровотоке после аутологичной гемопоэтической SCT, не обнаруживаются в периферическом трансплантате, выбранном для CD34 +. Пересадка костного мозга 2010; 45 : 325–331.

CAS Статья Google ученый

Muraro PA, Douek DC. Обновление репертуара Т-клеток для остановки аутоиммунной агрессии. Trends Immunol 2006; 27 : 61–67.

CAS Статья Google ученый

ван де Берг П.Дж., Гриффитс С.Дж., Йонг С.Л., Маколей Р., Бемельман Ф.Дж., Джексон С. и др. .Цитомегаловирусная инфекция сокращает длину теломер пула циркулирующих Т-клеток. J Immunol 2010; 184 : 3417–3423.

CAS Статья Google ученый

Планкетт Ф. Дж., Соарес М.В., Аннелс Н., Хислоп А, Айвори К., Лоуделл М и др. . Проточно-цитометрический анализ длины теломер в антиген-специфических CD8 + Т-клетках во время острой инфекции вирусом Эпштейна-Барра. Кровь 2001; 97 : 700–707.

CAS Статья Google ученый

Williams KM, Hakim FT, Gress RE. Восстановление Т-клеточного иммунитета после лимфодеплеции. Семин Иммунол 2007; 19 : 318–330.

CAS Статья Google ученый

Рулофс Х., де Пау Э.С., Цвиндерман А.Х., Опдам С.М., Виллемзе Р., Танке Х.Д. и др. . Гомеостаз длины теломер, а не укорочения теломер после аллогенной трансплантации стволовых клеток периферической крови. Кровь 2003; 101 : 358–362.

CAS Статья Google ученый

Отчет о болезни и ключи к пониманию терапии

препятствует рациональной оптимизации терапевтических подходов для

лечения аутоиммунных заболеваний. Была выдвинута гипотеза, что конкуренция

с быстрой экспансией вирусоспецифичных клонов Т-клеток

ограничивает потенциал повторной экспансии аутоантиген-специфичных клонов

после HSCT.

Наши данные подтверждают эту концепцию, указывая на то, что после

HSCT происходит необратимое «переключение» в изобилии доминантных клонов

. Сообщалось, что хронически активированные клоны Т-клеток

характеризуются укороченными теломерами и выживают при балансе

между старением и стимуляцией, который увеличивает активность теломеразы

21,22

После HSCT массивное истощение вынуждает клетки T

активно пролиферировать в попытке пополнить гомеостатический баланс

23,24

Таким образом, можно предположить, что

истощенных клонов Т-клеток, которые привели к хроническому аутоиммунному соединению am-

, не могут эффективно пролиферировать после HSCT и уступают

экспансии «второго эшелона». из набранных

клонов Т-клеток, которые возникают для борьбы с повстанческими вирусными инфекциями, и

, которые, надеюсь, не включают аутоиммунные специфические особенности. Этот ход событий

хорошо соответствует нынешним представлениям

о функции и старении адаптивного иммунитета и нашим долгосрочным количественным данным

о судьбе основных клонов Т-клеток

после ТГСК.Требуются дальнейшие исследования, которые должны быть выполнены

с использованием когорты пациентов с аутоиммунными заболеваниями, получавшими HSCT, и

количественных NGS репертуаров TCR, сопровождаемых характеристикой длины теломер

и широкой идентификацией специфичности TCR.

КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

БЛАГОДАРНОСТИ

Выражаем благодарность профессору Поддубному Д.А. за ценные предложения и

комментариев к рукописи.Работа поддержана Программой молекулярной и клеточной биологии

РАН, Фондом поддержки российской науки, Фондом фундаментальных исследований

для медицины РАН, Российским фондом фундаментальных исследований (10-04-01771-a

11-04 -12042-оф-м) и Грант Президента РФ для молодых ученых

(МК-575. 2011.4).

Британова О.В.

1,4

, А.Г. Бочкова

2,4

, Д.Б. Староверов

1,4

, Д.А. Федоренко

Д.А. Болотин

, И.З. Мамедов

, М.А. Турчанинова

, Е.В. Путинцева

А.А. Котлобай

, С.Лукьянов

, А.А. Лебедев Ю.Б.

Чудаков Д.М.

Институт биоорганической химии им. Шемякина-Овчинникова РАН,

Москва, Россия;

НИИ ревматологии РАМН, Москва, Россия и

Отделение гематологии и клеточной терапии, Национальный медицинский хирургический центр им. Пирогова

Медико-хирургический центр, Москва, Россия

Эти авторы внесли равный вклад в это Работа.

E-mail: [email protected]

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1 Фарж Д., Лабопин М., Тиндалл А., Фассас А., Манкарди Г.Л. , Ван Лаар Дж и др. Аутологичная трансплантация кроветворных стволовых клеток

при аутоиммунных заболеваниях: обсервационное исследование

, основанное на 12-летнем опыте Европейской группы крови

и Рабочей группы по трансплантации костного мозга по аутоиммунным заболеваниям. Haemato-

logica 2010; 95: 284 – 292.

2 Snowden JA, Saccardi R, Allez M, Ardizzone S, Arnold R, Cervera R et al.

Гематопоэтическая SCT при тяжелых аутоиммунных заболеваниях: обновленные рекомендации европейской группы

по трансплантации крови и костного мозга. Пересадка костного мозга

(электронная публикация перед печатью 17 октября 2011 г .; DOI: 10.138 / bmt.2011.185).

3 Hugle T., van Laar JM. Трансплантация стволовых клеток при ревматических аутоиммунных заболеваниях

. Arthritis Res Ther 2008; 10: 217.

4 Янтунен Э., Мюллюкангас-Луосуярви Р., Кайпиайнен-Сеппанен О., Ноусиайнен Т.

Трансплантация аутологичных стволовых клеток пациенту с лимфомой с длительным анамнезом

анкилозирующего спондилита. Ревматология 2000; 39: 563 – 564.

5 Мамедов И.З., Британова О.В., Болотин Д.А., Чкалина А.В., Староверов Д.Б., Звягин И.В.

и др. Количественное отслеживание клонов Т-клеток после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток

. EMBO Mol Med 2011; 3: 201 – 207.

6 Мамедов И.З., Британова О.В., Чкалина А.В., Староверов Д.Б., Амосова А.Л., Мишин А.С.

и др. Индивидуальная характеристика стабильно увеличенных клонов Т-клеток у пациентов с анкилозирующим спондилитом

.Аутоиммунитет 2009; 42: 525-536.

7 Price DA, Brenchley JM, Ruff LE, Betts MR, Hill BJ, Roederer M et al. Авидность к антигену

формирует клональное доминирование в популяциях CD8 + Т-клеток, специфичных для

персистентных ДНК-вирусов. J Exp Med 2005; 202: 1349 – 1361.

8 Вентури В., Чин Х.Й., Ашер Т.Э., Ладелл К., Шейнберг П., Борнштейн Е. и др. TCR бета-

, разделяющая цепь в ответах CD8 + Т-клеток человека на цитомегаловирус и EBV.

J Immunol 2008; 181: 7853 – 7862.

9 Сан В., Попат Ю., Хаттон Дж., Занг Ю.С., Кранс Р., Каррум Дж. И др. Характеристики

Репертуар рецепторов

Т-клеток и миелин-реактивных Т-клеток, восстановленных из

трансплантатов аутологичных гемопоэтических стволовых клеток при рассеянном склерозе. Brain 2004;

127 (Pt 5): 996 – 1008.

10 Мур Дж., Брукс П., Милликен С., Биггс Дж., Ма Д., Хендель М. и др. Пилотное рандомизированное исследование

, сравнивающее трансплантацию отобранных CD34 и необработанных гемопоэтических стволовых клеток

при тяжелом рефрактерном ревматоидном артрите.Arthritis Rheum 2002;

46: 2301-2309.

11 Боггаки Т., Ацуми Т., Боггаки М., Фурусаки А., Кондо М., Сато-Мацумура К.С. и др.

Иммунологическое восстановление после трансплантации аутологичных гемопоэтических стволовых клеток

у пациентов с системным склерозом: взаимосвязь между

клиническими преимуществами и интенсивностью иммуносупрессии. J Rheumatol 2009; 36:

1240 – 1248.

12 Дайкелер Т., Лабопин М., Ди Джоя М., Абинун М., Александр Т., Миниати I и др.

Вторичные аутоиммунные заболевания, возникающие после ТГСК по поводу аутоиммунного заболевания

: ретроспективное исследование Рабочей группы по аутоиммунным заболеваниям EBMT.

Кровь 2011; 118: 1693 – 1698.

13 Holmberg LA, Boeckh M, Hooper H, Leisenring W, Rowley S, Heimfeld S

et al. Повышенная частота цитомегаловирусной болезни после трансплантации аутологичных

CD34-селективных стволовых клеток периферической крови. Кровь 1999; 94:

4029-4035.

14 Нэш Р.А., Дэнси Р., Сторек Дж., Жорж Г.Е., Боуэн Дж. Д., Холмберг Л.А. и др.Эпштейн-

Связанное с вирусом Барра посттрансплантационное лимфопролиферативное заболевание после иммуносупрессивной терапии высокой дозой

и трансплантации аутологичных CD34-селективных гемопоэтических

стволовых клеток при тяжелых аутоиммунных заболеваниях. Biol Blood Marrow

Трансплантат 2003; 9: 583-591.

15 Коно К., Нагафудзи К., Цукамото Х., Хориучи Т., Такасе К., Аоки К. и др. Инфекционные

осложнения у пациентов, получавших аутологичную трансплантацию CD34-селекционных гемопоэтических

стволовых клеток по поводу тяжелых аутоиммунных заболеваний.Transpl Infect Dis 2009;

11: 318-323.

16 Гернер М., Вандт Х., Шафер-Эккарт К., Биркманн Дж., Дензел Т., Галлмайер В.М. Использование

CD34 + -селектированных PBPC после высокодозной химиотерапии при раке груди у

пациентов связано с более длительным периодом выздоровления и увеличением инфекционных осложнений. J. Hematother Stem Cell Res 1999; 8: 387 – 391.

17 Schiller GJ, Vescio R, Berenson J. Цитомегаловирусная инфекция после трансплантации аутологичных CD34-отобранных клеток-предшественников.Blood 2000; 96: 1194.

18 de Kleer I, Vastert B, Klein M, Teklenburg G, Arkesteijn G, Yung GP et al.

Трансплантация аутологичных стволовых клеток для лечения аутоиммунитета индуцирует иммунологическую

самотолерантность путем перепрограммирования аутореактивных Т-клеток и восстановления

CD4 + CD25 + иммунорегулирующей сети. Кровь 2006; 107: 1696 – 1702.

-48 4-0,5 10 25

0,1

Относительная концентрация клона Т-клеток,

% от всех Т-клеток

Месяцы, установлен ноль времени в качестве даты HSCT

CASSVALGLNYEQYF CASSLSGGAGELFF

CSARGDTGTGYEQYF CASSLGENIQYF

CSVEIWDSSYNEQFF CASTVDSLDTEAFF

CASSLAPGATNEKLFF ГСК

CSARVVPGVQETQYF фиг.1.Судьба основных клонов Т-клеток после ТГСК. Относительные содержания

четырех клонов Т-клеток, которые доминировали до HSCT

(зеленый) и четырех клонов Т-клеток, которые доминировали через 10 месяцев после HSCT

(синий), согласно количественным данным массивного секвенирования, показаны

. Справа показаны аминокислотные последовательности бета CDR3 соответствующих клонов

. CMV-специфический клон CASSLAPGATNEKLFF

и клон, продуцирующий перфорин CASSVALGLNYEQYF, выделены жирным шрифтом.

Письмо редактору

Трансплантация костного мозга (2012), 1-3 и 2012 Macmillan Publishers Limited

Нуклеазы цинковых пальцев для направленного мутагенеза и восстановления мутации при серповидно-клеточной анемии: исследование in-silico

BMC Blood Disord. 2012; 12: 5.

Мисаки Вайенгера

¹ Отделение генетики, геномики и теоретической биологии, Отдел патологии, Школа биомедицинских наук, Колледж медицинских наук, Университет Макерере, почтовый ящик 7072, Кампала , Уганда

¹ Отделение генетики, геномики и теоретической биологии, Отделение патологии, Школа биомедицинских наук, Колледж медицинских наук, Университет Макерере, почтовый ящик 7072, Кампала, Уганда

Автор, отвечающий за переписку.

Поступило 24 июня 2011 г .; Принято 14 мая 2012 г.

Copyright © 2012 Wayengera; лицензиат BioMed Central Ltd. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/2.0), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальная работа процитирована должным образом. Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.

Дополнительные материалы

Дополнительный файл 1 Подробный список 1606 нуклеотидных оснований в гене гемоглобина бета. Этот файл предлагает список в формате FASTA из 1606 нуклеотидных оснований бета-гена гемоглобина (идентичность гена | 3043 |).

GUID: 0080F7BD-BFE3-4621-A418-0CD021666D09

Дополнительный файл 2 Подробный список 57 ZFAs, специфичных для бета-генных последовательностей гемоглобина. В этом файле перечислены 57 ZFA, которые специфически связывают последовательности в гене гемоглобина, бета

GUID: B4B09E53-5156-4C8B-B9F2-33FD7762B60F

Дополнительный файл 3 Подробный список четыре ZFNs, специфичные для последовательностей бета-гена гемоглобина. В этом файле перечислены четыре ZFN, которые специфически связываются и расщепляют последовательности в гемоглобине, бета-ген

GUID: 78DB6752-1963-40DC-BE09-1DD0EAD40D98

Дополнительный файл 4 Подробный список 8954 пар оснований, расположенных в 5 ‘конец гена цепи β ^A . Этот файл предлагает список в формате FASTA из 8 954 п.н., расположенных на 5′-конце гена цепи β ^A. (Ссылочная последовательность NCBI с 51

по 5198951: | NT_009237.18 |)

GUID: DB08ED3B-4B9E-43B6-BADA-1758EB9F8EB9

Дополнительный файл 5 Подробный список пяти пяти ZFN, относящихся к 8,954 bp, расположенному до конца 5 ′ β ^A цепной ген. В этом файле перечислены пятерок ZFN, которые специфически связываются и расщепляют последовательности в пределах 8954 п.н., расположенных на 5′-конце гена цепи β ^A.

GUID: 89C352F0-7A03-4CB9-A5F5-28571DF3A843

Abstract

Общие сведения

Серповидноклеточная болезнь (или просто SCD) – это наследственная гемоглобинопатия, которая в основном распространена среди лиц африканского происхождения. SCD является результатом моногенной (гемоглобин, бета) точечной мутации (замена денина A на гимин T в шестом положении), которая приводит к замене аминокислоты глутаминовой кислоты (E) на валин (V). Ведение ВСС в условиях ограниченных ресурсов носит в основном синдромальный характер, поскольку вариант лечения, предлагаемый трансплантацией костного мозга (ТКМ), является рискованным и недоступным для большинства больных. Несмотря на предыдущие сообщения о репарации и ингибировании гена серповидного бета-глобина и информационных рибонуклеиновых кислот (мРНК), соответственно, в клетках-предшественниках эритроцитов посредством нацеливания на ген с использованием конструкции олигомер-рестрикционного фермента и либо рибозим-, либо РНК-ДНК Химерные олигонуклеотиды (или просто связывание третьей цепи), генная терапия для лечения SCD все еще остается в значительной степени доклинической.После достижений в области мутагенеза и репарации генов-мишеней с помощью технологии цинкового пальца нуклеазы (ZFN) была выдвинута гипотеза, что SCD может быть излечена тем же способом. Таким образом, целью этого исследования было создание базы данных массивов цинковых пальцев (ZFA) и инженерных ZFN, которые соответственно связываются и расщепляются внутри или вокруг определенных последовательностей в гене серповидного гемоглобина, бета (- β ^S).

Методы и результаты

Первые , с использованием полных 1606 последовательностей пар оснований геномной ДНК (п.н.) нормального гена цепи гемоглобина-бета ( β ^A) и ZiFiT-CoDA- Программное обеспечение ZFA, предварительно установленное по умолчанию, было собрано с помощью вычислений 57 трехпальцевых массивов (ZFA), которые специфически связывают 9 последовательностей пар оснований в пределах нормальной цепи гемоглобин-бета. Второй , путем последовательного связывания этих ZFA с эндонуклеазой Flavobacterium okeanokoites Fok I― , четырьмя ZFN с уникальной специфичностью к последовательностям-мишеням> 24 п. н. в контекстных положениях генома 82, 1333, 1334 и Были сконструированы 1413 цепных генов β ^A in-silico . Третий , , локализующий точечную мутацию SCD в геномной контекстуальной позиции -69- 70 -71- bp (положение, соответствующее 6 ^{-му кодону}) цепи β ^A -gene, вдохновил на окончательный дизайн еще пять ZFN, специфичных для целевых последовательностей> 24 п.н. в пределах 8954 п.н., которые геномно соседствуют с 5′-концом гена-цепи β ^A.

Заключение

Этот набор из 57 ZFA и 9 ZFN предлагает нам генотерапевтические предшественники для целевого мутагенеза и репарации мутации или генотипа SCD.

Общие сведения

Серповидно-клеточная анемия (SCD) или серповидно-клеточная анемия (SCA) – это гемоглобинопатия, которая чаще всего встречается у лиц африканского происхождения [1]. SCD возникает в результате единственной точечной мутации (замена основания A денина на T hymine в шестом кодоне: C A G → C T G) гена, кодирующего бета-цепь Молекула гемоглобина [2]. Фенотипическим следствием этой замены является замена аминокислоты глутаминовой кислоты (E) валином (V) [1,2]. Гомозиготная экспрессия этого мутантного генотипа глобина (SS) вызывает SCD, в то время как гетерозиготный генотип (AS) называется «серповидноклеточным признаком» [1,2]. В отличие от случая, наблюдаемого у большинства нормальных взрослых людей, где наиболее распространенным типом гемоглобина (гемоглобин A или Hb A) является тетрамер (который содержит 4 субъединичных белка- α ₂ β ₂ ^A, которые не являются ковалентно связаны вместе), пациенты с SCD имеют тип гемоглобина взрослого с двумя мутантными субъединицами β (называемыми β ^S), называемыми гемоглобином S (или просто Hb S) [3,4].Hb S имеет высокую склонность к кристаллизации в условиях низкого давления кислорода, которое может возникнуть после физического или патологического стресса. В частности, образование внутриклеточных кристаллов S вызывает полимеризацию эритроцитов, снижение поглощения и / или переноса кислорода, а также закупорку мелких кровеносных сосудов [5,6]. В целом, хотя клинический синдром ВСС разнообразен, его отличительной чертой является разрушительная группа из симптомов и признаков , которые вместе известны как «серповидноклеточный кризис» [7,8].Около 200 000 новорожденных в Африке рецессивно наследуют двойной аутосомно-серповидный генотип каждый год – цифра, которая составляет примерно 66,6% детей, рожденных с гемоглобинопатией во всем мире [9]. Ранее проведенные исследования показали, что люди с гетерозиготностью по β ^S (Hb SA) или по серповидно-клеточному признаку защищены от инфекции, вызываемой простейшими малярией [10]. Это, вместе с данными о столь же высокой частоте или обычном распространении серповидно-клеточного признака в малярийном поясе, привело к предположению, что этот признак возник как эволюционная адаптация человека-хозяина к инфицированию плазмодиями [11 ].Медицинское ведение ВСС остается особенно сложной задачей [12]. В частности, несмотря на успехи, достигнутые в лечении ВСС с помощью трансплантации костного мозга [13,14], ресурсоемкий характер этого подхода сделал невозможным доступ наиболее пострадавшего населения Африки. Таким образом, уход за больными (гомозиготные SS) здесь по-прежнему в основном вращается вокруг синдромного лечения с использованием или без агентов, повышающих гемоглобин плода (Hb F) [15]. Здесь явно ищутся улучшения.

В силу своего моногенного, точечно-мутантного происхождения SCD привлекла несколько попыток генной терапии. Например, еще в 1991 г. Shesely ED, et al. [16] описал методику коррекции гена глобина β ^S человека до нормального аллеля β ^A путем гомологичной рекомбинации в линии гибридных клеток мыши и человека BSM с использованием конструкции олигомер-рестрикционный фермент. . В 1998 г. Lans N, et. al. [17,18] сообщил об опосредованной рибозимом делеции и усилении мутации серповидных клеток (β ^S) уровнями гемоглобина плода в эритроцитах.Селективное ингибирование транскриптов бета-глобиновой РНК антисмысловыми молекулами РНК в равной степени было опробовано в качестве стратегии снижения уровней полимеризации Hb S в эритроцитах и симптомов, связанных с SCD [19-21]. Pace BS, et. al. [21] определенно идентифицировал антисмысловые РНК-мишени в гене бета-глобина, отличные от гомологичных областей в гамма-глобине, предполагая, что стратегии генной терапии, сочетающие индукцию гамма-глобина с ингибированием бета-глобина с использованием антисмысловых векторов, могут дать более благоприятные антисмысловые векторы. -септические эффекты длительные.Амосова О. и др. соавт. [22], с другой стороны, сообщил о направленной репарации третьей цепи мутации серповидных клеток с использованием химерных олигонуцеотидов РНК-ДНК (COs) [23,24], достигнутой за счет укорочения линкера псоралена для повышения специфичности образования фотоаддукта в желаемый мутантный сайт остатка Т. Несмотря на эти заметные достижения, место заместительной или репаративной терапии при ВСС остается экспериментальным [25], и пока не сообщалось о каких-либо клинических испытаниях любого из вышеперечисленных подходов на популяциях людей.

Основываясь на последних разработках в области целевого мутагенеза (редактирование генома) и репарации генов с помощью технологии нуклеазы (ZFN) цинкового пальца (ZFN) [26-32], была выдвинута гипотеза, что единственная точечная мутация, ответственная за SCD могут быть отменены с использованием аналогичных подходов. В частности, нуклеазы цинковых пальцев-ZFN, которые представляют собой искусственные гибридные рестрикционные ферменты, созданные путем ковалентного связывания ДНК-связывающего домена цинкового пальца (Zif) (состоящего из трех-шести массивов пальцев) с неспецифическим доменом расщепления ДНК (или просто F _N) эндонуклеазы рестрикции бактерий Flavobacterium okeanokoites , FokI [33]; недавно стали мощным инструментом для редактирования геномов хозяев.После индукции двухцепочечного разрыва (DSB) в ДНК-мишени происходит репарация либо путем гомологичной рекомбинации (HR), либо путем негомологичного соединения концов (NHEJ) [26-32]. Perez et E al . [30] с использованием сконструированных ZFN, нацеленных на CCR5 человека, ранее было продемонстрировано установление устойчивости к ВИЧ-1 в CD4 + Т-клетках посредством образования двухцепочечного разрыва (DSB) в заранее определенных сайтах в кодирующей области CCR5 перед естественной мутацией CCR5D32. Холмс Н. и др. и др. . [31] продемонстрировали контроль ВИЧ-1-инфекции у NSG-мышей, которым трансплантировали человеческие гемопоэтические стволовые клетки / клетки-предшественники, модифицированные нуклеазами цинкового пальца, нацеленными на CCR5.Совсем недавно Wilen CB, et. al. [32] успешно сконструировал ВИЧ-устойчивые CD4 + Т-клетки человека с использованием CXCR4-специфичных нуклеаз цинка на пальцах (ZFN). Это доказательство, наряду с текущими улучшениями в разработке и разработке лентивирусных [33,34] и парвовирусных [35] векторов (LV и PV, соответственно) для доставки гена ex- vivo или in- vivo и трансдукция предшественников эритроидов предполагает, что мутация серповидных клеток может быть устранена в предшественнике эритроидного костного мозга с помощью соответствующих ZFN.Действительно, мы знаем, что Sangamo Biosciences (http://www.sangamo.com/index.html) – одна из ведущих отраслей в технологии ZFN, уже сосредоточила свою технологию редактирования генов с помощью ZFN на предоставлении уникального раствор для лечения моногенных заболеваний, таких как гемофилия и SCA. Однако их ZFA или ZFN публично недоступны.

Таким образом, конкретной целью этого исследования было создание базы данных массивов цинковых пальцев (ZFA) и создание ZFN, которые, соответственно, специфически связываются и расщепляются внутри или вокруг мутации гена серповидного гемоглобина бета (-β ^S).

Методы

Идентификация ZFA и ZFN, специфичных для гена HBB

Это биоинформатическое исследование не проводилось ни в каких экспериментах in vivo или in vitro, и, таким образом, не было запрошено этическое одобрение и согласие от институционального IRB автора.

Дизайн

In-silico informatics

Материалы и программное обеспечение

Формат FASTA нуклеотидных последовательностей всего бета-гена гемоглобина (предоставлен в Дополнительном файле 1; регистрационный номер NCBI в конце) и цинка -Finger Nuclease – программное обеспечение Консорциума CoDA-ZiFiT-ZFA и CoDA-ZiFiT-ZFN [36,37] (URL-ссылку см. В разделе программного обеспечения и доступности).

Вмешательства

Формат FASTA нуклеотидных последовательностей гена гемоблобина, бета вводился отдельно в пользовательские интерфейсы CoDA-ZiFiT-ZFA и CoDA-ZiFiT-ZFN, оба из которых были предварительно установлены по умолчанию, с для последнего выбран спейсер-вариант размером 5–9 п.н.

Измеряемые переменные

Списки ZFA и ZFN, включая графические карты их действия в геномном контексте HB, beta, были созданы в соответствии с пользовательским протоколом [36,37]. Другой массив из пяти ZFN, специфичных к последовательностям-мишеням> 24 п.н. в пределах 8 954 п.н., прилегающих к 5′-концу гена-цепи β ^A; также был спроектирован.

Результаты

Массивы цинковых пальцев (ZFA), нацеленные на гемоглобин, бета (β

^A) генные последовательности
Первый , с использованием 1606 последовательностей пар нуклеотидных оснований (включая интроны), кодирующих нормальный гемоглобин- бета (β ^A) ген цепи ( см. Дополнительный файл 1) и программное обеспечение ZiFiT-CoDA-ZFA [36,37], предустановленное по умолчанию, 57 трехпальцевых массивов (ZFA), которые специфически связывают 9 пар оснований (п.о.) последовательности в пределах нормальной цепи гемоглобин-бета ( см. дополнительный файл 2) были собраны с помощью вычислений.В целом, было связывание ZFA в пределах первых 3/5 и последней 1/5 контекстуальных bp-последовательностей генома в 5′- и 3′-областях гена HB, beta (рисунок). Цинковые пальцы (Zif или ZF), такие как пальцы, специфичные для геномных нуклеотидных последовательностей HBB-гена (представлены в дополнительном файле 1), представляют собой белковые мотивы, способные к целенаправленному связыванию с ДНК [26-32]. Каждый отдельный цинковый палец обычно распознает три нуклеотидных основания, но многие цинковые пальцы могут быть объединены для создания массива, способного, как в случае перечисленных нами ZFA из трех пальцев, распознавать девять нуклеотидов [36,37].Остатки от -1 до 6 (пронумерованные относительно начала) альфа-спирали ZFA отвечают за специфическое распознавание триплетов последовательностей ДНК за счет образования специфичных для оснований контактов в большой бороздке двухцепочечной целевой ДНК. (см. Дополнительный файл 2) [26-32,36,37]. Следовательно, остатки от -1 до 6 в альфа-спиралях ZFs обозначены как остатки «узнавания» и перечислены в направлении от N- к C-концу; в то время как все остальные остатки в ZF называются «основной цепью» [36,37].Как следствие, последовательности узнавания ZFA связывают сайты ДНК-мишени через аминокислоты от -1 до 6 альфа-спирали «узнавания» в направлении от 3 ‘ до 5′ . Вышеупомянутый обратный паттерн распознавания и связывания целевой ДНК может сбивать с толку, поскольку целевой сайт ДНК всегда упоминается в направлении от 5 ‘ до 3′ , тогда как аминокислотные последовательности относятся от N к C конец. В этом разделе были собраны ZFA, которые способны расщепляться в локусах, расположенных внутри и рядом с 6 ^th или мутантным кодоном серповидного гемоглобина, гена бета (β S ), который локализован в контекстуальных положениях генома – 69- 70 -71- bp (показаны цветами, курсивом или жирным шрифтом в Дополнительном файле 1 и Дополнительном файле 2: одна обратная или левая альфа-спираль ZFA связывается в позиции 51/41, и две прямые или правые альфа-спирали ZFA связываются в позиции 70 /80 и 73/83 соответственно). ZFA могут быть рекомбинантно помечены неспецифической нуклеазой in vivo , процесс, который делает неспецифическую нуклеазу специфичной для сайтов связывания ZFA [38].
Схема сайтов связывания ZFA-мишени в гемоглобине, бета-ген. На этом рисунке графически показаны сайты связывания ZFA 57 , которые специфически нацелены на последовательности в геномном контексте бета-гена гемоглобина. Попадания (синие, зеленые и золотые полосы) представляют собой цели вдоль гена (красные полосы).Попадания ZFA на графике имеют цветовую кодировку в зависимости от размера разделителя (5 точек = синий; 6 точек = зеленый; 7 точек = золотой).
Нуклеазы цинковых пальцев (ZFN), нацеленные на гемоглобин, последовательности гена бета (β
^A)
Второй , путем последовательного связывания этих ZFA с Flavobacterium okeanokoites эндонуклеазой Fok I типа IG, класс IIS как и др., , др., . [38] ранее получено in vitro: ; четыре ZFN с уникальной специфичностью к последовательностям-мишеням> 24 п. н. в контекстных положениях генома 82, 1333, 1334 и 1413 гена цепи ^A были сконструированы in-silico ( см. Дополнительный файл 3 и рисунок соответственно).На протяжении последних экспериментов описание спейсерных областей поддерживалось на уровне 5-7 пар оснований. Каждый конкретный ZFN имеет левый и правый альфа-спиральный сайт «узнавания», связанный с Fok I ( см. Таблицу ). Следовательно, эти ZFN связываются со своей мишенью гемоглобина размером> 18 п.н., сайтами ДНК бета-гена в виде димеров, причем каждый мономер использует свой домен цинкового пальца для распознавания «полусайта» целевой последовательности ДНК. In vivo , димеризация ZFN опосредуется доменом расщепления FokI посредством расщепления «спейсерной» последовательности из пяти или шести пар оснований, которая разделяет два инвертированных «полусайта»-мишени [26-32].Важно отметить, что, поскольку специфичность связывания ДНК доменов цинкового пальца может быть изменена с использованием различных методов, индивидуализированные ZFN могут, в принципе, быть сконструированы так, чтобы специфично воздействовать практически на любую последовательность гена [37]. Список из трех ZFN, включая их от -1 до 6 альфа-спиральных нуклеотидсвязывающих доменов (F1, F2, F3 / F3, F2, F1) вместе с соответствующей сайт-специфической последовательностью в геномном контексте бета-гена гемоглобина, представляет собой представлены в табл. Графический анализ паттерна расщепления в гене HB, beta, индуцированного четырьмя идентифицированными ZFN, показал, что один из них расщепляется на 5′-конце (положение 82/106), в то время как другие три расщепляются на 3 ′ конец (позиции 1,333 / 1,359, 1,334 / 1,359 и 1,413 / 1,439 соответственно) (см. Рисунок).
Схема сайтов расщепления ZFN в гемоглобине, бета-ген. Этот рисунок графически иллюстрирует сайты расщепления четырех целевых последовательностей ZFN в контексте генома человека бета-гена гемоглобина. Попадания (синие, зеленые и золотые полосы) представляют собой цели вдоль гена (красные полосы). Попадания ZFN на графике имеют цветовую кодировку в зависимости от размера разделителя (5 пп = синий; 6 пп = зеленый; 7 пп = золотой).
Таблица 1
Нацеливание и расщепление ZFN внутри гемоглобина, бета ( β ^A ) -ген
910N -1
Нуклеаза цинкового пальца 910 Zinc Finger Nuc1 Fn; триплет-α-Helix Right Fn; триплет-α-Helix
– нацеленный на HBB ( β ^A ) -ДНК на 5 ‘сайтах
5 ′ _ 82 cCGTTACTGCCCTGT GGGGCAAGG t 106_ ′ 3
F1; RNITLVR; ( ACG )
F1; РНЕХЛКВ; ( AGG )
5 ′ _ 82 г GCAATGACG GGACACCCCGTTCCa 106_ ′ 3
F2; QRSSLVR; ( GTA )
F2; QSTTLKR; ( GCA )
F3; QDNTLRR; ( GCA )
F3; RTEHLAR; ( GGG )
– нацеливание на HBB ( β ^A ) -ДНК на 3 ‘сайтах
N-
5 ′ _ 1333 cTTCCTCCCACAGCTCC TGGGCAACG t 1359_ ′ 3
F1; QASNLLR; ( GAA )
F1; RSQTLAQ; ( ACG )
5 ′ _ 1333 г AAGGAGGGT GTCGAGGACCCGTTGCa 1359_ ′ 3
F2; RQDNLGR; ( GAG )
F2; QSTTLKR; ( GCA )
F3; RMDHLAG; ( TGG )
F3; РСДХЛСЛ; ( TGG )
ZFN-unknown-SP-6-1
5 ′ _ 1334 tTCCTCCCACGGCTCC 1334 tTCCTCCCACGGCTCC 43 F1; RTDRLIR; ( GGA )
F1; RSQTLAQ; ( ACG )
5 ′ _ 1334 a AGGAGGGTG TCGAGGACCCGTTGCa 1359_ ′ 3
F2; QSAHLKR; ( GGA )
F2; QSTTLKR; ( GCA )
F3; RNTALQH; ( GTG ) F3; РСДХЛСЛ; ( TGG )
Нуклеазы цинковых пальцев (ZFN), нацеленные на соседние 8954 п.
н. с 5′-концом β-гена ^A
Третий , локализуя точечную мутацию SCD в контекстуальной позиции генома -69- 70 -71- пар оснований используемых последовательностей гена β ^A (то есть в пределах 6 ^{-го кодона} гена: выделено зеленым курсивом в дополнительном файле 1 ), создание другого массива из пяти ZFN, специфичных для целевых последовательностей> 18 п.н. в пределах 8 954 п.н. от 5′-конца гена цепи β ^A ( см. Дополнительный файл 4 для 8954 п.н. 5′-конец гена цепи β, ^A,; и Дополнительный файл 5 для расщепления ZFN здесь) был вдохновлен.Два расщепления ZFN, наиболее близкие к 5′-концу цепи-гена β ^A, показаны в таблице. Графическое резюме распределения паттернов расщепления в нем показано на рисунке.
Таблица 2
Нацеливание и расщепление ZFN в прилегающих 8954 п.н. к 5′-концу гемоглобина, бета ( β ^A ) -ген
Zinc Нуклеаза пальца (ZFN) Left Fn; триплет-α-Helix Right Fn; триплет-α-Спираль
ZFN-unknown-SP-6-1
5 ′ _ 4231 aGCCACCAC56 TAG_0652 4231 aGCCACCACCTTC_ 4231 aGCCACCACCTTC2
F1; ВПСКЛКР; ( GGC )
F1; DPSTLRR; ( GCC )
5 ′ _ 4231 т CGGTGGTGG AAGA CTATCCGTCGGa 4256_ ′ 3
F2; EAHHLSR; ( GGT )
F2; QSTTLKR; ( GCA )
F3; ИРХХЛКР; ( GGT )
F3; RRDGLAG; ( TAG )
ZFN-unknown-SP-6-2
5 ′ _ 4234 cACCACCTTC1_TGAT 910 4234 cACCACCTTC1_TGAT 9 AGTGAT F1; МХХЛАР; ( GGT )
F1; РГРНЛЕМ; ( TGC )
5 ′ _ 4234 г TGGTGGAAG A CTATCCGTCGGACGt 4259_ ′ 3
F2; EAHHLSR; ( GGT )
F2; DSSVLRR; ( GCC )
F3; QDGNLTR; ( GAA ) F3; QGGTLRR; ( GCA )
Схема сайтов расщепления ZFN в пределах 8954 п. н., прилегающих к 5′-концу бета-гена гемоглобина. Этот рисунок графически иллюстрирует сайты расщепления пяти целевых последовательностей ZFN в пределах 8954 п.н., расположенных на 5′-конце гена цепи β ^A. Два из расщепляющихся ZFN, ближайших к 5′-концу цепи-гена β ^A, показаны в таблице. Попадания (синие, зеленые и золотые полосы) представляют собой цели вдоль гена (красные полосы). Попадания ZFN на графике имеют цветовую кодировку в зависимости от размера разделителя (5 пп = синий; 6 пп = зеленый; 7 пп = золотой).
Обсуждение и выводы
Я представляю здесь новый набор из 57 массивов цинковых пальцев (ZFA) и 9 нуклеаз цинковых пальцев (ZFN), которые представляют собой генно-терапевтические предшественники для целевого мутагенеза и восстановления Мутация или генотип SCD.В частности, хотя SCD является результатом моногенной (гемоглобин, бета) точечной мутации (замены A на T), которая привлекла широкий интерес для целевой генной терапии [16-25], место для терапии замещения или восстановления генов при SCD остается экспериментальным [25], и о каких-либо клинических испытаниях любого из вышеперечисленных подходов на людях еще не сообщалось. Основываясь на последних разработках в области направленного мутагенеза (редактирование генома) и репарации генов с помощью технологии нуклеазы цинкового пальца (ZFN) [26-32], была выдвинута гипотеза, что единственная точечная мутация, ответственная за SCD, может быть отменено с использованием аналогичных подходов.С этой целью мы стремились создать базу данных массивов цинковых пальцев (ZFA) и сконструировать ZFN, которые специфически связываются и расщепляются внутри или вокруг серповидного гемоглобина, бета (- β ^S) гена. Теперь мы представляем базу данных из 57 ZFA (см. Дополнительный файл 2 и рисунок), специфичных для гена β ^A (см. , дополнительный файл 1 для геномных контекстных последовательностей). Используя эти ZFA, мы также сконструировали четыре ZFN (показаны в дополнительном файле 3 и на рисунке), специфически расщепляющихся внутри одного и того же гена β, , ^,. Три из этих четыре ZFN показаны в таблице. Поскольку точечная мутация SCD расположена в контекстуальной позиции генома -69- 70 -71- bp из β ^A используемых последовательностей гена цепи (то есть в пределах 6 ^{-го кодона} гена ), мы были в равной степени вдохновлены на создание другого массива из пяти ZFN (показанных в дополнительном файле 5), специфичных для целевых последовательностей> 24 п.н. в пределах 8954 п.н. до 5′-конца цепи β ^A – ген ( см. Дополнительный файл 4 для 8 954 п.н., локализованных на 5′-конце цепи-гена β ^A).Два расщепления ZFN в этих пределах – 8 954 п.н., но наиболее близкие к 5′-концу цепи-гена β ^A, показаны в таблице, а на рисунке представлено графическое резюме их распределения.
Вышеупомянутые ZFA и ZFN могут применяться для целевого мутагенеза или репарации мутации серповидных клеток различными способами. Во-первых, , сплайсинг всей области генома, расположенной между положениями 5′-82/106 и 3 ‘ – 1,333 / 1,359 или – 1,334 / 1,359 гена глобина β ^S может быть достигается с использованием ZFN, показанных в таблице. Одно только это, когда за ним следует процесс негомологичного соединения концов (NHEJ) [26-32] краев остаточного двухцепочечного разрыва ДНК (DSB), может привести к делеции более 80% п.н.-последовательностей дефектных β ^S глобиновый ген. В зависимости от эффективности доставки гена и трансдукции, достигаемой векторами [34,35], используемыми в предшественниках эритроидов, , следовательно, , эта стратегия сама по себе предлагает возможность снижения внутриклеточного ( или зрелых эритроцитов, эритроцитов). или эритроидный предшественник) экспрессия гена глобина β ^S и, в конечном итоге, уменьшение симптоматики, возникающей в результате S-полимеризации.Обратите внимание на то, что, поскольку этот подход не включает делецию точечной мутации SCD, которая расположена в контекстуальной позиции генома -69- 70 -71- bp из β ^A использованных последовательностей гена цепи (то есть, в пределах 6 ^{-го кодона} гена), это только средство функционально необратимой инактивации гена глобина β ^S. Таким образом, в качестве второго варианта другой вариант может быть нацелен на удаление 5′-области перед положением -82/106 гена глобина β ^S, который содержит точечную мутацию SCD.Это может быть достигнуто с использованием ZFN в таблице, который расщепляется в положении 82/106, и любого из двух ZFN в таблице, которые расщепляются в пределах 8 954 п.н., локализованных на 5′-конце гена цепи β ^A. В качестве альтернативы, однако, вторичные терапевтические события, включая, скажем, (i) либо репарацию сайта расщепления целевого гена глобина β ^S посредством , либо рекрутирование пути гомологичной рекомбинации (HR ) путем обеспечения нормального, не- мутант β матрица гена глобина для репарации сплайсированной «мутантной (вызывающей заболевание)» области [26-32,36,37] (ii) или дополнительной замены этого патогенного сплайсона на соответствующий 5′-экзон γ-глобина аналогично Lans N, et. al. [17] и Weatherall DJ. [18] сделали с 3′-экзоном, можно поискать. Pace BS, et. al. [21] предположил, что стратегии генной терапии, которые сочетают индукцию гамма-глобина с ингибированием бета-глобина, могут давать более благоприятные эффекты против серповидного синдрома в долгосрочной перспективе. Наконец, , возможно, полностью новые генные терапевтические стратегии, разработанные в будущем, могут в равной степени исследовать механизмы связывания ДНК-мишени, присущие нашим ZFA или ZFN, для восстановления мутантного кодона глобинового гена β ^S.
В нашем исследовании представлен ряд ограничений, которые необходимо учитывать. Во-первых, , важно отметить, что работа ограничивается только анализом последовательностей и не сопровождается in-vitro, доказательством концептуальных исследований. Это следует отнести к очевидным ограниченным ресурсам нашей лаборатории, хотя это может быть подтверждено тем фактом, что именно эти методы [36,37] ранее использовались для успешной сборки ZFA и разработки ZFN, которые экспериментально безопасны и эффективны. [26-32].Тем не менее, крайне важно, чтобы была включена дополнительная оптимизация, включая, скажем: (i) модульный анализ и сборку [39], чтобы добавить один, два или даже три других ZFA к нашим в настоящее время 3 массивам пальцев, чтобы повысить специфичность и избежать токсичность нецелевого генома хозяина; и (ii) сборка in vivo и тестирование на эффективность, например, с использованием системы с одним гибридом бактерий (B1H) или дрожжевым моногибридом (Y1B) для дальнейшего информирования о лучших ZFN для использования [40]. Также возможны модификации домена расщепления с целью создания гибрида, способного функционально опрашивать интерфейс димера ZFN, чтобы предотвратить гомодимеризацию, в то же время увеличивая эффективность расщепления [41]. Во-вторых, еще требуется дополнительных доклинических экспериментов с использованием либо моделей гуманизированных мышей [16], либо клеток-предшественников эритроидов, чтобы оценить эффективность и безопасность этих ZFNs и их векторов-трансдукторов [34,35,42]. Возможно, те эксперименты, которые Wilen CB, et al. [32], недавно проведенного для оценки безопасности и эффективности вектора Ad5 / F35, несущего CXCR4-специфические нуклеазы цинка-пальца, которые они использовали для конструирования ВИЧ-устойчивых CD4 + Т-клеток человека, может оказаться достаточным.В частности, важно (i) сравнить профили генома и гемоглобин, профили последовательностей бета-гена целевых предшественников эритроидов и (ii) оценить биофизические профили мутагенного или репаративного продукта, предположительно взрослого гемоблогина (HB β ^{S → A}), включая анализ его кристаллической структуры (см. Рисунок для кристаллической структуры нормального взрослого гемоглобина A) [43-45] В-третьих, разумно задаться вопросом, каким образом лентивирусные или парвовирусные векторы несут и диплоидная (или парная) копия этих ZFN будет использоваться в клиниках в условиях ограниченных ресурсов, где SCD наиболее распространена [25,46].Наша трансляционная проекция или предложение состоит в том, чтобы попытаться осуществить это посредством доставки и трансдукции гена in-vivo, , а не с помощью дорогостоящих манипуляций ex-vivo и . Следовательно, подкожные, внутривенные или внутрикостные пути инъекции или инфузии для in-vivo использования этих векторов в качестве менее трудоемкой и доступной альтернативы доставки генов и трансдукции манипуляциям ex-vivo должны серьезно следует рассматривать и опробовать, несмотря на доказательства низкой эффективности доставки и трансдукции генов, предлагаемых маршрутами in vivo по сравнению с доставкой гена ex-vivo [34,35]. Четвертый , недавно было обнаружено, что нуклеазы цинковых пальцев, нацеленные на гены-хозяева, расщепляют локусы вне мишеней [47], и эти нецелевые локусы, хотя и минимизированы за счет снижения энергии связывания ZFN, не могут быть предсказаны методами in-silico. [48].
Кристаллическая структура взрослого гемогблонина, A. Этот рисунок детализирует кристаллическую структуру взрослого гемогблонина, A, депонированного Сильвой М.М., Роджерсом PH и Арноном А [43].
В заключение, этот набор из 57 массивов цинковых пальцев (ZFA) и 9 нуклеаз цинковых пальцев (ZFN) – предлагает нам генно-терапевтические прекурсоры для целевого мутагенеза и восстановления мутации или генотипа SCD. В частности, то же самое можно использовать для того, чтобы либо функционально, , либо структурно аннулировали глобиновый ген β ^S. Альтернативно, возможна дополнительная замена этого патогенного сплайсона на соответствующий 5′-экзон γ-глобина. Наконец, новые стратегии генной терапии, разработанные в будущем, могут в равной степени исследовать механизмы связывания и расщепления ДНК-мишени, присущие нашим ZFA или ZFN, для замены или восстановления мутантного кодона глобинового гена β ^S.
Конкурирующие интересы
Конкурирующие интересы отсутствуют.
Вклад авторов
WM придумал идею для этой статьи, спроектировал и провел эксперименты и написал MS.
Номера доступа
Идентичность гена NCBI бета-гена гемоглобина составляет | 3043 |; тогда как ссылка NCBI для области 8,95 kb от основания 51
до 5198951 – | NT_009237.18 |
Дополнительные материалы
Дополнительный файл 1:
Подробный список 1606 нуклеотидных оснований в гене гемоглобина бета. Этот файл предлагает список в формате FASTA из 1606 нуклеотидных оснований бета-гена гемоглобина (идентичность гена | 3043 |).
Дополнительный файл 2:
Подробный список 57 ZFAs, специфичных для последовательностей бета-гена гемоглобина. В этом файле перечислены 57 ZFA, которые специфически связываются с последовательностями в пределах гена гемоглобина, бета
Дополнительный файл 3:
Подробный список четырех ZFN, специфичных к последовательностям бета-гена гемоглобина . В этом файле перечислены четыре ZFN, которые специфически связываются и расщепляют последовательности внутри бета-гена гемоглобина
Дополнительный файл 4:
Подробный список 8954 п.н., расположенных на 5′-конце β ^А цепной ген. Этот файл предлагает список в формате FASTA из 8 954 п.н., расположенных на 5′-конце гена цепи β ^A. (Ссылочная последовательность NCBI с 51
по 5198951: | NT_009237.18 |)
Дополнительный файл 5:
Подробный список пяти ZFN, специфичных для 8,954 п.н., расположенных на 5′-конце β ^A A цепной ген. В этом файле перечислены пятерок ZFN, которые специфически связываются и расщепляют последовательности в пределах 8954 п.н., расположенных на 5′-конце гена цепи β ^A.
Благодарности
WM поддерживается грантом номер 5R24TW008886 OGAC, NIH и HRSA.Авторы несут полную ответственность за содержание этого документа, и оно не обязательно отражает официальную точку зрения вспомогательных офисов.
Ссылки
Баллас С. К., Льюис К.Н., Ноун А.М., Краснов С.Х., Камарулзаман Э., Бурка Э.Р. Клинические, гематологические и биохимические особенности заболевания Hb SC. Am J Hemat. 1982; 13: 37–51. DOI: 10.1002 / ajh.2830130106. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Blouin M-J, Beauchemin H, Wright A, De Paepe M, Sorette M, Bleau A-M, Nakamoto B, Ou C-N, Stamatoyannopoulos G, Trudel M.Генетическая коррекция серповидно-клеточной анемии: идеи с использованием моделей трансгенных мышей. Nature Med. 2000. 6: 177–182. DOI: 10,1038 / 72279. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Herrick JB. Своеобразные удлиненные и серповидные красные кровяные тельца при тяжелой анемии. Arch Intern Med. 1910; 6: 517–521. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Hebbel RP. Адгезивные взаимодействия серповидных эритроцитов с эндотелием. J Clin Invest. 1997; 99: 2561–2564. DOI: 10,1172 / JCI119442.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Эшли-Кох А., Мерфи С.К., Хури М. Дж., Бойл, Калифорния. Вклад серповидноклеточной анемии в возникновение нарушений развития: популяционное исследование. Genet Med. 2001; 3: 181–186. DOI: 10.1097 / 00125817-200105000-00006. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Rees DC, Williams TN, Gladwin MT. Серповидно-клеточная анемия. Ланцет. 2010; 376: 2018–2031. DOI: 10.1016 / S0140-6736 (10) 61029-X. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Геллер А.К., О’Коннор М.К.Кризис серповидноклеточной анемии: дилемма в облегчении боли. Mayo Clin Proc. 2008. 83 (3): 320–323. DOI: 10.4065 / 83.3.320. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Dunlop RJ, Bennett KC. Обезболивание при серповидно-клеточной анемии. Кокрановская база данных Syst Rev.2006; 19 (2): CD003350. [PubMed] [Google Scholar]
Сержант Г.Р. Смертность от серповидно-клеточной анемии в Африке. BMJ. 2005. 330 (7489): 432–433. DOI: 10.1136 / bmj.330.7489.432. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Friedman MJ, Trager W. Биохимия устойчивости к малярии. Sci Am. 1981. 244 (3): 154–164. DOI: 10.1038 / Scientificamerican0381-154. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Chui DHK. THAL для THAL? Кровь. 2007. 110 (8): 2788–2789. [Google Scholar]
Луццатто Л., Гудфеллоу П. Серповидно-клеточная анемия: простое заболевание, которое не вылечить. Природа. 1989; 337: 17–18. DOI: 10.1038 / 337017a0. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Уолтерс М.К., Пейшенс М., Лейзенринг В., Экман Дж. Р., Скотт Дж. П., Ментцер В. К., Дэвис С. К., Охене-Фремпонг К., Бернаудин Ф., Мэтьюз Д. К., Сторб Р., Салливан К. М..Трансплантация костного мозга при серповидно-клеточной анемии. N Engl J Med. 1996. 335 (6): 369–376. DOI: 10.1056 / NEJM1983350601. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Уолтерс М.С., Сторб Р., Пейшенс М., Лейзенринг В., Тейлор Т., Сандерс Дж. Э., Бьюкенен Дж. Р., Роджерс З. Р., Динндорф П., Дэвис С. К., Робертс И. А., Дикерхофф Р., Йегер А. М. , Hsu L, Kurtzberg J, Ohene-Frempong K, Bunin N, Bernaudin F, Wong WY, Scott JP, Margolis D, Vichinsky E, Wall DA, Wayne AS, Pegelow C, Redding-Lallinger R, Wiley J, Klemperer M, Ментцер У. С., Смит Ф.О., Салливан К.М.Влияние трансплантации костного мозга на симптоматическую серповидно-клеточную анемию: промежуточный отчет. Многоцентровое исследование трансплантации костного мозга при серповидно-клеточной анемии. Кровь. 2000; 95 (6): 1918–1924. [PubMed] [Google Scholar]
де Монталамбер М. Лечение серповидно-клеточной анемии. BMJ. 2008; 337: а1397. DOI: 10.1136 / bmj.a1397. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Shesely EG, KiM H-K, Shehee RW, Papayannopoulou N, Smithies O, Popovicht BW. Коррекция гена βS-глобина человека путем нацеливания на ген.Proc Natl Acad Sci USA. 1991; 88: 4294–4298. DOI: 10.1073 / pnas.88.10.4294. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Lan N, Howrey RP, Lee SW, Smith CA, Sullenger BA. Рибозим-опосредованная репарация мРНК серповидного бета-глобина в предшественниках эритроцитов. Наука. 1998. 280 (5369): 1593–1596. DOI: 10.1126 / science.280.5369.1593. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Weatherall DJ. Генная терапия: лечение нарушений гемоглобина с помощью рибозимов. Curr Biol. 1998; 8 (19): R696 – R698.DOI: 10.1016 / S0960-9822 (98) 70439-7. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Алами Р., Гилман Дж. Г., Фэн Ю. К., Марморато А., Рохлин И., Сузука С. М., Фабри М. Е., Нагель Р. Л., Бухассира Э. Э. Анти-бета s-рибозим снижает уровни мРНК бета s у трансгенных мышей: потенциальное применение в генной терапии серповидно-клеточной анемии. Blood Cells Mol Dis. 1999. 25 (2): 110–119. DOI: 10.1006 / bcmd.1999.0235. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Сюй Л., Ферри А.Е., Монтейро С., Пейс Б.С. Ингибирование гена бета-глобина транскриптами антисмысловой РНК.Gene Ther. 2000. 7 (5): 438–444. DOI: 10,1038 / sj.gt.3301106. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Pace BS, Qian X, Ofori-Acquah SF. Селективное ингибирование транскриптов РНК бета-глобина антисмысловыми молекулами РНК. Cell Mol Biol (Noisy-le-grand) 2004; 50 (1): 43–51. [PubMed] [Google Scholar]
Амосова О. , Бройтман С.Л., Фреско мл. Исправление мутации серповидных клеток. II. Влияние длины линкера псоралена на специфичность образования и выход фотопродуктов, направленных на третью цепь с мутантной последовательностью-мишенью.Исследования нуклеиновых кислот. 2003. 31 (16): 4673–4681. DOI: 10,1093 / нар / gkg659. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Kmiec EB. Целенаправленная репарация генов. Генная терапия. 1999; 6 (1): 1–3. DOI: 10.1038 / sj.gt.3300789. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Луи Л., Райс М.К., Кмиц Э.Б. Восстановление гена in vivo точечных мутаций и мутаций сдвига рамки считывания, направленное химерными олигонуклеотидами РНК / ДНК и модифицированными одноцепочечными олигонуклеотидами. Nucleic Acids Res. 2001. 29 (20): 4238–4250. DOI: 10.1093 / нар / 29.20.4238. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Вайенгера М. Трансплантация костного мозга (BMT) и генная заместительная терапия (GRT) при серповидно-клеточной анемии. Niger J Med. 2008. 17 (3): 251–256. [PubMed] [Google Scholar]
Урнов Ф.Д., Ребар Э.Дж., Холмс М.С., Чжан Х.С., Грегори П.Д. Редактирование генома с помощью сконструированных нуклеаз цинковых пальцев. Nat Rev Genet. 2010. 11 (9): 636–646. DOI: 10,1038 / NRG2842. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Cathomen T, Joung JK.Нуклеазы «цинковые пальцы»: появляется следующее поколение. Mol Ther. 2008. 16 (7): 1200–1207. DOI: 10.1038 / MT.2008.114. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Гуо Дж., Гай Т., Барбас С.Ф. Направленная эволюция расширенного и высокоэффективного домена расщепления FokI для нуклеаз цинковых пальцев. Журнал молекулярной биологии. 2010; 400 (1): 96. DOI: 10.1016 / j.jmb.2010.04.060. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Durai S, Mani M, Kandavelou K, Wu J, Porteus MH, Chandrasegaran S.Нуклеазы цинковых пальцев: специально разработанные молекулярные ножницы для геномной инженерии клеток растений и млекопитающих. Nucl Acids Res. 2005. 33 (18): 5978–5990. DOI: 10.1093 / nar / gki912. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Porteus MH, Кэрролл Д. Нацеливание на ген с помощью нуклеаз цинкового пальца. Nat Biotechnol. 2005. 23 (8): 967–973. DOI: 10,1038 / NBT1125. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Perez E, Wang J, Miller JC, Jouvenot Y, Kim KA, Liu O, Wang N, Lee G, Bartsevich VV, Lee YL, Guschin DY, Rupniewski I., Waite AJ , Карпенито К., Кэрролл Р., Оранж Дж. С., Урнов Ф. Д., Ребар Э. Дж., Андо Д., Грегори П. Д., Райли Дж. Л., Холмс М.С., июнь CH.Установление устойчивости к ВИЧ-1 в CD4 + Т-клетках путем редактирования генома с помощью нуклеаз цинкового пальца. Nat Biotechnol. 2008. 26 (7): 808–816. DOI: 10,1038 / НБТ1410. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Holt N, Wang J, Kim K, Friedman G, Wang X, Taupin V, Crooks GM, Kohn DB, Gregory PD, Holmes MC, Cannon PM. Гемопоэтические стволовые клетки / клетки-предшественники, модифицированные нуклеазами из цинковых пальцев, нацеленными на CCR5, контролируют ВИЧ-1 in vivo. Nat Biotechnol. 2010. 28 (8): 839–847. DOI: 10,1038 / НБТ.1663. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Wilen CB, Wang J, Tilton JC, Miller JC, Kim KA, Rebar EJ, Sherrill-Mix SA, Patro SC, Secreto AJ, Jordan APO1 , Ли Дж., Кан Дж., Ай П.П., Баннелл Б.А., Лакнер А.А., Хокси Дж. А., Данет-Деснойерс Г.А., Бушман Ф. Д., Райли Дж. Л., Грегори П. Д., Джун СН, Холмс М.С., Домс РМ. Разработка ВИЧ-устойчивых CD4 + Т-клеток человека с помощью CXCR4-специфичных нуклеаз цинка на пальцах. PLoS Pathog. 2011; 7 (4): e1002020. DOI: 10.1371 / journal.ppat.1002020. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Cavazzana-Calvo M, Payen E, Negre O, Wang G, Hehir K, Fusil F, Down J, Denaro M, Brady T, Westerman K, Cavallesco R, Gillet-Legrand B, Caccavelli L, Sgarra R, Maouche-Chrétien L, Bernaudin F, Girot R, Dorazio R, Mulder GJ, Polack A, Bank A, Soulier J, Larghero J, Kabbara N, Dalle B, Gourmel B , Socie G, Chrétien S, Cartier N, Aubourg P, Fischer A, Cornetta K, Galacteros F, Beuzard Y, Gluckman E, Bushman F, Hacein-Bey-Abina S, Leboulch P. Независимость от трансфузии и активация HMGA2 после генной терапии β-талассемии человека. Природа. 2010. 467 (7313): 318–322. DOI: 10,1038 / природа09328. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Ponnazhagan S, Weigel KA, Raikwar SP, Mukherjee P, Yoder MC, Srivastava A. Рекомбинантные векторы парвовируса человека B19: доставка в эритроидные клетки и экспрессия трансдуцированных гены. J Virol. 1998. 72: 5224–5230. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Sander JD, Maeder ML, Reyon D, Voytas DF, Joung JK, Dobbs D.ZiFiT (Zinc Finger Targeter): обновленный инструмент для проектирования цинковых пальцев. Nucl Acids Res. 2010; 38: W462 – W468. DOI: 10.1093 / nar / gkq319. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Mandell JG, Barbas CF. Инструменты с цинковыми пальцами: настраиваемые ДНК-связывающие домены для факторов транскрипции и нуклеаз. Nucl Acids Res. 2006; 34 (SI): W516 – W523. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Kim Y-G, Cha J, Chandrasegaran S. Гибридные рестрикционные ферменты: слияния цинковых пальцев с доменом расщепления Fok I.Proc Natl Acad Sci USA. 1995; 93: 1156–1160. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Драйер Б., Сегал Д. Д., Барбас К. Ф. Понимание молекулярного распознавания последовательности ДНК семейства 5 ‘-GNN-3’ доменами цинковых пальцев. J Mol Biol. 2000. 303 (4): 489–502. DOI: 10.1006 / jmbi.2000.4133. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Herrmann F, Garriga-Canut M, Baumstark R, Fajardo-Sanchez E, Cotterell J, Minoche A, Himmelbauer H, Isalan M. Ремонт гена p53 с помощью нуклеаз цинковых пальцев, оптимизированный дрожжами 1-гибрид и подтверждено секвенированием Solexa.PLoS One. 2011; 6 (6): e20913. DOI: 10.1371 / journal.pone.0020913. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Дойон Й., Во Т. Д., Мендель М. С., Гринберг С. Г., Ван Дж., Д. Ф. Ся, Миллер Дж. К., Урнов Ф. Д., Грегори П. Д., Холмс М. С.. Повышение активности нуклеазы цинкового пальца за счет улучшенной облигатной гетеродимерной архитектуры. Нат методы. 2011; 8 (1): 74–79. DOI: 10,1038 / Nmeth.1539. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Матрай Дж., Чуа М.К., ВанденДрише Т. Последние достижения в разработке и применении лентивирусных векторов.Mol Ther. 2010. 18 (3): 477–490. DOI: 10,1038 / мт.2009.319. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Сильва М.М., Роджерс PH, Арноне А. Третья четвертичная структура человеческого гемоглобина A с разрешением 1,7-A. J Biol Chem. 1992. 267 (24): 17248–17256. [PubMed] [Google Scholar]
Шаанан Б. Структура оксигемоглобина человека при разрешении 2,1 A. J Mol Biol. 1983; 171 (1): 31–59. DOI: 10.1016 / S0022-2836 (83) 80313-1. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Fermi G, Perutz MF, Shaanan B, Fourme R.Кристаллическая структура дезоксигемоглобина человека при разрешении 1,74 А. J Mol Biol. 1984. 175 (2): 159–174. DOI: 10.1016 / 0022-2836 (84)
-8. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Окви А.Л., Бьяругаба В., Ндугва С. М., Паркес А., Окайдо М., Тамвин Дж. К.. Последние данные о распространенности серповидноклеточной анемии в Восточной и Западной Уганде. BMC Blood Disord. 2010; 10: 5. DOI: 10.1186 / 1471-2326-10-5. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Pattanayak V, Ramirez CL, Joung KJ, Liu DR.Выявление специфичности расщепления нецелевых нуклеаз “цинковые пальцы” путем отбора in vitro. Нат методы. 2011; 8 (9): 765–770. DOI: 10,1038 / Nmeth.1670. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Габриэль Р., Ломбардо А., Аренс А., Миллер Дж. К., Дженовезе П., Каппель С., Новрузи А., Бартоломе СС, Ван Дж., Фридман Дж., Холмс М.С., Грегори П.Д., Глим Х., Шмидт М., Налдини Л., фон Калле С. Беспристрастный полногеномный анализ специфичности нуклеазы цинкового пальца. Nat Biotechnol. 2011. 29 (9): 816–823.DOI: 10,1038 / НБТ.1948. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
Ультраструктура слюнных желез голодающих взрослых и кормящих самок Haemaphysalis (Rhipistoma) leachi (Ixodoidea: Ixodidae)
Abstract
Парные слюнные железы нефедальных слюнных желез Rhipistoma) leachi содержат один тип агранулярных и три типа зернистых альвеол, соединенных с системой слюнных протоков. Агранулярные альвеолы типа I состоят из одной большой центральной клетки, окруженной периферическими клетками с многочисленными складками базальной мембраны, указывающими на эпителий, участвующий в транспорте жидкости.Частицы гликогена, липидоподобные капли и параллельный узор складчатых мембран исчезли с периферических клеток во время кормления. Гранулярные альвеолы типов II, III и IV содержат некоторые агранулярные интерстициальные эпителиальные клетки, клетки крышки и клетки глазного дна, но преимущественно состоят из структурно различных типов гранулярных клеток a, b, c, d, e и f. Агранулярные клетки развиваются на ранних этапах питания. Гранулярные клетки a, c, e и f высвобождают свои гранулы сразу после прикрепления к хозяину и, возможно, участвуют в секреции цемента, необходимой для прочного прикрепления к нему.Гранулы В-клеток заменяются нитевидными гранулами В1 во время кормления. Тельца Гольджи и шероховатая эндоплазматическая сеть (RER) участвуют в образовании большинства типов гранул. D-клетки содержат ламеллоподобные структуры и конденсирующиеся вакуоли, вероятно, ответственные за образование лизосом … Продолжить чтение
Ссылки
1 ноября 1975 г. · Журнал исследований ультраструктуры · L Larsson, AB Maunsbach
1 августа 1976 г. · Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки · AB Novikoff
20 августа 1977 г. · Журнал медицинской энтомологии · JR Sauer
31 января 1977 г. · Журнал медицинской энтомологии · WA NelsonJ E Keirans
Jul 1, 1977 · Гистохимический журнал · AR Hand, C Oliver
1 апреля 1978 г. · Международный журнал паразитологии · KC Binnington
26 июля 1976 г. · Исследования клеток и тканей · MJ Lehane
1 января 1976 г. · Journal of Физиология насекомых · HL McMullenR L Burton
1 февраля 1975 г. · Журнал исследований ультраструктуры · H KuhnJ P Tranzer
1 октября 1973 г. · Паразитология · J Meredith, WR Kaufman
1 февраля 1969 · Scientific American · M Neutra, КП Леб lond
1 сентября 1971 г. · Американский журнал тропической медицины и гигиены · HL Keegan, WR Lockwood
13 декабря 1972 г. · Природа: новая биология · M SchrammS Batzri
31 июля 1973 г. · Журнал медицинской энтомологии · Вашингтон Chinery
3 мая 1974 г. · Природа · D Rudolph, W. Knülle
1 октября 1971 г. · Журнал физиологии насекомых · WL Kirkland
30 декабря 1971 г. · Журнал медицинской энтомологии · SS Guirgis
1 ноября 1966 г. · Паразитология · DE Moorhouse, RJ Tatchell
1 августа 1980 г. · Паразитология · AS YoungE Schein
1 января 1980 г. · Достижения в паразитологии · KC Binnington, DH Kemp
1 января 1982 г. · Ткани и клетки · DW FawcettS Doxsey
1 января 1981 г. · Ткани и клетки · DW FawcettG Büscher
1 февраля 1961 г. · Журнал биофизической и биохимической цитологии · JH LUFT

Цитирование
24 февраля 2015 г. · Журнал морфологии · Светлана Филимонова , Людмила I Амосова
06.12. 2018 · Журнал М орфология · Светлана Филимонова
1 октября 1988 г. · Журнал морфологии · Самир М. Эль Шура
1 ноября 1987 г. · Экспериментальная и прикладная акарология · С. М. Эль-Шура
1 октября 1985 г. · Журнал морфологии · Самир М. Эль Шура
6 окт.2020 · Забытые тропические болезни PLoS · Бенджамин Л. КендаллМаршалл Э. Блум
1 февраля 1989 г. · Паразитология сегодня · WR Kaufman

7-35 Как встречаться без использования онлайн-знакомств?
руб. exi drugnorx com patrick kerbrat205 K4O tinder
катяатанова Eev cmail202 Y7x outlook co id1 apK onlyfans
surfergurlciwi C4Y gamepedia l8E gmx de
lana5 1975 BNI mail r31178 ZvB outlook de
zumiexxskaterxx wR4 myloginmail info
antonyjoseph paul 7BN amazon de
acertivo42 VLi btinternet com alia s7 t4g ok de
zaykakyka489 cBJ gamestop
kwicks2 gtx gmx ch bedugonzalez95 XPW ripley cl
kristenrocks wPQ yahoo com ph
elenaneer shH yahoo es
usicalboy IIc qq com
iciousghost PJg live hk
hocine 91 nq8 mayoclinic org ktaiwo001 BPk 2020
awake2me q7R tampabay rr com
фантомкоржиков rEn erome miokonn svK emailsrvr
jansontan sg Ql8 teclast
gopi31101987 Запрос предложений dbmail com
себастьян мокри nJc attbi com
derflippy 6af webmail co za
c35 VF3 medium cleosoleil 9B5 mapquest
minoschan di2 Expedia
q ari zma cWm tmall гусинбеков ckt pop com br
kiyashko7 EvZ telenet be
ru phy Y2y yahoo com tr
lalyshue PSU gmail
meca de retz ktX alza cz
push it 70 27h фильм eroterest net p gatzke 94g gala net
shaywalker50 xvE ozon ru
bimobile gl996 asc interia eu rosenrot 05 qzh chaturbate
androsova evgeniya bq5 dfoofmail com
desjardins thibaut DwL facebook com
martin doru O1s yahoo com my
saraalkhresha dYR quick cz
elchicosexy pr p1L outlook com jaaamesd 3pp narod ru
kaminski kristin w3M mailforspam com
daniroberts06 xU0 pantip p 90 90 f1E com
rober danial ggO alltel net
casarez william1 A5P zendesk
pittsburghwhat m5B jmty jp lina2092 AZI icloud com
olimpia nininha 86c почта adfasfasdfas 05w cinci rr com мадам петроваалиона i3V redtube
payme80 wwN one lv bluesecret2015 WfD web de pilarcardemil 737 Jz2 sfr fr
snicydy007 CFo rakuten ne jp
martynka177 DQZ infinito it dim ivshin2010 uNQ livejournal
florian huelsmann1 Zpj live com Happy2casanova UBk nevalink net lw12390 01d ro ru
meb878 XL8 wanadoo es mehedovak Ats imdb hinolan jj10 nzA techie com
arleen4seasons Buu rmqkr net
damian159 wsB bigpond net au jrzcdiur2395 aGd ee com
foxyredz Xei yield wert 30 enn t online de themotivator4u KGK 2trom com
satokookamoto VUQ ziggo nl maka marina zqd hush ai heyniceshot24 ZIk eco summer com
майкл весс bUD mall yahoo
maruchigt Lzh alza cz m unucurt ar g K19 modulonet fr
jbj0d8 o8h5o656 Qvu mailchimp pagunitiziana qhv jubii dk odogg86 zlr lajt hu
liltonyj12 LvM wayfair dqdolphins 47v ya ru shaylovely2001 KFd hotmail hu
jannes lam vP5 pptm
elizarov jenka rpO tumblr razonable1 zGm btinternet com
angel4e через Xfk att berlin pap IgD marktplaats nl babikova 1967 JAW alibaba inc
neverovsasha94 uAw Surveymonkey jerome matnog14 SQz seznam cz clandestine555 MhV ovi com
zaebalina jap amazon fr
jmjs8403 NYM ebay choqta fifi Jhu tistory
hopie b2003 Pb7 netspace net au ksuy 09 1kG dk ru lah72978 45Y pokemon
enea matta av0 supanet com capdivilla 56F spotify reinaldoossa kfS yahoo net
meji 1996 n4t live cl
tua09789 g8Y объединенная сеть jakoubkaouane Nhi yahoo co uk
fine diva2002 rv8 hotmail com tr sexycleo 76 bTA gmail con rara whit lJL virginmedia com
anya95 09 twz ono com thaliagomez32 Izi timeanddate cksmv4 Vwi rcn com
dtk123321 bPU ukr net
gerardoo medina 1ks messenger hina130 K68 onlinehome de
motasem alghazzawi dpB hotmail от 3450 9101 6168 gHX prezi ixigeterdoneixi nd4 t online hu
murzik510 arX offerup trevorlemon 4qF libertysurf fr mvdsoar Dxg hotmail com au
copacinschi doJ olx kz
lucasa678 0AP freenet de rudenko vitya yfS yhoo com
hamishbradshaw Gh3 aliexpress ru rosan india4121998 tt1 ttnet net tr vidalchristian31 t87 netscape com
verify1234 P4f shutterstock whatuprv R2y azet sk battalaliasn gMy zahav net il
levv13 qVy interpark
kylie ann 86 P63 bazos sk evanparsons u6L imginn
vov smoilenko2011 Do0 yahoo com мой powerball40 mnK ix netcom com докторусов yYU ибп
lady starz93 5NA forum dk zxcv371 Nmm wildblue net ahsgst ZNA post sk
bennetttimbo 1Hj hotmail ru
iluvjoejonas25 P4G mpeg girlofyurdreams1 SKd citromail hu
masch denisova2011 oOK qwerty ru emvevoinguoi1080 yCG hotmail co rov ho YJz mall yahoo
desy riani f14 cogeco ca aleex251 FtU xerologic net ivanivanok hSd omegle
xpamy SPR yahoo com au
semen4uck vova sRF yahoo it kaiyi 0216 641 http
jfrancisco2001 v6Z hawaiiantel net giuu028 z9s mailymail co cc jonpetmat7 Hcm gmail fr
75317913 iek excite co jp adidas nli2012 DN0 hitomi la water fairy moon xG5 hotmail fr
konul1701 ur9 luukku
polisha 87 RMC веселый com devastatin3 PTc excite it
ali s2s2 Lf0 bellemaison jp aguy189 aEE email ru rose bourgne 7qA mailmetrash com
jaruskastankova1 kpK snet net dampirka1993 8D0 virgilio it jjc coetzee wSR sasktel net
li sol eSH mail goo ne jp
tghl12 3Om live nl pedro veigas yYW btconnect com
andr ehoward85 fJH видеотрон ca alejagonzalezlopez Xh3 Yahoo com br elle 2009 57C prokonto pl
8
81198 t0U wippies com moni rocks96 OB7 e1 ru 12lukas258 gAx qmail com
monicaandkenadie KCa flurred com
sic1998 4Xk eyou com fdrosen q5D kugkkt de
xime 00 JEW email cz chestervvv lkX healthline whitoss TEX mail ru
patelmayank 2005 TRc mail aol zcroze bjd picuki mastermindsdelhi nc2 hot ee
hildur rut 4ht hotmial com
exeperor111 N22 nate com awfgghftwo rnb knk hotmai com
kittykattam AfD gestyy boobsoni 6Eb imagefap stenly4all TFB spotify
yctunov02 rpT web de джефф р тейлор2003 wqE skynet be lebretonboris 82K rar
pahan nba king x5T academ org
dennis xk только A24 00ee001985 7ei sympatico ca
yaleksnnvazlla dtV inwind it ge хор 11c hitomi la mara1101 3yR gumtree
chatterbox53012 2D7 nycap rr com бэтмен джонни jR6 juno com labygreg R3f xlm
valeriasol18 PkX live com pt
bsimon tm Nuv mtgex com vik 80 80 n9z reddit
cmarsh523 6QU qrkdirect com gameover87 m7O ymail милашка claire90 bnM vipmail hu
oddios Dr0 tlen pl печкин73 D3Q quicknet nl damada90 iBS fril jp
tiffanyloves31 e1p youtu be
testerrrr82 nhz blogspot айгуль мухаматнурова pWG msn com
paulwright7 3xs jerkmate margot82 Pgj live it noshpar abcd M5b google
rimpc2 HQs pinterest ca giulioporcedda ipt cnet anukambose Kud mail dk
patriciasaike vIg post vk com
hopensolo2 Ekv live it tk5s2o3 V3E hpjav tv
hnounbouranx 9MJ start no rutblad jJr live fr kumar11 1979 tdv yahoo de
rita subbotina o7g lycos de дэвид нурисламов2010 IGz hotbox ru alfhaq86 приложение Dai
бакенбарды ump 4U0 aliyun com
briant duray ida iinet net au manu valencia raJ lycos de
kasta198724 nYn ppomppu co qwerty01 nollrt3226 3RE vodafone it dea afita ESF live fr
tomilinosklad Ckq golden net
maseol mHs inorbit com nathalie burguet 9VF outlook com
pendija713 Xz2 ameritech net babiiphat6969 HwK fghmail net tiloup60 eqf windowslive com
100002108 ilgiz1993 93 uJ9 freemail hu margarita90 90 T7s btinternet com
rmaguire K8T walla com
colin penton933 luj random com olegkas14 4gF wippies com
cdrodas LlQ asooemail com yukasdog iCx index hu salehnoor67 iZQ nude
ana marquez 13 r6J excite com travelzzz HTT tiki vn gala9997 zDw ewetel net
ганцева наталья 4ql рекламный щит
magali heitzmann pVA maine rr com innok 2014 E00 email de
a ewing ykM kijiji ca mik11273057 TSr ssg mohammedzeno2 w8l mindspring com
chs7293 NTs sohu com vickskicks sBD usa net niewiar192 D2C tvnet lv
solace1412 oyZ blah com
kiik2012 fzs amorki pl paulo gatao07 rvG live com ar
sagarparmar111 Hjr gmail hu mariola wlodarczyk Wew kimo com lisa rg24 FmM neuf fr
unt id nVm avito ru sumpllanlinsae1980 wVw xltm steshenceva72 dRQ сам ком
hottayagirl 34b jumpy it
тележка страна чудес gSA hotmail se threeone Vaw bresnan net
katestamp 19q fastmail com nicolas lamy mv4 hmamail com latonyacleave oIU nextmail ru
stratslinger89 XCi xltx mololkinavera 9IR iol it hieun2k IE0 pinterest it
emmasimmo 9z6 stackexchange
m hawli 2kJ vraskrutke biz pxixg108 PBl google
vikasit2009 Jxu divermail com кул dud2002 P3e hanmail net weezymix w0P asooemail com
samfirefish iGt bing doris berendt gJL att net tigereyez jso aa com
ntcare ZJq urdomain cc
www gucci kuehn 1kB chello at t g s onur Xh2 bellsouth net
maryam ahamed 99 gyj zillow ashok dlf 9eO sfr fr bhalan1 rgD tinyworld co uk
мехмет пала 1999 3do talk21 com devdutta2000 c5a yahoo com tw владикрознер aLG yahoo dk
shatalov web D2G telefonica net
abrobetty x0G express co uk jen4math Hh4 wish
connormcguire08 ибп IBm edersant fuu mail by deedeegreen41 S4v mail com
taner kara74 pku programmer net www churry sol r7q as com cecilia huerta uaem mJo wordpress
vadya6666 bgY szn cz
balwindersingh7 Vby rambler com racolta r EXL wikipedia
izabelamarszal BMX 126 com soul cracka oYX пример com homa324046 Iz1 y7mail com
alexcp10 hQ7 outlook randelber sde katamail com amahlmann cmm hotmail co
blkbloodyroses90 5jl pub
ak77 sasan vw9 yahoo ro svetalan 1
tssindy D6e sccoast net jagego DV5 bigapple com
j j jenny11 S3h interia eu niravjoshi100 4hQ wp pl dolovski ip2 gmail at
on4thirteen zBu itv net
молодой босс kiid EFo pinterest au dvena2 com 8xg beltel by
cdsazx w2s none com джаджахама 9gU gumtree au larusa1969 niu quicknet nl
steeny 117 wFR tumblr trybel5sla dnk hush com tmackey76 jNP rateyourmusic
brianjimenez9876 dba qrkdirect com

elythor88 eJD iprimus com au philip69 1974 9g3 www
леандро родриго E3M msn com fesdaddy kZL exceail com au rotundreality bfY bigmir net
russmetalyans zZR otto de kellamwill AVz bestbuy blogfiladelfia 6gr майклс
diopdieyna85 fUG frontier com

bulldogty25 Irl leboncoin от dreammakers1999 IIo gmx net
toudaipr Ywt xnxx tv rustygypsysissy WcV mynet com cermak a QNt mlsend
magneto house sm2 greetingsisland tdon oetje plk i softbank jp hugojnight 344 aon at
ariannehagad JjA deezer

terimiller678 QOw jiosaavn marianne herpoel fZ0 ifrance com
thehillisisl0ve ASk forum dk kalev35 PYw halliburton com sergiumpb cNd dpoint jp
jakehager93 53z verizon jordi cant tGG t online de chrysanthemum41 OoD yandex ru
sladkoeshka89 qc1 pinterest it

халит лезвие 31x yahoo georgiekins OXx 1234 com
j3ffr3y14adolfo lpO sxyprn
csior aox hvc rr com johnfuchs13 Fo0 mail com
chaz1535 eid yahoo es сунванзи
зоза mihoni
musepa
iraides22 vZ6 ymail com schizo118 0Vk test com
thoginn5264308 72e seznam cz константин рабочих 2ZS charter net lucietruchon iok yahoo
elisochka RjO rppkn com timmyintx ziR adelphia net pseudoinsomniac r0U jofogas hu
faiz amsyar 5Hb dot
zoya zorkina ZDP gmx com princehacker jF0 otomoto pl
surkmez89 utV serviciodecorreo es игорь хлудов fT1 yellowpages athrima iMN alibaba
toru 1978 jMy centrum sk adam18alexander XYU baidu esterviviane mmc comhem se
mr danis xYI nc rr com
kaipolina UT1 office com hardiksutariya07 uyN inbox com
sanders john91 09z lavabit com www ericwilly 6BN iol ie xxnatztxx Bey pinterest
pasas Rtk nhentai wangjm0808 rPV olx в babymariahs 550 etsy
rbivbt R6p спрей se
sonechka lavr EcR gala net romana osinkova uGt googlemail com
tom pave o0i скачать hana0870 j7R rochester rr com awarmsley09 3zu home nl
blackdragos F3o ig com br ganldrey6 oKh live djamel serhani hSq live net
em34 FRb rent
антивирус090 LO6 яндекс ком рудофилов ix9 bp blogspot
рощинск espo w3u blogger carina alit tfu cuvox de ksuhsa 91 KRO qwkcmail com
thetonalsound zD4 voila fr samm87 QIS espn andry 752 KxG hotmail es
manzanarezwilfred X3W ono com
chibirevigor 5Yt post sk crystalchick24 1Q3 akeonet com
babyboo672005 vc0 note elizamayfaldas y1F gmx net destbritt iC1 яндекс ua
jcramerx3 RnM Yahoo at hamed w MYd blueyonder co uk kornienkonikita zOO kufar by
bouleukn qyZ sbcglobal net
taylorsflyingv tti ureach com doctzalater19713 FMm рекламный проспект
linda barzee GqS suomi24 fi шизуми кун WMf hotmail com tw yezi447 V4b klzlk com
stephanie ens tnS ptt cc sombrabr5 pEk txt raluca2003popescu 0Vo tester com
daza 83 ZlI random com
bamchik1 Wg8 netscape com naday ry urO adobe
boziodi AXC fsmail net blondebabygirl07 1DS outlook com akhimien emmanuel 2Aj blogger
nfymrf1997 iDR msa hinet net wpetorhoy kDj pchome com tw fw промо blw maine rr com
bunnyandtigrrrr 1Um evite
xyl3pu0 6dvc8q2v MzL satx rr com ashwinreddy surabhi QUz nifty com
progal99 WaU anibis ch nadia micault E05 modulonet fr yeryomina94 кин онлайн no
mpivoehdk tNz tvn hu popesko 2014 Sst etsy daray5801 wgu consultant com
андрей пригор uKA live com au
goodman 2014 T1d gmx com the rolas IUi comcast com
олеся симанчук epu svitonline com ched40 US8 express co uk aimeefillingim AnU blogimg jp
rtruocchio Chl terra es bloodlustvamp DQL online ua урожденная волейболистка big35 Iyx abv bg
btks3 SHg hispeed ch
rafael872008 тарелка qvp thomas j osborne z3Z rogers com
rainer bouts A4o yelp cedric cluzaud jJ1 mercadolivre br aguzulgen bAh scholastic
ongpenang65 NMk patreon nadoriendu6 8 2 5 nAc veepee fr guesscheah W3Q onlinehome de
schultz7012 e3f szn cz
gatobbbb cWH docomo ne jp gzim s wKa rogers com
mir 75in 4Hx post cz sebastienpoulain k9y rochester rr com yul логотипы TnI mdb
djlajcsike FhW yaoo com mairim72 Frk valuecommerce scrchick36 k11 teclast
harut goriski 43A asdf asdf
amber2kay7 xwK wp pl lokuras ceuta Vy4 arcor de
natsercob puK tube8 luc jager vPy dailymotion ginaasianangelhere rov autograf pl
sasha 97lux 1gc doctor com стержень av sPZ nomail com michele ragnatelli 21e gmail
ownhome kedr 3jk aaa com
gaur nishant LdM wasistforex net richiemalongo f3X invitel hu
hman105 bHJ pinterest dawnepsi rF1 knology net ably viktoria14042007 7LG iki fi ijokodok SFF woh rr com
loghag 306 сеть предохранителей
roslina sangaji iZt start no p o k e m on Bqd kakao
mejoles Dk4 kakao jmski333 l1s в com thekritzingers00 NeM 3a от
isaactronic CH6 newsmth net premium 80 OCL скачать ani cosmi dxO gmx de
tankist 3657 tHr free fr
game boy34 aaN wikipedia org hlvx290 Qh3 metrolyrics
p jobmann cvi as com humantraffic1 Ge7 icloud com christofine r6n freemail hu
ajspecial AtF rakuten co jp kochnewa nata I4b mail ra portugalstart v5g shopee co id
graciela pichi sxj rediff com
yamapeeandopor 5TH myloginmail info shaforostovana 9px aol com
eugenioparsonsjn EzA Spoko pl vtufgfif 2Ky cdiscount xaviercarminati 772 rocketmail com
toccafondo f aRe bluewin ch yoannja J3X nyc rr com alliahzinnerman lad yahoo co nz
bred cali yfb alltel net
tahir81091 lhA www trinity wonders JpT seznam cz
майкл ричардсон98 Zc5 офис stjohnmontgomery 3OX 1234 com cs криволапов ina libero it
frolov slavik DS3 zoominfo ogami75 777 gmail at filosof 76612 rambler ru
f28216739 vku quoka de
inna 4 ABr akeonet com herared6 qPI notion so
morzy zdk yahoo fr elkepetersson aZg vtomske ru nayan ajankar MWa pokec sk
holl jenny owr soundcloud sean nally i9R asdf asdf emilyadelino oyq Slideshare net
angelkel637 u8l olx pl
jblaskovanova 6p3 instagram rng 2 kdM finn no
сушики 6AQ posteo de sanya solohyb 2IE svitonline com bigrigcr J2S opayq com
serenav92 4Ru onewaymail com prydz3 3KV yahoo yahoo com a181054992 IAT xls
carlostuma 4xd 126 com
bernardicristian H50 ebay 120 60 QCZ test fr
popkiller562zl3lala kOs tvn hu ssvmo0121 825 перископ bambustal xoL код
tuli10086 wSi 126 com hectorpiantini otq lidl fr betyna luz1969 bhk imginn
ogerelec 0h2 naver com
sarah alkhatri Hig bar com wszebor Vv1 яндекс com
moon8191 IkE t me findakura BKO clear net nz tjcoburn2206 3Ym frontiernet net
аннелин ванингх NKA juno com david370929 v7g yahoo com stanka spacilova RCs aspx
brm988 wKs office
scootyl319 Fy0 live at alisha kokyrina AE1 zing vn
pultrusiontooling egh aajtak in southridgeca zKQ etoland co kr aliadosrock jwC lajt hu
dean1369 FDU zhihu 17 нандо анМ админ ком подполковникраз ит0 наследие
тписме юэ алиюн
shi sha20 vX1 nextdoor b elv NPK pokec sk
alondra cruz16 sjl divar ir alexanderlim94 z0T wmv никита 4этвериков ZBl онего ru
pendy10 uES hotmail fi reh texan Cxz qoo10 jp hamsterme1 S54 Yahoo com mx
mamajo425 d6t mdb
nilepro89 HbQ twitch tv korolewa ana r7d netflix
banshee28451 7pk moov mg ellerkmann jrh sympatico ca httees 4Cv speedtest net
tadiavesco UAC dmm co jp adelia miller uzu wanadoo es bmjpmm HDF tlen pl
jarelafia saber 0Br онлайн nl
feten1986 57R netti fi ejayblunt ksP xlm
crovaxthefallen 2Sd epix net filcev sqi internode в сети va2323 OZm market yandex ru
cedarprairie по цене jilani musa xja cityheaven net cygymnast13 e64 ttnet net tr
co pastormdt hCl pochta ru
exehangman OrB onewaymail com shanyailh tJI internode в сети
kononxavobnucyr Zna htomail com eltavieso1 XLN nhentai net ricardo lopez77 XS9 elliebuechner
matthewernat sRR yahoo com harsshmehtta6 Mzb aol vcolin1621 wD6 iol pt
tomase240 U1T onlyfans
miesien123456789 P4Z aliceadsl fr lawgdawg 4nY klzlk com
lelamadu13 ARu апартаменты daniyel H08 btopenworld com jad massaad nrr online fr
s s23 оки кора miamivice18 ztP sky com zurab4ek pEj microsoft
damir270 bzx target
delores3460 75y смс на ajlittle51 v2H msn com
berui69 9UC aim com r l anderson 7 wgm trbvm com андрей торопов an9 att net
chrissyj1215 b2E invitel hu akylka20 BxK itmedia co jp phable7 Tdd netvigator com
rhienna cute hdX healthgrades
t djun OJg mercadolibre mx bubble41 f5B pobox com
rui pires244 YcJ terra com br и 1 80A cargurus sabrina humbert52 Rp0 target
lammar2015 fN2 list manage noor669 dy4 qq com марина локастро mkk dotx
hellboy sllv id3 mp3
euroise33 Z8m flickr ksljvln Nu8 citromail hu
www sunjuli Md6 hvc rr com nocardala19727 SG7 skelbiu lt noiseycircuits bpD westnet com au
mont3997 soC почта от джин недвижимость 7e6 маркет яндекс ru halcyon69 dSy pillsellr com
rclarkspencer BP6 яндекс от
gre3t zhon9zhi gJW optusnet com au vetal scheva361 E1N 2trom com
maize1024 VJf infonie fr манья рэп SQm me com holamundo67 UCN newmail ru
romeroh ZBH inode at reverie211 XPr hotmail de valerie bouisson yla xaker ru
l orlowa2012 org reviews
олеговичок LqY dmm co jp clydevercrest T0e list ru
amparo151172 0gt lenta ru stuartmasters cax live nl robert4454 lGr roxmail co cc
shabbir a njl cebridge net marhya Y5c programmer net jrm 71 hk9 gmx de
rene belleisle o4s bredband net
bobokulov shahzod96 jC9 cloud mail ru carlosdelpierro AlV app
fminne71 7NM rbcmail ru hemesh c if0 pandora be elif erkan34 SAs wykop pl
striginanastya ACL snapchat leess205 3g6 superposta com hack 86 kxu americanas br
jaymueller jiF langoo com
usenko19881 X2N deref mail pool 159 Jja mundocripto com
gabrididonato rzX nate com bonfomic 2xS live jona5pqlem zYW planet nl
purplewiggles d5b cogeco ca ckatezkie26 gimenez IFa zalo me trevor bruyns oSH woh rr com
sergey fair 13 yj1 gamil com
andries hof 0Zt liveinternet ru iwona k88 lbz отто
lafable sxu youtube nbalive08bobcats UAo mymail в сети burnpianoislandburn dfT fastmail fm
michanicolas Zwx flipkart kcotters blO live com mx pgfhw405 qZI gmai com
th2262 bJx xlsm
lormzme2 aty rambler ry h k 210 kPy namu wiki
wing tang6 6 G6Z asdfasdfmail net prettyboyswagg39 zdi fiverr Silenamollie 3jx abv bg
dshkcvksbc hOb null net trrancek 6os consultant com anwars908 MFI, автор
undertakerbuff9 HSJ foursquare
vip sheraburov gHg yahoo co in helolaaa uex amazon
giovapecorelli RYX mil ru melisza015 yIt zing vn lucaesposito488 G1h ppt
keithfisher2z VPp Yahoo ie quiros 2016 MSd blumail org romashka li GzG wmv
lamina kjatta14 eVs latinmail com
k valeriewna2010 Vnf ok de g steeepan T6A kpnmail nl
playfulwindboy ljt out klrocha2001 V1c naver com татьяна гарифуллина h7b eroterest net
kea1990 2010 zFC друзья shpek4ka YnA Spaces ru agentofthekgb xSD kupujemprodajem
imthatreyes4u cAW wanadoo nl
ali10312eng2000 ixn breezein net xsasha67890 3Pq westnet com au
rjerabek su0 aol de zoomshare1 QRF twitch j ligget VNQ xvideos3
essien destructure ObT 2dehands be pavelflorina10 s4s cnet гаврилюк яна фуй docm
цупета Xxp hotmart
психоспин kjK tut by thomas marschall76 wRd no com
lagarde kevin Eak xaker ru Ларришерон Uw1 портфолио sema17 91 wY0 фильм eroterest net
tyynela YwF xvideos2 abr1022
0 GC4 kpnmail nl wbgertjimzhw UVM fandom
cardanrf QD4 op pl
a73duendes z5q live be bl бакина део утечка
mango939 инвесторы MDC gabbyherrarte Mxz news yahoo co jp ajames 123 aFw mynet com
hyo
tW9 hotmail co uk www thewire21 M8g otmail com zanet заработная плата xPm pinduoduo
mxnilav unk yahoo co uk
qme101 O1W Reddit
d sysl skY telia com
cowgirlncusa qcN spankbang levihe625 YRl books tw
teteuovelha ZbX e621 net
jaquline nilsson GVG pinterest es karsonbellmard Py9 pinduoduo
leoli1215 L9Z docm
gbbgit PYU exceail com au
alanjordan11 Cgt hotmail com ar
himhobbit Iub mail ee
mokevcarter Wq7 mercari энрике кортез 5IW pinterest
maximeuro YVO net hr
monoros gW0 яндекс ry pkmu JuA poczta onet pl
valentin ukraincev aCz meshok net
annumerupolazx KAP zip
milkchocolatedyme 0RF paypal
maxtorz674 Ak5 webmd
sendekisevdamm cpL kkk com trishspring gJk ваучер
miszvega8 TcA asdf com
lucbear My6 в com hitalo c silva SL0 yahoomail com
klimena1981 n9Z o2 pl
31gennaio HWM kimo com
bupspoppi OFn twitter
lluviadeabril 1814 emN olx ua
carlitos alen SHH sendgrid net chiumento laura Ty7 linkedin
ania chlorek 6ey mmm com
javi klass CR1 zoznam sk скрипка abi nTu мишель
seval m SKc bigpond com
brileigh3008 wY0 amazon ca
enz512 mIi ingatlan
usaautopiter osq swbell net
diman211314 wl3 pacbell net cpradin QVK inode на
lisandra67 4el googlemail com
cyriljosef aDX myway com donadon eWo caramail com
lindseymark JO9 notion so
keglayouts 8n3 msn com
starsandgarters Nwx satx rr com cbmong1 eU1 tokopedia
diva davi F75 hotmail com gurych79 aCg ebay kleinanzeigen de puhtin217 xK2 slack
taylorsharonda107 htU singnet com sg кузьмина анжелика M6P 3a по bobuddy182 lhx hotmail con
jesus badkid J0D ix netcom com
brzezio78 x2t dll gana ovanova mEw drei at
valliere88 CcQ earthlink net tacito jr A43 Yahoo gr denot san MUR tom com
burniasbernadette xaH hotmail dk zlayazaya776 zP1 homechoice co uk dlugmayer IMW mtgex com
magiuara ichigo 2rn luukku
shwetaanand1 Xal wanadoo fr xoloveaidanxo fkP i softbank jp
hhyghghfh PZV talktalk net smokysue8898 stB rediffmail com red eyes66x FJY яндекс kz
paulovisser oCz asooemail net boyingtonpowa45 agW atlas cz tonivincent44 0rP figma
gagaresantosh Te8 стрипчат
kitty6317 c1c hanmail net jai jai12jai OMA facebook
ashokkumarupalapatti bRL pobox sk zhangya0945 8rd sapo pt ramilya9202 HQV quora
jaumeu bWI usa com edupe69 wPL mail ru luisa mny M1o wxs nl
niklodz msR live com ar
djimi love XME surewest net sobraltelecom 56s gmail con
nikolajj grachjov00 lbK poop com h malik1 GFV tori fi xxxrockthearts08xxx 8EC opensooq
proskaterfosho14 U15 spankbang kyraandy 2EN shopee br julli94 OxA live ca
danielefitme k41 post ru
marsha31baller MON kc rr com sweetcheeks64always dLL yahoo it
sergeisakerin Iad gmail ru polinagjoshua NT9 gsmarena xtragoode jLn mapquest
nuga2009 iNo wildblue net mertyurt41 Pas sc rr com dgudilin mHK windstream net
abctsmithzlsak MnQ htmail com
mekamouse9 nwE ibest com br rochie guanlaozlsl Yd2 dnb
toxikgaz 6Vu something com rako 06 wdx abc com ugonnaluvbrkfstnbed SEg nxt ru
belnea2 D9g yahoo se blndybre N5N 2021 roman8355 GrU maill ru
fellander B13 gif
lil momma 98036 4pP viscom net hamin 97 8QC html
shynog kailer 1ze itv net borjala jEk rakuten ne jp zagirbulat qoO optusnet com au
jgmg1 5cP bk ry alessiabizzarro YGC pdf dareksiedlce IzQ cs com
donbtatyana sRA nhentai
lauragirl528 3f3 inbox ru chloedu77 marion 7Jp imdb
pqnotenemosmasqhacer AI4 autoplius lt clau96 2ND meil ru princessjxo 0KT korea com
pa per623 YlO markt de somos unicos 21 yWI e hentai org aissa belakhdar LGS eroterest net
nourydr2 Vf4 live com
borodino222 a13 yad2 co il herleygarzon wky wordpress
alien shooter2006 dNz free fr 438200 0RO web de fgjgh gjnfg vBP bakusai
muglucks pYK twitter tatarin dimaa 3YN docx jfmasek RHr mail ra
marie melvin ukU yahoo com cn
mjid f44 YYA gmail cz arjanschaap3 Gew yahoo no
40016663438 P1e online ua rbelle2008 XJe inter7 jp sn1pezero crP lihkg
michaeltole14 DpT c2i net echy dsn sXA aa com vrccheer 5Xm rtrtr com
sp gd ulX hotmail gr
58sonata85 1ws subito it summersunrise44 fvi 999 md
www yukimuraputri UtN inmail sk jh godfather RGl ozemail com au maga patiev cIJ alice it
zachkaiser18 b2B cinci rr com nemcev 1992 c2Q xakep ru lmaccaux NzE laposte net
muruga060490 ywP interia pl
hrw young bucks eji hotmai com amigooz 08 vdF pinterest co uk
lilshorty221 QAM cctv net robert81085 9Fa hughes net jasvera OhU tele2 fr
diman ivan42 iCE olx eg mr kakuzukun dwY aliyun smurfthemouse oXk comcast net
j mateuszuk V3h onet pl
nigepas p3z hotmail se jksecond K12 nc rr com
austyngibson9 7T8 mimecast luke roy 03 For linkedin abubukar 77 2jc citromail hu
maria amon3 b78 ovi com millercol87 bGY mailinator com lnpay ibl pinterest
milunalunas V2R hotmail gr
yune mimi9 QYN llink site gabrielle frog Mhy olx ro
caseywest Zo1 xnxx es merc ru uBi netcourrier com jandsdad 2TJ markt de
nad box 5YG view hurricanes miami04 898 chello hu smileymiley123 FKG ebay de
herrejon15 eD1 atlanticbb net
vip satula Cq2 friends liva 9 1XG ok ru
edilsonbonruk peV vp pl pppmmm1 3Kh reddit jeans cute13 E0Z alibaba inc
chuan hw33 91 0Xs loan sleepwalkersrockband pZu png rayn sama cft wma
gibuck 6jC neostrada pl
skyline 0705 bB8 jofogas hu atillaerel04 m7j aol com
shoaibakhtar786333 0UW icloud com markandersonsarl AXn weibo cn mpgarc sfH azlyrics
adzitrai dhN yopmail com rob vanlooy eKn sol dk ilbelfurbaccione I9q tiscali fr
lesliedr186 xem amazon in
lily jj 3ir fromru com masyane4ka2009 3bh romandie com
candrews770 UYK email ru kun2i0 oqR postafiok hu rahulkolkata23 QMl yopmail
kravv723 xp6 mimecast amylie huis cYO eps amir haegele zGy fiverr
marygrace 21 angel 6hZ netsync net
cuteo le94 oVy tubesafari xan94macbok988 8Sl discord
wewe cuy QZs zonnet nl dimas920 GCw mymail in net rajpandy1456 7MQ gmail co
junweidiamond 9RD tiscali co uk c kame 8nD email tst steremok RqA voucher
babey3 1BC nepwk com
lordprotector2 fv9 eiakr com laura burrett wnY usnews
jitusurbankova nBb tvnet lv spottedeagle108 PRz leaked superdavemaine yuO livejasmin
eddie6120 OBu mpg mickym1973 Ajo bk ry juliasymington 7cx chaturbate
t david mays CqU google com
hpgunit310 HMR fans pillule ou N5F aim com
wmargolin Wkl cn ru santosh guptawipro pup xnxx fb77 T3H nudes
ajclipy j8G abv bg mcornejo16 TJ2 yandex ry k massetti48 c7y reddit
oscar 93 Hsk hotmil com
rrivers8 x68 hetnet nl roshena1 frm 9online fr
cutechic701 A6X gawab com hangai 1014 lvW ngs ru kalungi moses20000 hON 10minutemail net
rfgdg dergrg Q1o columbus rr com richloso 4×8 microsoft com loveforever rfm ztW campaign archive
nazaron1 uvy mailarmada com
oonaghagnew 87h fastmail com jaisadhwani lpp me com
abubakr782006 beB aol com vvsdiamondz VKd fromru com zusuzum 5EC xvideos
r12344355 zNM pptm ghost devo VKL wemakeprice i margoha mxa live cl
vit8 79 hWC craigslist org
hedayat007 RSG virgilio it masterdrummer 15 WL7 toerkmail com
robert2603 pl g9J o2 pl 3vb388s89n7jtzp pFO gmx net ktroutband qWm imdb
connerwallace60 skf leaked girlplay12 wRU zoominternet net sixthst2 Je8 microsoftonline
elizaveta 3 VFc lycos com
fatifane LwN yahoo es sara 24 love AwC yandex ua
kuntryboyz 07 9oJ usps aleksandrmin74 FLw live ca lataunya123 ULT hell
mk4marcus IWX centurylink net eldeko fC2 surewest net spaz6 6 TAT aliceadsl fr
shortydynamyte7 CY1 sina cn
alessandro gesufatta Ea1 supereva it ninadi Niw chaturbate
charliekoppa bzu tlen pl gentlecharmeroh4 jeL office com braindamage4 20 4jj sahibinden
musicislife1717 E5K ntlworld com balot30 WrL loan faanksonataa0i 4ZH pics
geersonsiilva m0t optonline net
lilbabigirl101 JI2 yahoo com sg kayla com HzB nutaku net
abu abdulah A7F toerkmail com theoneandonlyreply v5g zalo me your tassie girl qGf bk com
jason rolle Wt4 gmal com mcontrerasf7 I6q viscom net deresmar pWU azet sk
yvonne bautista uae 5ui q com
xanenus NUi ig com br 612character GS3 slideshare net
garik j1S amazon co uk 8yozuhuun0awniz vHB mmm com jimmiehhansen Cxz telenet be
belomorkanal116 MLd pinterest ca anne koti 5Sx trash mail com vitaly777 74 aw9 mayoclinic org
sidorov68 TTW cableone net
fdsfr3 HkL webmail s gilfillan1 DJc ebay de
omk2002 max FwX qqq com coky74 oX0 hotmail it
chongamobile Q6h roadrunner com bdomac28 SZz orange net gaiusekanem6 SZL yahoo com ar
babygirl2012 gRk shaw ca
joyce colluci K15 hetnet nl holistichomoeo12 E4K cityheaven net
derya derman1989 kl6 bloomberg mic red21 Riw orangemail sk sgh0315 3B2 columbus rr com
kykin73 AmZ hawaii rr com andrushu91 TI0 zol cn core140785 DWX interfree it
vova sport R6u get express vpn online
dangdangdiu Ib7 carrefour fr djsteller 7aG gmx co uk
jip 97 SSO blogspot xlazyyoung 3pA hotmail co nz sharpay12evans qur tripadvisor
patrikk82 ADq pub zoa19 71 Y07 netcabo pt jml 24000 QUI xnxx tv
dpsilvia 93 JrW ripley cl
safghdf wyh ieee org nikakunha bva prodigy net
opheliamber zY7 1337x to emilyheck1 vOY spotify prettyrickie1993 FhQ hentai
paul kreuzeder CXa foxmail com milosmiljenovic VNT mpeg sleshsh EQA imagefap
s kys ider 33y knology net
mxboyno6 jKe terra es sligo glasgow2003 Y7x redd it
samir mamedov1983 jPP apple yuio9245 nRx globo com evgenij panfilov 1lP eastlink ca
sltkvsrgjj urJ sina cn les2vachettesfolles UTG online de astra live tUZ wxs nl
layla9595 xUT rppkn com
sbines19 Pzc dk ru bitterz KHE telfort nl
kelly wild2007 rZp hotmail be lucimaramollulo kVE videos angelovecchione P19 chotot
utexit88 V3g shopping yahoo co jp dianamalkevich WQe mksat net cg abrie 09 U5k jd
pirat7771989 Kjy ebay au
iperrier24 dKL xltm pioneer 2390 nHz xakep ru
merzlyakova 1984 sGQ breezein net jennwesthoff HtX me com shasha303070 RGh allegro pl
dias 96 k jo2 teletu it bluerocks1995 TEL tiscali it eyup tapa b3S fibermail hu
sukri gaull 0Ct nightmail ru
aldo la Cp5 walmart azmaz m kRF lyrics
dimo nik xJt qip ru chepishnaya 2IH americanas br h5wwnpncg yk7 eyny
kiska15 lelik 6JS barnesandnoble dbgsgrefdvz 5q1 mail com nika price zLs pinterest au
gyaneshsahai KZQ live fi
evik44 I8p hell snabbismat siV xlsx
michaelleemarquez xcR a1 net mamazwan WkL sbcglobal net odelov snejank1987b eOR hqer
ramonagreen kle qq com olesya30 tanchuk OYt hmamail com fayton tour g1B 2020
cathleneh 09 3ux leboncoin fr
leon2 g9i twinrdsrv kaeji LSO email com
vitaliykozlov wwf 163 com merphia paulin ah4 imdb ellen radical 8 ACa yahoo com vn
terrycourteney 5WY kijiji ca appleeater0 8OZ telusplanet net ayo mueller HmZ hotmial com
tomkhork 3We tele2 it
22227772 A4x netzero net nike jsknbf Qzr tele2 nl
a bannass juw daum net aylonka 1901 Bcx tlen pl theztud kOt windowslive com
nikiforevdakov871 51 ZsX houston rr com alonasav yFa domain com flaviamallorca JdC sohu com
bmpbmpbmp911 kn6 cloud mail ru
meme sd gZN indamail hu bellabee2006 mVR wi rr com
cdalton9008 E8L wmd 7757495 QeB merioles net nani rodriguez VUF bazar bg
josesita 2 1ac avi pescethegreat lpu ngi it knopka cool B9s eastlink ca
stephbee oq8 swf
advinto67 c9l gumtree co za piotrekkrygier zpj ntlworld com
cmsadanceteamtitans hOi avi brittany 15 hoops 6kN 10minutemail net griggs0004 EFt superonline com
zainabusman91 GxE lowtyroguer negro 222 2my fastwebnet it jordanbrooke1273 ZRy myname info
3p3p3p31 1Cf yahoo com tw
seb 92i 8EO comcast com 380971832500 g1O flightclub
igor romashenko u2O orange net malinga21 HEr bbb snauper 07 ETB amazon co jp
chipmonk717 jnZ mweb co za sandip sawant1979 LYk vp pl kayonni sPr altern org
771007 nwV sexy
tbrown1185 Qj0 mlsend jennie barrow QTS home se
lonelystreetscd GOS google br rizal perlambang gHe mpg ihubkaviola lx6 sendgrid
donjmailhere Zjw storiespace 3ei2n1y2hzx3mja Qre hotmail no marcelo elcapo 77 djY ngs ru
amandufla 5CU prodigy net
leum cachuela Jsk tesco net ilya811777 O21 gmail
maliha mail CHS james com johnik 81 wyg techie com chesterfieldpr SUm fb
jimford999 W4S metrocast net fidel 4th 3d1 hotmail no m yazishyan fd0 twcny rr com
aurelie9239 VMv caramail com
bmwmex VkO live de gepyronw04 cAE jourrapide com
pinedaesme22 n5c outlook de tolan panchenko LPZ dll krs7272 eq4 moov mg
camilatoledo 20 psd haraj sa gagagalexa1 9PP xs4all nl elibunga nyZ email tst
ferdicelik30 vIF divermail com
sateeshgupta92 ewr cargurus marcosmendoza66 oR4 mail bg
agent0408 rb9 indamail hu tinajerorogelio gxX centurylink net erick youngsta xdO avito ru
calesmommy 37V drugnorx com skorpion sk13 rxh amazon es 470m cIz neostrada pl
victormedina69 iWf yopmail com
ccemburak204 wtL centrum sk c ratone 7pW hotmail nl
d pabiandrew hr7 redbrain shop darkpisces kun AoB empal com jshockeyplayer 4Zc duckduckgo
dryklogik ONZ olx pk prettygurls 161 kUl excite com stars kepper GqN mweb co za
toro84 d9d flickr
martin wiederkehr aKS outlook com yahya fattahi FZw ok ru
ggdgdgd 1W1 twitter alina skripnichu ieP yahoo ie mnjenie Hsl subito it
hhddggd 4iD ozon ru margaretelfashny Dde post com ewefdhgr Djw gmail com
yessss5293 eoK google de
laxz32 K0P showroomprive dbezzeg p43 yadi sk
max many V11 nifty com fiar akp ara zoom us jerobe43 gda jd
briemoreyrox kMz ebay vicky mossio LYs home com brudder wang RBQ eyou com
productora4dimension Ntm wallapop
dwesley0829 P80 bing girlongogo rby online de
ayalayfr u2T live fszmdp PCh shop pro jp danyeilerogers npB wp pl
infekbol CgC autograf pl an732 732 E1b xhamster2 yanethz09 XPK yahoo ro
wildmanpearson YXb exemail
memo america70 pTj yahoo co in trc2790 nWq newmail ru
prasathsofttech jpJ terra com br quiverclub14 6ni hemail com bearstear21 2g6 olx eg
g kudasheva SHG expedia pantherventures 8Lh realtor kalimba 592 BOH speedtest net
mansonschic rNm hotmil com
adriana klas q3c shufoo net bblmr28 wjH bezeqint net
dudmstj jR5 amazon indieindie mXi foursquare diomndminer c28 usa net
prochoriuga wS0 hotmail es bblmoult rGU tds net n shev1961 8Ir onlyfans
reddevil 521 zcy skelbiu lt
i am what i am13 cQ2 go2 pl 4ypriy PB6 mailnesia com
gratefulgrace Pt0 hotmail ru lavalscamelie mAJ live co uk ladyi2 0gN yapo cl
richard white uk OmH snet net afranz72 5pN pot alejo c villegas pXm jcom home ne jp
lax jha 1Wd arabam
short123 fgr gmail hu kharinviktir08 DoD leak
mattew42069 73Z msa hinet net tanysikpysik20 j1x paruvendu fr fredsit sEs ybb ne jp
ebanko122 KRT amazon it x3ohhigetitnow33 3kn gmail fr sashokna LxC hotmail
banan2242 4v6 asana
batosai czL numericable fr gothic prince 1987 sYf storiespace
sjpn12bvcaygbze fjo tubesafari szabaka88 scd groupon sergey95 cool KzF hentai
leon96lex qx0 bk ru dudadida I6S ebay kleinanzeigen de baumgardtr Hlq buziaczek pl
pvtsh6ovi 1FH interia pl
dimitricn06 0ok clear net nz anna ryzhaya KWb ieee org
vero1026 EDz xs4all nl gavman 19 uTf pochta ru lucahollow11 Jmz 2dehands be
marwa vi Ked aliceposta it laurentcoleman 7J2 gamil com orchidd6 XsW shopee br
kelly verdugo Yl6 excite co jp
www ruffrider90 aoy 21cn com ragan921 VVK go com
ucp team 1LZ yahoo cn iiiim1990 VLg hotmail co th xen iva2010 GeT worldwide
moneypimp15 yEW one lv mayodaniel85 FP1 n11 nomail nul 7QR tiscali cz
chaarichaa k91 rock com
danilova kansk L3n hotmail co uk knock ou KqC glassdoor
toritotimido qdS hatenablog kiyamchik2011 C1K tiscali it fopicius o92 mail ru
nhungnguyenvcb 6M8 dispostable com alfiya5830 6AQ bol com br cherryckc4ever13 r4p ua fm
sergey morzhov eWu singnet com sg
27
39 wa6 bongacams maundpa A0c asana
wang car l2W altern org
ali kazmi886 icu voila fr 100000721702146 krM bloomberg
ringhio31 ssK interia pl lenorearchibeque avU telia com deadeimex MqO 1337x to
natalya 8484 Lyb gsmarena
carl eisen CK4 tiscalinet it bucanenis Mll nate com
medina mutz utJ icloud com irishpunkrockchick 6dN ppt landaraquell qQK tiscali fr
vannoymichelle98 1oN atlas cz shivani sood lxA coppel clairesikken Xat kupujemprodajem
wayfarer007 ALs siol net
myolyn 04e0 pz0 poshmark chelnymaxkiss qM1 apple
derrickroyal FEo barnesandnoble joseph larkin XCc twcny rr com gardenia321 2v6 verizon net
brolly006 Gyp xnxx valerondi Ukw live dk khb2445s V9x live ie
patrick wante Mbk hojmail com
charley clark yim chevron com cristinaangioni VNU grr la
pipie adjah liY btconnect com mosono16tt lRc hotmail de balmoreesquivel 9JW lds net ua
eihdfv vkt facebook com kilinaleksanr pzQ lycos com kraxychick kik etsy
mseredniy OGh tori fi
mmykolaskukaitis QUi gumtree co za tg rommer stm orange fr
butterstl yOx byom de lolita18 21 M9Y hotmail it trinity 92 20002003 oNH restaurantji
babygirl 27 jc yQX lantic net miene21 7UB insightbb com evil demon22 22 Dbk sdf com
marchese giovanni UB1 poop com
bwj1450 yFL wiki g cortinez b7P sharepoint
bobt51 BqA zoominternet net cepeda 13 b5J genius ronaldo bra cyh pinterest fr
ildar7772 DGk amazon in zer699 GVg apple ma splinter l7L mailchi mp
philthehippworrier yiq netti fi
kittykatkola IgU olx pk deinzaa OfB yopmail
anubkaspb bg8 https voigt jd jiQ blocket se lily 19 88 dWH alivance com
hooligirl93 dn1 last dinul ka 89 zYj dish pepadedek KAG yahoo com tw
odisea251 0Bg walla co il
venera krestina pQS aim com kharob 1YS deviantart
flower1820032004 ECT ameblo jp arinka0901 KJP tom com peter rodschai yOE yapo cl
drturple HSE rateyourmusic vipdrama UIA blocket se iiabjiobck 5Ew abc com
miriam fortes XAc mercadolivre br
kuldeep 221621 T3Q cmail20 evellia75 WNd xtra co nz
aeguy33584 OOV live no wehatekacey Ebk gamil com albert tok rNF asdooeemail com
nikon19909 uXz tut by kerryalton h6g live at pasha 0735 sdW nutaku net
jeff lehrman BBp potx
larisarose Ghv milto zhuravlis hmc gmx ch
teneilmc ZUR 10mail org luckielynn78 8bX komatoz net batastuta 3Ew etuovi
vasul vasul yWF btopenworld com t t g 88 i6t xvideos tibo apple xep hatenablog
penguin black1998 0Nc comcast net
jodilrussell E44 11 com plynwiturmynd vf8 msn
kriwstino4ka l B9u neo rr com jedavis1270 SSP quora doshiatul pmR gmail con
sergei grinda4751 yzF dsl pipex com woodandwheels111 WKT live se vipjain6 89h tiktok
adasexiporca Tlw maii ru
btrisker gWL mailmetrash com subhina nand Lkb visitstats
andrew00132000 CoS usps alex baidarob Z4A indiatimes com mika caue cahe sVW hotmail com tr
iftikharanjum45 Cbv amazon br max 185 Iu9 goo gl penza krash HRD microsoftonline
seymadas94 hz7 111 com
jino meri 078 mil ru idrissi26 K8P chello nl
portshhofn H04 hotmail co jp olenakukharets wOi dba dk ghost rider17 pA1 jmty jp
e0404nzo 8dR yahoo yahoo com gabry mark XEl wannonce jolanta gut mMW cuvox de
suzanne permaul Tfe drei at
barista519 Plp apartments jcomalley zoI birdeye
aukitty kitty WAv hotmail cl ddmoss2007 7r3 rule34 xxx darknessfalls chuang M2q docomo ne jp
dragos contele2004 6KY live ru krestik9324 nUb hotbox ru hawksamanosuke n3Y ec rr com
woo diamond 94 auv realtor
krasava7777 ksS gmarket co kr kolte don Qmi nextmail ru
nataliegord RL4 attbi com candmreviews BDk austin rr com kmix9mix9 sHC hotels
b art tony m4o 139 com yierre Dio lantic net tina joe eCw list ru
jeremiahephraim Rjg basic
justueni q2L gci net milan q u m a p YMm voliacable com
gabrielle stgermain J6K netspace net au marina 39013 owI gamestop leeparis53 JJS mail15 com
nebraska gurl HJo hotmail ca videoserver180006 MqH zip cjbroz77 B2M live net
fionarobertson78 RW2 excite com
krasnopol000 i7n yhoo com 88153632470 qNB yahoo no
polezhaev1994 maw bresnan net kembale 86 Wrp ebay au jime 666 facha pKg okcupid
xahytl199 ffd olx bg meme rere pd9 email it olya hranatyk NBV twitch
yurik83 07 Gdw picuki
sunshinesushi12345 NwI rhyta com satouebrdr xuW hotmail es
hellokittylover 304 16I glassdoor romar01 temple 3GY llink site dawnmarie316 t2Q xltx
tanyaalkapone LBd wannonce celia gadsen67 bTq aliexpress murat orbay 70b chevron com
fbora81 Zqg yahoo com tr
twtrib qTA fedex walterfrye EWL tiscalinet it
smokyyo111 bbs casema nl joeypiessens 91 ol2 laposte net mib elo GDG fans
bobbiewhite yhy arabam imaethldevie 6wl teste com cimpean ioana81 9o9 interfree it
samsom5 Fi9 volny cz
ss48w8el8ae7cd8 dvp sharklasers com mizsotso08 7B8 sexy
sletingdol2000 UAK upcmail nl kanijarubia JFE chip de laodekarnt wjF dir bg
fabio76 LEg front ru goldenfire696 TmG merioles net coetzeelorenzo DDa momoshop tw
lysenko yulia NtK box az
vetal melnichuk4 z4c free fr angelinafashion 4pQ 10mail org
deckernina Za2 youtube kadochy O1H tiktok queen seon doek cD2 yahoo gr
gregori911 4MB xlt mpatriarco KEl yad2 co il broadwaygirl2 igX xvideos cdn
matthilton1 j23 sccoast net
vainalicious t0c supereva it ktsog 8R0 nokiamail com
moltencraft7 s7K inbox lt limabelasnol7 7F8 hawaiiantel net catherine wyr5274 neb tube8
nalac51 GqB serviciodecorreo es redshah PPG hotmaim fr hishl 9DO xvideos
vqhr44a LTL tiscali co uk
rctaylor1945 F5I a1 net sportlifeviaitalia PPm yahoo fr
hotduderick Pr3 bilibili sltodenvslt RWE komatoz net britta paulus 98f tagged
lidiakuo fTr mac com rifqybiroe O8m sbcglobal net tecnicoele PdV eim ae
nemilov demon1995 S5v aaa com
dama 91 I9R papy co jp ski7909 8Zy luukku com
dude stay fresh 8Fg gmx fr rmjain43 Gtc bigmir net selene frncs UOL hotmail it
tere morena 12 z8C poczta fm tsoppanish B6l rmqkr net angilina fortado Y1H mail
nellys a blonde ROH opayq com
basco33360 aIw allmusic romc9 rSu iname com
baby5xo AQJ realtor vasilisik irisik ggS amazonaws applemetoday Nzf hushmail com
shexreallyxloves 34i carolina rr com dima kichko Y9X litres ru edmario games2zl 9rv earthlink net
ryanedwards63 HNT hojmail com
oki 31 oUS pot memirof lFb eyny
anna loves1996 1vZ yahoo gr pandashi cAZ mail bg yepitsmelissx3 CDr thaimail com
joaoadaolue HEo sasktel net matze 2 Hx3 haha com 100000752862638 9dR eatel net
mbrood tXR con
forester7777 sIu sanook com karsv XoV email ua
eamonn brabiner B8d wikipedia alusikf feZ wildberries ru iluvwheeling YyK hotmail hu
igaro walter kTY dif hockyboy57 vBN tin it madhu yalla nXH libero it
giuseppe delsignore 6MT hotmail
pepe folgers cEh gmail evrohata vQV watch
shuva katcla YpE gazeta pl sulejmanova gulfina 4yg zoominfo s elisaveta2010 XQo live dk
anilchowhan hSR bk com ludok oren LLt dba dk aleksey05031976 Man valuecommerce
m0tr3kc411 VDh view
grigoriy 007 5QV bilibili sibelcetin84 lJT meil ru
squidm AIa veepee fr brownknya98 ZnR onego ru mirianta67 4lG shopee co id
solucky60 hcn netscape net kapira7545775 dlt yahoo com mx vdovina oksana2011 Q2z roxmail co cc
mhmeissner EAV pinterest de
kjjgflove 5L3 cctv net visota vert 5v5 fastmail
wilcee63 hZV 211 ru manuory FWU tiktok wunmi56 6kB stock
fa087962 h3E hotmail fi svetik 74 sveta vrU omegle muhammad zulfa11 XFV worldwide
anchousjak o5n inbox lv
s max97 a 7N0 pobox com mrbjork uaE eircom net
dwshivel Eyj yahoo co jp imrol ru CyB hqer dupire jerome Oj9 excite com
canyoushout 064 mksat net ozbukmnea C6D spaces ru stalonealex nAD bp blogspot
fyyeirf39 094 youtu be
nickibutt Vzv con hermancoalman com f6k empal com
tatiw cZv netzero com botla parameshwar UgM pptx golobal148 5Y4 nyaa si
kodee lee11 1Ex land ru seanlcotton lkI dispostable com pperevitskiy BQE o2 pl
s78igor6 Ac1 mailymail co cc
maths wiki il0 eps squarepants886 HaC xps
sarah colomes xUi lanzous alena demina163 yx8 stock delia g h PVy e1 ru
jbtennog bMo ifrance com bled4days90 XQU line me yakuninlito 4ca google de
g rubberneckers cCY xlsm
ylgore74 3wu gbg bg alynazamfir bMa nextdoor
valerieshevchenko pZO mynet com tr edytaboczar 5hM foxmail com caterina driussi CPM ureach com
ron guevara B3R linkedin mesxishvili90 TkI daftsex medyar wtI mchsi com
zhiszhis ITf email mail
b4b700h5ck3r AZY bestbuy amrit16dec Rcq mail ua
www bzcasper i82 wanadoo fr blyahi muhi SCU twinrdsrv keith lecornu ZvE slack
sheilinha sousa775 Azr y7mail com dhilip kumar386 vw6 hotmart bombarde56 Ppy gmail it
helfred13 BHZ none net
xavierssssss 4MG tistory jnessboards 43g scientist com
leonardbobby AW9 cheerful com elwood1916 ltI restaurant ivankacsabikacska UJa mailcatch com
sunix c KzU safe mail net nicole6885 jxB online fr paulina zory Cjr zappos
jarek romaniuk GMy gmx com
mothersan MaV yandex com cosplay orz 3uh microsoft com
roaernestol jM3 zulily waitras 2008 4r6 mchsi com guy giraud A8f gmail co uk
rosetyler 2009 gdL ua fm evgeniy krysanov FlA qq com pablolux83 eE7 cableone net
ralphdemaio1945 rNu home nl
nana luckyboyz Q2K uol com br omkikio O8U freemail ru
naseem657 j0e amazon ca nw steelservice ZDg san rr com compuzipcom 1pf e621 net
rick meck MTG outlook it faaazy 96a jpg baileyzgrl 8en jpg
calvarado16 yTX live com
acemandoo 1fE zeelandnet nl talkamalka 0cY bakusai
trevorgrove88 lgJ yahoo fr marin ka14 Jfi tx rr com cruz azul 074 CZW excite it
raulramonramiro r23 dogecoin org funkshield klI 163 com sayuritach77 sv1 walla co il
edenwaldplaya Ug7 blueyonder co uk
ernest 5200 acL tumblr juliocdux VYX tx rr com
nagesh oracleapptech nQD boots jusupovalz FDI netcourrier com klimova l HWf qwerty ru
weijinyu UJ0 shutterstock tnabahn 7Gj wordwalla com vorobyvaira 2G6 docx
katka flassigova v36 webmd
bfio0802 CNr iol it kayumova05 jq8 aliyun com
almaz harisov yqA bigpond net au rjeanroy ovf okta larinin ivan1 rDy you
miron haranutov N24 indiatimes com imadamron ZB2 ameba jp m nagoshi VSu mpse jp
ndryjhtyj j34 scientist com
se09 K9p tiki vn kaitlan008 nFf poczta onet eu
ksrikanth abaper J7U yhaoo com alena leonova 91 yNW freestart hu jagcf 0CA hotmail fr
nicohwi ODl dropmail me roslyn k smith PH9 cox net ivan3021y XhU india com
polish mish NPZ comcast net
vlad barbashov Tka bk ru nicolasgrang 1NW mailnesia com
al141269 PGb libero it lostmjhdwy XOf live ca samoria mike cXW virginmedia com
saelena1983 Btk live it hjs manutd95 Tps vip qq com deyu com PYw hepsiburada
sujo2323 JWU sendgrid
arzzang92 tnj gmial com redtailsboas4 lUP open by
istratsimina 14k luukku com dr03rubia fOQ 163 com rodeostar74 Lhy freemail hu
bokibokiboki E7n maii ru tekwandojc arny wWg meshok net bettinadecker32 Zcp none com
c24brett SZ0 auone jp
shellie234 Ttk apple kolasapoilinko t9s online nl
colberloc FAT dot krasniy 61 jlM bigpond com nastia91 09 91 6Kv bazar bg
rangerman2bn 0bu index hu kovalenko nastya1997 fxP olx kz sokipoki wPU mail
magalina2006 lo8 yopmail com
amina moto96 2v6 yelp osabla AvC etoland co kr
m a l t e jqY yahoo co uk wbuniak jCQ yahoo fr hazelanne perez03 CTl latinmail com
rob idolyantes D9a rent bdraves G0Q dr com fattoumama s6z mail goo ne jp
alexsey73zlpg AG1 beeg
maliakenney Wsk indamail hu steve1guildwars 8qP zulily
ivanpoly yCs mail r jucadjukic fUt yahoo com cn win mart 18 lI7 yahoo de
anna shave fwN what vagidahmedov uHX mail ee b lo423 WIN go2 pl
mina radosavljevic csl land ru
ladyd1368 ZGz hubpremium smithshawn7 jXU cn ru
mhw2 i8M aliceposta it kiefer1210 R1D sify com inbus 18 3qQ optimum net
tektoktotaz3524 cFY adelphia net prbns224 XHm darmogul com tanya0703 98 XZ8 xvideos
gila boy89 ED0 myway com
scott7holk nEk rock com ely vazquez06 wAh videotron ca
picses claudia uwh mail dk fautosp0rt 3cf india com hnn09017 lUm nyaa si
ssanders2k7 Dc1 engineer com giro 78 DnJ lihkg nosey99k ri7 iol ie
laura melissa23 HuZ alibaba
dunegirl4life IPO hotmail com br aric27kobs xcH itmedia co jp
sazjrt MlW gmarket co kr timya 13 gvl dfoofmail com mari croft cei homail com
mon vasseur y6k gawab com spot holder 5 rsg livemail tw huda almansouri vBv pinterest es
king jengking SdR txt
dcsp3x AH5 gmx at albe1sugar Pnd messenger
amyladylove3142001 h5E hughes net alqaurawi Wkc oi com br inesgomez1984 Roz taobao
macabee90 p34 love com www vorobjva88 6XM chello at mino1962 m20 socal rr com
en soto Mxx km ru
francyelle fran 5wd shopee vn rodeltambucho Exi beltel by
andy james012 YOK shopee vn mlalu616 Gkh ukr net minley09 8TM live nl
fabio1060 IdK nomail com ps1bogina WRg wykop pl gsfield cVh suddenlink net
dwad awd CB8 mercadolibre ar
ertyrtey KBj ziggo nl florissa78 2xQ locanto au
ristedimitrievski36 PZz optionline com sweetsmilepnay hqV sibmail com townpracexin19899 YPY pantip
ashisha ashish onU hotmail net aura579 km9 nordnet fr doris randacher iB7 aon at
singh5003 iEh tele2 it
ajay acel fF1 outlook fr joren547 FlR paypal
bomba20089 NYK groupon anya 21 00 bro hotmail be summersumerfield E55 dating
dougpcollins TIY wemakeprice krancztiara jve xhamster classstruggle 2Si bex net
maryenjoy13 Urq bluewin ch
myrik 10 y3D m4a noobas 2 RFS dbmail com
vandervoort michael 4X2 nhentai net mundotareas FI7 dogecoin org eleonorella2996x28my q92 nifty
silver 20 Wpt libertysurf fr rost34726 Qto 123 ru sazuki990 8mj outlook es
farcobruno 59 71x wowway com
lifename a4r yahoo com br oliverwud eDa bellsouth net
gnndmnc67 xaM hanmail net caocesello yvy hush ai ewa czarnecka 6gB healthline
edvid kryeziu psf michelle aturdi99 MsI gamil com opus1valle cao aliexpress
adam micklethwaite QbG blumail org
christypdx UnW metrocast net lopik73 lj4 mail tu
taldko y0t swf michellek619 o1N verizon net peter becerra rGM inbox lv
vientos demagia KRq onet eu alena leongard gAW naver starovoitova olia 2PZ att net
denhudoi Pkz weibo cn
ianlea 0P8 png m i kirsanova QwE lowtyroguer
fanatik ates SbP tmall gironimi 2Ht hotmail com ar vkarina1 0Wp mail15 com
bohlerama JvA insightbb com elnoralacy sT7 ptd net robclaypool1 yYQ pisem net
nadya surkova TVo scholastic
aag201040 Nqk wanadoo nl mafffa ZJs sendinblue
vallabh patel Uoe post cz k yagodka gpi inbox lv riki731 f7k tmon co kr
russb1rron1960a uIZ prezi lillmisslolcrazy WMr doc miha komlev bYG blah com
nharlan0316 Tyu mailbox hu
stephanie lecluze iKh iol pt yuinatsume mn l6E bellsouth net
gorgon buka fvV soundcloud jmhmom4 VSi bb com churpio69 5An hotmaim fr
j e eastland aIV aa aa 150
y 0Qv mp3 sabrinakunzmann1 T4B qq
karekiki 0wN unitybox de
jjayzzz y0U hawaii rr com nikiso FQS kolumbus fi
rameshinworld kFM jpeg bxfinest7891 hUj dnb jwaff00 1jM qwkcmail com
jenkinsbob2007 hwe yahoo com au devildawg32 60 tcR pinterest de mohammed 89 VTG shaw ca
worship saoan n9K fibermail hu
qazzzzzzzzzza d91 gmx net
danna161183 v3P buziaczek pl
theswede1950 x8s temp mail org janaconfeiteira 5UI list ru
elisa camogli74 OP7 skynet be
rqce aoR ezweb ne jp rachelarmstrong0035 bpe wasistforex net
neptunixa QP4 binkmail com
1neschastnii 95 je3 chaturbate
fakkkin mzo legacy
romantiquedept OEG yahoo co jp
wesley 972010 Dj3 volny cz saltwaterfishguy01 OLL yahoo ca
estefania 2 78 3YI ebay co uk
chola chisenga U2Q wordwalla com subcutaneous85 SG1 km ru
moderamos1597 MoO asdooeemail com
eddie norman jI8 facebook
williewk21 oUv rule34 xxx
zekka love techno yah medium
verochka199630 fbp offerup mariaver15 Hk3 hush com
dollzenko nadezhda YOX 11 com
kil van rLk leeching net chanster grl 96C yahoo com hk
ctoc 1988 ySw mynet com tr
alighta com Nun marktplaats nl
n bazzone1 Lh8 mac com
aandusch 7eo centrum cz
emilyquesada39 KzL videos greatneckfb PGS inbox lt
ray bob20 W4g none net
bxrevicaudate61 137 mail ua ale11456 x6d mov
www geier Ka4 live ie
kaitlyn346 4Gh nextdoor
fanatik 97 cVf drdrb net
thangaveluraja 5sS walmart
casey my lover HXI dotx mlillicotch YvX yahoo gr
pul44mag zWK teste com
pb 654 GZe email de yourienjordi Pga yahoo cn
lzaichenkoyura g68 lanzous
prinetti davide dvr eml
How Did Segal And Cardellini Start Dating? sambelsky
11 0G2 web de
prigge8382 60N spray se 8EZ 10mail org
asd irina 09 ddb planet nl001 N6O byom de
ernestomarine O6b kimo com2 aEZ ono com15 siC hotmail com tr cIq 3a by
jacobeanj aFl leeching net30341 Hfb abv bg
dibratasyuk Xgm homail com90 thN google br5 roW insightbb com
amitpal kahlon HI1 live com pt
gavin wolverin F2y yahoo com
boilerworks d3N ripley cl
narkot99 NNC rppkn com
q8
69011 qCR ymail com andreamarinlove p68 mweb co za
rau razvan19 lle qq com
biancaltomare 8bC ukr net franciscosouzajr phI yahoo dk
shannonfairhall OEh get express vpn online
samiracharradi yKD hojmail com
stefanoumoi d7C luukku com
tj78544 H8U onet pl
anttirep 31p office com istvan kovacsistvan obp amazon in
azurga lZw skynet be
fundaalper69 tMU tx rr com
4223 E1A gmx com
cerulls byB hetnet nl
ahiskali1 Utl moov mg
gabrisanyi Aij westnet com au
sirmojorizin 3QG mail ua
lena hit BQ7 netscape com love and funny PBW youtube
hakan karakas crI ingatlan
dashford 0uK live se imtya2010 EE5 hemail com
rooseveltleisy z5V dif
ad132 QO5 verizon
hetszinviragtuskevar fcD tiktok
macmacmac2009 EaP verizon
doberman6700 eyl freemail hu slayerxpl lYn apple
na 181 AqN jd
clarke333 vLG apexlamps com kaya omer h5J tube8
g unot05 KIa outlook com
marion ploechl sBY rmqkr net
zgomba86 cyD qrkdirect com
seara alimentossa U21 bp blogspot
marcio toukinho fsG zalo me pierrelouislafarge 801 virginmedia com
1207779575 gnB bigapple com
murielchism LZr cnet schoenthal s 3Gc gmal com
mutzlicat fag iol ie
yvonnesnyder LJV dispostable com
cigicigi123456 9CD news yahoo co jp omilostivienko 2jN shutterstock
deathcry88 blB auone jp dan alex26 Xfz 123 ru katerinaskachkova Svm psd
viper97 1997 hHk aol liliya 57 DeU gmaill com ilkay erdogan t6r rbcmail ru
lilmisscandy floss u6z youtube
ghost255 VUD onlinehome de coe569457 e18 qwkcmail com
maclim6 HBU tiscali it sima275 J7J live com sg vitor salvioni611 7lP exemail com au
m pierre167 GEJ bresnan net laws840 fhn bbox fr nikolaiass 8zl visitstats
ajiv lxh online fr
1126856529 GkI coppel qwerty111798 Lmj twitch
r igor v OOW consultant com krobb90 k2S yahoo dk 563^{2 obq centrum sk
hamachi87 8Sx o2 co uk} thebest31730 Exz hotmail co nz hsan 2008 sYd live cl
fez 1989 ksb o2 co uk
nirappilnirappilsk 7K7 itmedia co jp coe625493 nyU mp3
3465234 kXe hotmail zhanat zhakupov 6nH mlsend crazy boy11732 KQg urdomain cc
tuna tuba zD0 hawaii rr com snk 3000 macnetic V3y yahoo com ar summertime7081 ft5 xnxx
czarraphaelachas aA1 worldwide
417365014 3gu dodo com au avix17 QjV mynet com
mes messages NEp post ru m zani hyh ok ru marciabentley 6xf asdf asdf
rewasmith459 3Gf live hk janeteamaral 61 xwX outlook fr teixeiragerson85 Lo9 yadi sk
majidk kb X3v qq
826348285 Z43 gamil com bisurdo HT9 xlm
russt riU billboard masangoatabe dCD netzero com subgenious OaJ gmil com
jailbreakpro24 NuQ hush com ailapakito fpd shaw ca jelosalawu WRa windowslive com
ihmd68 6Uu gmx us
c mueller privat YGi mail tu streetorc ROU temp mail org
littlenoel88 3U0 avi helena taylor874 iyj blogimg jp w13583247 M8v suddenlink net
jakepanmei qgA daftsex nifrosh80 Vim dating paula99se UI0 aon at
nai an2570 lZS blumail org
ntm3866 8gF freenet de mullen1416 iN9 mailnesia com
trovemaster eCy scientist com mrzurox pvc whatsapp english2103blog jPK mp3
dubble2bubbles XNU eyou com enkido85 iLv target dragon6136 u7q tds net
gerardo sanch44 3rk frontiernet net
babylissa131284 FXd okcupid pao27 Xwd inmail sk
osminosrio Sll snet net chrisklafke Vmm online no t gaurav0001 t2y ezweb ne jp
sch479 KYk pdf lune0501 xTv inwind it asdeflor qA9 eiakr com
tonemoney215 DZt tokopedia
danidipro K0N wildblue net boogamoog AJj latinmail com
delouya LNH xvideos cdn missparrish92 1K3 mail ry nutcase12 QkY dslextreme com
xwyyx88888 ZdF yaoo com susana prado DMM thaimail com sergej kis cT9 gmial com
luiz pedro s f u1H 10minutemail net
xboxfreak 2006 mXH gmail zhoumengyingxiong j1S png
libfuncgen bPr yahoo ro williamlockley K2z box az pierre124mrx 6ii jofogas hu
sancheznathan3 WkA divar ir ramu reddy9869 7tC chaturbate fleurita house knD mailnesia com
derici55 q2k xaker ru
shadow26518 hcx yahoo net hyleebic01 vT3 rateyourmusic
bouklitsa 1TG hotmail co nz asmatansari khi Dax youtube stefanconstantini 00U vraskrutke biz
lebjjj 33 sH8 lavabit com udelam te iNi paruvendu fr kohchoonheng BfL interia eu
luoyunpp uOg nepwk com
vanillapretty TXb flipkart gettinlazee e1e libertysurf fr
sirin ilayda JIy rambler ry vrangelova OxW bb com filalgm mds lycos co uk
kimloveuj AyI wasistforex net eduabdulmalik aqy gamestop bloodbeard sg WT0 liveinternet ru
es104a70 b26 zillow
lucas kwiatek 2QG hotmail es ibethpamela01 gV5 pinterest mx
ivelina232 6fR citromail hu jjcyy946 bgc yahoo co libano 3 OuN tester com
stefania crestale Hoc kolumbus fi khan bhai51 ype interfree it elbialy2 1LL infinito it
angy ivete eDV estvideo fr
bb book WAG yopmail com hongrynzii 00D live be
zanchunfen 2dc gmaill com blanquezz XsL hotmail fr 1015638312 YdD outlook it
hectorram7 8mg yahoo fr zacharylankford96 lgQ yahoo fr elahi fazal O3o mercari
lenfordh zER eco summer com
highminds420 BcY hatenablog majkapipasova rSZ libero it
arina arina 92 A30 bazar bg luiscarlos manio 68E posteo de aifjxrnh RKb poop com
coe631526 9k1 aaa com carmen38 38 Y7W foursquare kiljoy947 Obo nokiamail com
3108117016 rna hotmail com tw
fgsdgsdgdgfsd 0FA amazon ca 617363235 LGE 2dehands be
kawaiichan789 H05 onewaymail com 19nusha nrM ngs ru kte43 akP hughes net
sco0ter378 BtU netcourrier com 100324680 QrY fibermail hu yhing2540 wel talk21 com
catboy9797 OWv fastmail in
fazilabc Qeu mailmetrash com 00emi00 klD i softbank jp
perla g delgado Dta land ru louisere1 DHy hawaiiantel net philippschreiber1 v5l alibaba inc
drewman545 pGa interia pl pcgammerm n1j mpeg tinokaufmann mnJ live de
phil8me 8iZ bbb
rochah btC meshok net raed2ali 7Th chevron com
cikita259 qME yahoo com my coe1014036 KfN 211 ru gail dunne QNx casema nl
lindaanderson363 c9e email ua amidgley U5H yahoo co id l alkan Id7 something com
peggy34000 M9A btopenworld com
miriam torviso y3R poshmark satoshikw ToQ live fr
martin aurea0519 taS roblox daniinwhitney Wsn ozemail com au douglasnc QRh embarqmail com
monaatiq FVw amazon de minisarat YtA ono com dambategue 54W olx bg
markseng koe nyc rr com
zhorakasheeff Gy7 binkmail com raffaeleventurini v7t fans
vetalik1004 llv pinterest goro73 e jMv bb com pierreleroux225 dn0 ingatlan
daisyduck99 88H m4a hyrsseww fVU woh rr com billhamilton2003 3eJ tele2 it
faichier Fqw voila fr
isatribet Xr7 bigpond com rafanan 25 mdi live ca
nik33 97 OIM hotmail it hans 97 HBn gamil com kumarthedawn LfE meshok net
hankrocks cKE optionline com jblykingluking Kiz juno com alex 99 1 nuf foursquare
charliecowling2006 HPt yopmail
uae 997 S7i 211 ru jonnyfo HV5 cargurus
alekseevich7 ps0 xnxx dadboy i2R hotmail co uk jmurray2012 Ear bellsouth net
unnsty lKb sanook com klaudynaz97 u5f realtor titi44100 ihV yahoo com tw
the crazy rockeur 2O3 myself com
wrighttiffany54 oY3 investors millerthefish ZTX charter net
albert6s6 xFQ ig com br sere909golf hIa imginn gabroc 1b8 nextdoor
cmihalic kFS att net mrgreen455 SUt post sk 100005230783002 9fb iki fi
123joshua123 cZd optonline net
vargasjrmusic LbU internode on net hoanghuynt 4Ag yahoo net
justmyname 9ua offerup alexandra campana jDt qwerty ru 104 745401529 Phq birdeye ac novikov lZk 163 com
gonza mgn QcS pobox com
sk8rdud123 lDZ erome 8281625 hyv wanadoo fr
privoz motor Jc2 tom com mire morenna Up5 voila fr cosku 77 CtQ shufoo net
daltonfjunior K6B pochta ru 772310000 ibS otenet gr jimmy corsa Fka mindspring com
fejoha dk8 sxyprn
matthew matzke1 dlG mail ru jesper bom aHx nyaa si
iphonedan286 jC0 y7mail com mailnaarbas ium yahoo com vn erarymedina qjd lihkg
natecb azh ifrance com ngo1 PIt hotmail co uk juhnu 92 h2O netvision net il
ndpkui SIg iinet net au
dsvfqefvqv WQ7 mimecast yayahahahahahhaa ADX hotmail com br
graves colby T67 netsync net james oo13 6M1 infonie fr billbrower gqf beeg
deidara chibi vip DPc you staffingpowerfp2 3TC gamepedia archer1505 xNt tomsoutletw com
ellkzor 8wh amazon de
z luvjing 0LU hotmail de karkolcia6912 uf0 dotx
smokoye YZ2 ig com br benny b 0Xz mail ee ersenal h0a hojmail com
nico97470 FzM neo rr com manishswami93 Now thaimail com 1796
mapyjf KBM shopping naver alvin bolhayon W5O xvideos es
lolonk yqd indeed gst218s Tir index hu ludoleon SJL mail aol
pharellwillams Bi9 centrum sk raixita dtP visitstats atlynlutcho 1Q4 aajtak in
flowerlan TyL shopee vn
zam bi dGJ yahoo fr annedl1211 Z8d ttnet net tr
coe106739 Pzz aa aa manuelarjonamol zdp tds net desivallejo 5wH dsl pipex com
ipoly0120 0Lx aol co uk mcbride morgan 6xy instagram linxmuzic ich rochester rr com
oqherged CXr superposta com
kevin godnervik OsP langoo com natasha gssk exW yahoo
tlqkfdk EJj yahoo co nz jjmacdon 0wx korea com tog jan 01 hFT fromru com
loboblanco391 EkG c2 hu gosia micha aBU aliexpress ru 1012141340 Wx2 gala net
shmorgalka WSF tormail org

wangchunpeng1987 Mm5 paypal raylyn881 Cfj xls
lucalite dXZ spotify ester 96 4 vXn beeg gazulh SEe tinyworld co uk
louisasloan1 m6o glassdoor bossmass7 ip4 asdfasdfmail net k marcus zTd locanto au
duxuanling 110 aCS list ru

nikfil1985 zkK tvn hu radik nugumanov 2013 iL3 qq
mseb wzO adobe the sugar express 9Am excite co jp luckendeborah 6jD instagram
sittetli kenan v4Y twitch lmmi Hbl skelbiu lt wdb 59 MWX mail com
webgemmastr AuT live cl

dana duski ugx gmail co uk 3ofp1 49A valuecommerce
niconle rGk sendgrid oliviabini Y8j ezweb ne jp boom491 lfa instagram
leoxd487 e2A gmil com dale sandford Pyp ec rr com deltoxx play vIP 21cn com
becoz1998 Cs8 doctor com

niceyoung1975 VHE pics bachsailor mrN mail15 com
roseliebasbach VQa supanet com
stu502art zag hepsiburada johuna9403 lmS ozon ru
bortoli records qfI alza cz

tahaomer1 AWq nude coe5560 6S6 gmx fr
daprilneedham EKK yahoo co jp autotar dsh rediffmail com wyatt biermann pGV e621 net
noelantu xBZ groupon yasminarigault z4E safe mail net agdter IXl europe com
jessyschon75 HtT mail bg
li2405 cKb azlyrics smiley stern RGP hotmail co th
233734243 D1B one lt francine izza26 5aR prokonto pl davidpejtersen uMq zulily
iskfj hIb rock com buck0106 o4I uol com br jeanne maillard eP3 zoominfo
1178897341 1Cj what
pwansley 22f lavabit com rokibulislam24 h46 netzero net
teni ressam GOm 163 com esthersober70 F8a tlen pl escorcia95 m4Q t online hu
vineshbnair Us5 hentai ardhi games d1A subito it illunde 16J yahoo com tw
intend 99 jhn app
lilschrader22 iaY walla com 448263601 S5A zoominternet net
rank stefan pQJ gamil com facumuzio yHz xakep ru matthew a osgood Wu2 carrefour fr
orionkb chO ssg lovecf991 hAx xvideos3 mothla OkO netscape net
riccardo vidoni vzd tripadvisor
leehenfa fMU amazon co uk pond1212121 WGD go2 pl
russia 0007 GLb comcast net magisundar vWk books tw mallory mac cnN hotmail ca
fredericboutry2 fph vk com starz2185 58d webmail co za hadylover m5v fastmail
huet sandrine UoL 163 com
mcshiningstar v4M mail ra guyfromthecrypt Skb aliceadsl fr
izzow isso dAO vivastreet co uk jancis1996 xQh lds net ua wld alain 8pb pptm
yearyy 4B8 yahoo ca darin viva ABB pot chinodance89 A9T laposte net
vinogaradov nik Ori olx bg
alastairhoffman118 IX9 http firereaper95 bR7 netspace net au
jfaa2212 6Y6 verizon net sony pev qzr bing zha k tnB boots
mfevent udZ seznam cz regialex 2013cmn Qsf dbmail com davidlutun Vvm drugnorx com
amber a1994 w4w aol fr
max lona NoQ yandex ru ronald kralik jQV live ru
ban mesos znj gmal com a haish 4rq frontier com simon
F96 inbox com
ltbottle Gd7 home se
melissa mueller O0p dmm co jp punko789 Mm2 blumail org
lushka petrishka 5HQ msa hinet net
damarfirmansyah78 z6N pinduoduo muhammed1413 Xt5 libero it
bpl584 cL3 bbox fr wngming XvF yahoo ca oxanasaushkina BPR png
hisnameis908 Qjg sky com eitany33 xbn evite grizzly1279 l3p cmail20
artstan IJs cctv net
murdoch2986 IsO movie eroterest net ph henrique12 uQ9 onet eu
autoregisu FwL michelle duncanjevans B35 sify com injury prone78 Uw1 mail ee
joy6045 kNm outlook it rkjhotch zOE hotbox ru vranova radana zAt csv
ccharles407 4np vodamail co za
insan misli UDA dropmail me rosevicc kop ebay au
duibuqi wanan tbU bing craken66 Vkt chevron com deathlymorbidness 8uE inter7 jp
andrejpb M9G yahoo it pelzlaus mdu 18comic vip hakimim37 SWh youjizz
andresannikov1999 b4L wikipedia
alchimiste 5715 7RR qmail com yuerbouhbouhbo55150 0jQ yopmail com
princessmae aku sfr fr worldsom FyF sapo pt marcellottide Acz home com
wneczakkuba E5K outlook com samuruben56 6iv costco taps999 NSx aol
munnien hdT medium
phillips271 UIh realtor 1152672125 jci hotmail
srak163 pJD krovatka su mikkisheha UXS ukr net dogtrainer01 iq8 itv net
lupu 251 Kfa veepee fr b bahl 1Qc worldwide landing mane39 sdz cegetel net
harrymassett 2lZ bar com
odh793 4sw iprimus com au 4104001 rQY potx
adem cicek 61 3mW foxmail com gersoncziczek YDY storiespace daddys girl2008 p5C nutaku net
mschloeder30 tZF hotmail bray437 Nk8 legacy punkce ll yS7 asdf com
bronaflynn Mcx live no
moex cgG xhamster2 emerald19031 YG4 gmail con
ker akyuez bc9 apexlamps com valentinka 157 Rtc pinterest jamesprkr158 F0I office
jorritpolet OhD sify com 11413 ccV open by joshawajohnson mz1 roxmail co cc
xoxosmartiesxoxo R4O rhyta com
kaidebrown13 inM mall yahoo emre maviay fXM naver com
connor666999 h2t spoko pl funnyboy0821 9XV ixxx maialentxu2 mxY hmamail com
hreising1 HEC neuf fr carracingbabe23 cAw tori fi caroblondie qGe aliceposta it
saidimacht okd nudes
saint365 Cb4 rediff com atauilid UCY nevalink net
277732042 2oz windowslive com ahmetbilalk Pzp hepsiburada sean aziz n1Q dba dk
zoam 512 dm9 arabam zazaza142 e0K shopee br 980528257 72x haha com
plantost kus glassdoor
cleveohiomaster2006 KqR tiscalinet it jcmj 168 2qn yahoo es
laid etudien k4V dailymotion mitnylf327 xBi go com coe227342 rwq haraj sa
steph001 g4i pochtamt ru arikceren VQK linkedin juss mx1226 Y8v bit ly
vania iefriemov Gff netspace net au
stake mike pHp pisem net naunihal rehal Kfh pinterest de
aline 93 pG6 columbus rr com tianshou87 KcE hotmail fi raulreichmann fRs twcny rr com
c?linha FPK msn com laurentvince60 Wvp emailsrvr smetske77 0di mail tu
vickiequickie09 cSn namu wiki
tantraphonik 1Tr divermail com fediy 666 13 zzK dba dk
2 098 Abk realtor shut47 Xu4 domain com songproof DWx instagram
simonzat dkl 1234 com maier marco cPY go2 pl skms 124 6 vRK webmd
revi ron 39N twitch tv
coe514627 MWN 2019 normandurkee2 Gzh bol
joeinjo oqW sol dk czz1995 z5N gawab com 12378910 UKX yandex by
christabelneedham272 VYW gmx co uk vimanu79 8Tb scientist com aurelianopaiva 3jl pinterest mx
janocsine lucziklara um2 gumtree
bashboy22 0aW vivastreet co uk nydeacon1980 VGE ttnet net tr
thecreeps77 TSl pics oneenolovemom milk bF1 hotmail gr obxkid007 4cA mercadolibre mx
gunselsenol ejh cnet marie kamenie nwu superposta com christine 463 cLn investment
man atar 0Ny wowway com
julianrosso10 DFr ymail com brilliance94 amc chartermi net
chaithanya ben NiE mail bg dlovefitness Ncr interia pl coccolllla2005 k5e view
nicole wolf76 Ebd icloud com acares 10 d9M zoom us 9
edvardmetal 86R fastmail com kirk acheson DFG supanet com
blair friesen 8vl hotmail it hot4uboo 16d icloud com sandragreenis 4wV wildberries ru
toon 666 rVT maine rr com yickle6467 KQS telia com arthurddt9 09t twitch tv
tann davis FP6 james com
basti vogt99 1DS yahoo co kr deep27bm zKT fiverr
opmn11 glL amazon co jp bangerbear K1B aol de 97060785 NMg gmai com
samasmasgic oOp trash mail com dylan hennebelle br5 bell net fortiserena97 rII jubii dk
dajovi695 ctj ozemail com au
tnctrvideo 96G naver com carioca2202 s7d amazon fr
sblancoportals JqN viscom net changed56 66W html chrisdt44 UDe gamestop
yingjye806 4aM techie com natur3music zXI gmail com thomaskjones stH americanas br
448160592 owx rcn com
valentina bartsch zzD inode at felipefly VZW llink site
truptigemini YeQ ameba jp arakawa0822 IVN q com jscottmays jSM amazon
413
4 Bx5 bakusai cxvxca03 ctB hot ee juliroa07 q7V portfolio
icejelly84 DR4 inbox com
vargasraymond YY5 tistory shirley li uFu skynet be
geyzo H0F live com au henninggluche xb7 amazon it c barreiras xfa nate com
nichii fWm fedex steihadd gQC aliceposta it hz53019 Olo upcmail nl
cengiz incici uue wma
haelinicole HQj momoshop tw gtgdck xvI aim com
dasahomolkova DRn yahoo com tw sweetymaus20 Int allmusic vasile sandler 0cb live no
andrew christie1 8Xu hatenablog ktav789 2Hq yandex com nany 123456 xWj inode at
linus eEc interpark
gcf420 W8q asdooeemail com jordangpdx lbF ua fm
beaumanbrooks M56 live 9dntfk n05 siol net jsm15724 5vi myway com
mipp4channel mnn empal com paltarokaite ZM5 email mail nikkielj101 zc5 asooemail net
rubystation1 A8f suddenlink net
jmosman04 TYK qip ru smoss44 jNy bigpond com
jancome HKw bigpond net au rojasrojasa1 Tdy null net baturun 71 uHF 126 com
veronica gmecco Jbl cybermail jp atvoyumat rEm qq com filip041 muras kWA eim ae
dirk weigle h3i aliyun com
hsjsj p8u costco lztybs xFW tyt by
ciarawillons21 Vu8 doc imelnikovromanovich EhD express co uk chiroheals1 pQE zoho com
capaman vBb ups johnowensx77 Vkk estvideo fr mrlenox18 e8H sbcglobal net
jordan evans2 4lQ mundocripto com
renierbotha 2k2 eastlink ca jason morris85 tUg yahoo com ph
kyslove486 L7f htmail com ttt 234 7wH mail com agudela35 GSM live com
amiefruit Thf vk meihua2931 6Mk tumblr bsuuga Yua email tst
g fitz h5K restaurant
jamesrules2004 lJP tiscalinet it fordmondeo91 wVx 123 ru
lorizon01 yIP allegro pl alieva anel87 J1Q yahoo no adus396 2tH mail ri
hadouken dude Cug jerkmate cheripieuk06 Bme alibaba tototo300 fY7 iki fi
roman pauls2003 HQX price
grit barteck MfN gamil com lukas hengster ZPn akeonet com
blaips9 Avn fandom roger john94 1zY satx rr com haymail88 N1Q 1drv ms
sarah salvage fCQ yahoo com sonjapuercher jJc barnesandnoble 3vanya utT talk21 com
dovis8245 UF9 as com
gary fulbirg ZY9 xhamster team jacaranda W3t wanadoo nl
rastoman vavilona FU7 btconnect com harbour eric pZL lenta ru lorenzogomez2 dMd amazon br
pwjax1 SX9 onet pl bfbfbfbfbfffthghff 52W pinterest es vlasovaelena79 WCe meil ru
duong4a3 tF8 prezi
bastian muth etk qwkcmail com big jim uk JvD erome
banditka kat ru kOp asia com 98765432112345678901 Pra telusplanet net salvador2kids gUa xnxx es
coe anutan1 Nzx xnxx tv as2311232 3j8 lol com
kodibonaak BOS llink site
m avery09 l2D optimum net blueorcoffee zWl mail com
dolinaartyr drM maii ru pathoeco tat azet sk yakuzaridwan a4g mchsi com
nook na ler app trixia luciel23 NEZ videos adamadam1212 gBA bk com
diepholz 8gw nordnet fr
leonidsem noy xhamsterlive kijyash kK6 yahoo ie
onin the great u05 c2i net evgileschisholmsr IBn gmail dogi562 FzV fandom
mazaevlolita wkE none com rey fabian PDK no com etqeqteqtte zuy hanmail net
multivision tps GKx xhamster
cskim5407 81a domain com littlelori DMx espn
gozbertus UBx aon at jeromika 555 zf1 tiscali fr x choco xx LsB qip ru
adiddas 07 TZ3 qoo10 jp hanuhanu AuB yahoo co th ky setiono OWI mercadolibre ar
1805625343 jC8 san rr com
sintings 2UX bp blogspot bekirokeli 085 tin it
bx bx88 oIw rediffmail com perin david lpN tiscali it eakatske mbM csv
warinnonny xAY list manage chicagocubs 3 XP4 10minutemail net mliao1018 6mE gmail con
rjk1509 PrT live co uk
sin for sale beF fandom 2012erkin 7rK nhentai net
shophappily 4US xls tarakaur23 ors qoo10 jp nantha s sJe zoom us
aishe gul06 tsk outlook com maroceana 4bR live com ar john5437 3su t online de
bernie habicht 9hm inbox ru
nurmert2010 U90 columbus rr com
nancy steylaerts Knr post vk com
gvjvj2 uqz yahoo com au amina kesaonova okW shopee co id
isdfbvas87vsdv78 sx2 bluemail ch
saurav chatterjee hEj taobao sergioanpra 96 7PH gmx net
malikat ad4 attbi com
taniaa89 xfn videotron ca
sanyataboull JIf iname com
597858487 nKo nutaku net
kier decordova dJW sanook com carl smart Ziz zillow
sadsadasd asdasd dTx swbell net
vermidon iiD xaker ru suisanet fTc bluewin ch
irishka ananova Nfq ukr net
ericvoitures sO5 pptm
nweke27 eNZ teste com
schulwiese 9JZ nyaa si
phantomfantcy DPN bar com loni mimi IWI yahoo com cn
greenwoodduncan p2o periscope
truascin34 ZSD yahoo co uk harpreet oo7 4Xu hotmail se
3 xaker 89w comcast net
zskaposvari FQz land ru
aram 80 Bh2 hotmail com tw
raul209 rg GtG zhihu
oyony9 zh2 dating rajssky TWE quoka de
nislam 03 DIm jcom home ne jp
alicebjasper ZcQ hotmil com champkk D1W inbox ru
mariorh g8g indiatimes com
james t2000uk 0zv quora
iain d anderson gwv nomail com
leviiathan npn aajtak in
usermradi kiU icloud com eajatto 5h2 spankbang
sadhbh2 XnV finn no
jpalabricajr GEo maine rr com cutesandy911 Hxf mail333 com
pageisel COT quora
alexandre c faria s61 jourrapide com
osinina 02 vBM amazon co jp terry phillips73 DqU altern org
zacharydu10 j7L aliexpress mlatelcom 0Jy nifty hadar klash GC6 kupujemprodajem
olepagem 7aw gmx com a06873 TBs yandex ru nguyenthuyhp88 8×4 sccoast net
hongren99r weH seznam cz
jcs459 o1t fghmail net bowwow8958 0YX leeching net
32423423 2HB prodigy net head2toe ZLe marktplaats nl pattymarujo h3v yandex com
mcgert4 2LW hell murtazarocks90 Pix orangemail sk kck7285 tAw onet pl
hwr52806 1l5 pop com br
ren996 QM4 mail ri la costa23 ha6 fuse net
h30rider MU3 tiscali co uk toddarnhold 8kF e hentai org live2swim250 57L xlsx
magnusthedead kEc singnet com sg 6230
Y7b me com hermanpanov xmM xps
sieteymedia j4Y kupujemprodajem
timmy skate92 CzI patreon erikangelle chE etsy
ddt1885 BjF 126 com jinaver GdI litres ru kameyaruk FZM neostrada pl
jun xian2004 wGc onlyfans yagizelgin gMU excite com maasvip HB4 lycos com
mojang153 ReO ebay de
mymamasbaby21 1kJ hot ee adnanhukic QOs mailarmada com
mazharchikhalia ZRi mailforspam com gme2999 3lL itv net sissim GMu email mail
jadaulmer IGN virgilio it thierry bikodoroff JVz walla co il luperion za1 fsmail net
peterjus 7Wa ovi com
britton dante hw7 gestyy yong19982003 VJf ouedkniss
rodriguinho sds3 k0g postafiok hu innamoratomichael qdy tube8 oxybutyninad aEE msn com
katsuyoby1021 1KR cn ru m gondal6969 VXP indeed getwalelign LTc xnxx cdn
kelianbonnet c4b hvc rr com
ckaminski5 Ihi indamail hu sabraak nUr wannonce
sherman205 uFs gmail maxinebeadle 42r price suvajitmitra 9gj chello at
kimmymetcalf 6fK shutterstock raadka 2UQ breezein net cpokay s4d socal rr com
archimede gGJ lihkg
yun100509 kay swf jhardeborn D35 eastlink ca
h2debu hh5 olx co id doppielle AQe youtu be dima7amid 2B5 yahoo yahoo com
sabridelicia2012 fKz loan 584073578 Qvw 21cn com korayuysal OuR dnb
amir babybaby I1j halliburton com
kxwhybljgd ug7 hotmail dk maryds Hqm freestart hu
lailof TTj eroterest net 345825769 33v comhem se j l charles cKD ebay
gsirgeie LLS tori fi nilima nehate oQo asana hti chef Ps2 ixxx
seh ortega cVG e mail ua
anamaria md 23 v9t gumtree co za 87237494 fir apartments
roadwarrior320 p1X luukku f69969 lDj asd com angelika1er u2p pub
uno uno 3 cK4 xerologic net effeerre2 Iup dot aslankaya 72 P3E otomoto pl
r zenin 3el live com
gaararocks112233 sLI bezeqint net elavispado ECK abv bg
abcjun77 opR wordwalla com ravochckin2015 o9t mailinator com vitez25 Wyq mymail in net
123elosard123 F5M aliyun x ronnie sayz rawr x 8Ce live fr elzahnscott Y2Q dmm co jp
gedis samurai L6y hotmail co
djkrisykris WQU att jonnyquest08 4kS cogeco ca
timmae94 84K btopenworld com mringrose 2ii apple blatiner FIs cybermail jp
segzzzj 85p expedia qa q1 37R xvideos philarthur1986 2YF vodafone it
fjhdflaksdj Xif ebay kleinanzeigen de
micha mainz dh8 blogger wuxingdeta527 sgv mailchi mp
ahnsteffi njF interpark svalca BXx none net hunter pace69 lJ3 hotmail es
sah inm WdT nycap rr com panasonic19 ImQ verizon net galaxylocksmith54 8N0 outlook es
qfbxgheqw mf7 126
skybabysk 4Wl optonline net macalister72 9uz pantip
m al marri55 vnn autograf pl mohgor 0lL kkk com slan63 J3e wmconnect com
ploshchad31506 m4b imginn celiaalvardo1785 zf8 c2 hu desolate era PSp xakep ru
katya5879093 myY yahoo fr
t giering BQB optionline com husainovanz RWt cheerful com
misanthropic muse VBm poczta onet eu timmyvp oUV excite it higoya kumamoto yWg atlas cz
randel ph jNo cebridge net adamek8433 YY3 netvigator com toju^{0 9dv microsoft
stfu panda girl gHG milanuncios}
akif hafiy YWx wemakeprice vova trishkin xqt msn com
bethybupe 9xj tvn hu paccz 225 nYz ngi it nina51ceban ax6 imagefap
q3anoob n6s reddit williamveruss hkr networksolutionsemail hurman41 kSi hushmail com
bob dawra pIH walla co il
kirstndblake Kh4 excite it ctwith4angels Yd0 americanas br
merbs store22 f0n tlen pl coe562039 eLu email cz consuelo 380 ApX stripchat
trstn smpsn fS4 aliexpress ru uwasemota Qbr locanto au larra13 dij mp4
blackishh nog kkk com
craig owen23 Jrp bk ru yuyou15037043776 S3h yelp
azaz123xxxxx LxZ yahoo com br luczek123451 LHC rochester rr com lisa thiem aXR alaska net
patient T4Q interia eu gdlsyst FPP fake com 412444233 Onw outlook co id
arvidssonjonas SE8 yaho com
samkuta zBJ sccoast net beatricefio aa9 amazon es
wirodevibats gWy yopmail com ravindums90 inH yhoo com darkzealot89 E6a watch
lindleycb TQ7 live fr sandrine gerard88 M2J michaels fillemythak IdJ hotmail co jp
nsoienfsiofn Nyv mapquest
fodole r2P trbvm com berq20s2su zxR amazon
edwinpr Bas breezein net swit midnyt angel G0r hotmail gr congcuitang fZk gumtree
rolandredjack wgQ live ca ezza milah 4Hp birdeye dallig chm one lt
i0576 9h4 pinterest co uk
hanna paul 6vJ facebook com rampage 2009 bsw zahav net il
rapak 47 Aux cheapnet it ericgharper eTW sibmail com pyyyuanflower250 55l jofogas hu
rumadr BIt dif manzellelocation T8k spotify minhdzung121 vXW orange net
carla 18 CLu jippii fi
gray240871 XEs market yandex ru gul son 33 Kph yahoo pl
chesss3008 znY pinterest sensacija23 zSy office com domifeh Avw comcast net
cristo e2728 zwq googlemail com sunflower seed1 KLZ quicknet nl mallieveronique KVf olx in
damian markiton Ogs mai ru
joseph d mcmullen UTc wp pl 13651041001 LqC katamail com
fil1664 O9V realtor caiden1288 BpT spotify jmraymond pEb live it
hyesz fI5 austin rr com lu br icate96 3 TbJ mailymail co cc habibaisemahona JpK something com
xoroxorina olya yPP gmx com
james park09 aY8 meta ua gera galya Mie btinternet com
hega 96 h3u google de ada drame FUW pokemon k butaev Vhi beltel by
hysgdtje DMp webmail juan carlos09000 3Sq allegro pl wchi liu fHF houston rr com
limauari WkU eatel net
egor 19997 3Ii mimecast anjela yes 29O bellsouth net
antonellocherchi zQp tmall oleinichik qy0 onlyfans nancy pui WkV ptd net
emanuele castagno hWS mil ru alberticoala vF1 rtrtr com park soon2014 LMe yad2 co il
hilow0090 R0a timeanddate
ashaw9770 z7h hotmail hu vladislaw2002 zC8 yad2 co il
felcamb 2OZ xs4all nl dart7627 oMg amazon calecobz04 Hns live com ar
1021323893 O1p gmx net edwards519 1Ox mail ru lovemhtsos 13 86L yahoo com vn
bila daif96 hdt usa com
semperfister ULW leak mega1luiz K1o a com
allenautumn gxT daum net berndklusmannn r6o view nhtrpv1995 sxt tele2 it
osvaldopalafox25 Pmj bex net kudraskasju q5F whatsapp bdjdd jdd jOg chello nl
jespergames123456 RHj clearwire net
dsherrell FOv spotify down07 th4 autoplius lt
lxb wowmail S96 btinternet com angela fischlin OuD indeed mark rehfuss rlh test com
huidrom john fTl tumblr aalaey VQY jerkmate dr fahadamir ZXZ medium
26526 Sp1 yahoo se
siflor2906 IVJ sxyprn gnirmaan Ez3 facebook
273650720 Dnb pinduoduo oleg ankushin 73 atj webtv net aya kitty 2 7 5GF tubesafari
ldediig qBp olx pl js pwns2 H69 wasistforex net mozkova Sej vip qq com
kumsal ada 6iH chello hu
tre121 vRb kpnmail nl baby spd FVA nycap rr com
varusha veera MlW ee com dvipathakkar Yfm nextmail ru sonia boohh MYr 2020
kurwysyn uEe yahoo de silbero25 YBR volny cz timfl79 9Ev dnb
p giacchi ith hotmial com
verfaillie peter nIr eyou com malzewowo iex teletu it
jirinline voI hqer wahoothunder007 5Ic gif amna2000nl LiW asdf asdf
panxoriso DT7 nepwk com veraoro1 TrI telfort nl edisson sr96 dDW svitonline com
alienvscrudite 0ck aol co uk
xpelete DJS gmial com misi boros X4J tripadvisor
frank smiles h5K 126 com leejoshuaj 8VR live be molotok p 75 z89 mapquest
lwatson 12 UdB poczta fm ladylover257 TKE booking karim 23 IVR wmd
uber muffin 8Rp yield
valy brigada62 Fhq xvideos midorinohi77 4Ll hotmail it
favor 96 vGW msn shahidriaz94412 OQQ amazon ca gustavo henrique02 tLq omegle
imanhersi fmY me com jackel454 y22 gmx de oil 176 jKW ro ru
jennytigermartindale AAt myrambler ru
luqyizndevweia 7Lr baidu qiujian520520 E3y foxmail com
halkoutsalih WcF poop com open min AQD amazon in destinyclark555 ijd olx pk
linda little Q0p qrkdirect com lor iga rner6 62 93 oKU trash mail com strugglez 15 CVQ apple
minotti cristian IEC grr la
joe152k8 Ngq shopee br barbiepace 2Yr sendinblue
bbeii liily o2 ZLL 126 com aleksander2605 auX quick cz eric stubblefield 7Yn cuvox de
gaile511 mVf bazos sk dorekd lcX rcn com kimato H0V hotels
zhannulcy eAQ iol ie
ilyase456 FKW walmart klherwig g3z dfoofmail com
small chanelpluto87 Nzl livemail tw kjeremie05 vZe mymail in net sariazout vag qwerty ru
ms maks kim n9r hotmail ch stonedeaddog vKZ hotmart 258240480 6SJ belk
vojtatesar10 JxX sharklasers com
ori 23 22 Z20 t me eduradtangol uzP asdfasdfmail net
williamdalton wzp investors latasoul yCt rent zoom metal23 8dK bellsouth net
pleasurewalk 8PL bbb otofon76 ShZ net hr xsuprnaturalx o7R stackexchange
stevegagne62 jSC tmall
bggman1 mnS email it baumannfrank794 rGJ mmm com
remcodejong zu0 freemail hu catlakbey sGc usps minamocannibal GRA eircom net
verhoeve1984 LwT us army mil bryan1227 lindo vNZ markt de larisa korneeva1945 unA 126
blastedo dbB yahoo ro
pablosj2004 Kyt deref mail sonnyblack5000 Od8 arabam
dinshiron jaC toerkmail com ossaandres MuT doc reimakurttila RRP metrolyrics
yangyunyisi wSb homail com medicatedmaniac yVg eps emilyjhare ds0 centrum cz
orisegev100 93v gmx net
carmensophie27 gF4 hotmail com 13035368 csi aol com
tamsy183 E8x unitybox de romuald vallon f9u zonnet nl abdou 1601 lHW gumtree co za
sdas sdsd tvH excite co jp iolorenzoc 7Er t online hu lennson nQq moov mg
cs 0838 3uX usa net
dd881e6a vew tiktok abdalrhmanalmoula 4×6 post cz
yuuuuuri y5O tesco net brucemoss38 484 amazon fr rjames549 J2w hotbox ru
miyra virgo 1b7 allmusic cattyleyland bps jiosaavn sweet rex xF3 go com
brodiede h2c bellsouth net
redouane 42000 2Yq sendgrid huudhcnhn ulN inorbit com
yna 8212 SGw asdfasdfmail com chipperz2 aNJ asdfasdfmail com mufasa3 0Ae austin rr com
sadiesford 0Zy yahoo co in kconny38 RCK poczta onet eu heinz poehler1 TZl espn
bigcockazn WUE gmail it
dundun444 FtM hotmail nl hanyesbest e4p etuovi
knowel78 9I2 gmx at icecharm iEQ inter7 jp 1000019643
z8s hotmail es
louieansonng SPv xlsm marivicdiwa SjB newsmth net cc450 Blo mksat net
mw21791 uU0 patreon
raunak2singh OPB klzlk com mistercayo 7MR namu wiki
ccictrademarketing iO2 imdb tatianapaccard i3x mmm com koxxa69 HNv orange fr
rameria pasion flog hoS alice it anunigam SLq jourrapide com ldb42 tRk netflix
alexisyuotubred O8y toerkmail com
spahanr 5ub autograf pl elidigs 1fy voliacable com
ardee dirk N5G adobe salavat magrupov XAV dir bg soul85914 2sI windstream net
sguy 2012 Vw1 slack wu nan OiE twcny rr com dioguinho 1612 TS4 only
41778574 7Dv aa com
spoerli 9HF web de lysterbrian FwU nate com
antoniopavlinovic BTk rateyourmusic nexmye75 RsX news yahoo co jp giovannahofmann fH8 yahoomail com
c8j7z6l4v 0ZP figma davidenikopici PqC bellemaison jp oviawe 4us ww9 groupon
integragsr08 QQ3 shufoo net
adewoleadewale56 Pia sharklasers com gamerm188 AaH xvideos3
528700866 OY4 netti fi jeskenazic kEu rediffmail com solitaire361 jYn kimo com
derevyanij02 55o bol com br gndmoss wAI test com super romagus 2015 X7u zip
hafiz akumen oAO freemail ru
ollahollah ZcG ofir dk svetoslav makximo hyy jippii fi
antoniomiguel1982 wtJ messenger catgj D67 opilon com arthurguegen fNG mksat net
mixo169 rC0 example com budsaba 26 nZN quicknet nl omptinadta mB3 rogers com
jontef2 JjN gestyy
cgaillard1 wSM kijiji ca robreeseaz E1N jumpy it
palme51 pEA yahoo co th krutoyparen vb 2sH aim com bu kalp 27 QPP hushmail com
marrycarina eYt academ org claudiarinconmole jk5 fastmail dang3437 Q3t kohls
19
26042043 TGf you leha 84 84 E0c mailchimp
simona 0wP excite com stella rababe ZpF surveymonkey matts22deluxe 6vC mailchimp
shirshinats 4hu live co za annickmustapic Ss8 amorki pl jon 0201 lcj live cn
hubertsteins Sdm avito ru
nigh anew Ppo tiscali cz 3 stone103 RuZ 11 com
zqoqqbri KZ0 buziaczek pl forzamilan66fr N18 onego ru vitto357 j2i live ca
burkejrfam ZYj tpg com au cs 65 Emd cfl rr com mfranzese12 Mp1 inbox lv
eltitodela55 nB6 wannonce
100001003048312 3V4 live co za vanya kras 2012 lzk hotmaim fr
knappgs PH0 xps terziliolilli k7s aa aa yahlee 3691 55t charter net
smallcampus782 7oC email it joksch is 8×5 dr com boldom tja lidl fr
eliasap07 OPG amazonaws
onparle2toit 6Zl live ie burak lann 8nt hotmail no
dirtyal83 GZu ups kitsison VGP hotmail com au annemieke UXK xltm
stuart gow Uxj me com ginnadoll 4tZ random com diana divi jE2 tagged
skarpachevi ZFz subito it
jsjsjjdjdjdjjdj lSa pop com br neekerancharan A57 naver
heraldogabriel Bmg zing vn xiaoying773 gEk neostrada pl nuzdrasti kuq mail
l1s0 OBr kufar by anwar elharabi 4hY dslextreme com hockey man12 POy adelphia net
httaweru1 SXo html
thebasketballkid01 xD9 netscape com geraldtc60 BVo love com
jackslow313 LkP sms at jerwill13 kUR olx br bpjydgnzd lLU falabella
idaycim B4J yahoomail com qkrgusgh56 Wvp a1 net thomaskleingoldewijk Hkz otto de
1003lol Sus lanzous
melboozed xNb healthgrades euwynne s0v houston rr com
likeshahe tSW consultant com siraza007 UVr temp mail org klaus buenk ako prova it
kashyav k0l blocket se jasonadelman HZX papy co jp ivasteel277 4Ax suomi24 fi
damtz00123 Vef box az
agustinabonina12 dgJ list manage apokalipsys79 Qz2 comcast com
jsea1018 f8W yahoo in justin30988 DYm km ru ifretzx HAu docx
julian baeuerle or6 olx eg yuca elmalo 001 f8r mai ru le party partout gH9 wikipedia org
head666shot Qfa chotot
nariklondon 9KQ dir bg bobjoeybobjoey Bp7 live
holister07 nEW leak katty pn13 Qh2 bigmir net d simao 22 omj frontier com
deqy 0858779567 9Ng drei at junaidzafar901 jEq xnxx es birsen1985 JSF o2 pl
lisena16 cef yhoo com
coe318146 2jb aol com nani1314 KLL iol pt
coe7 AbE yandex com marco ron wlA fril jp lee rudrum KwO tlen pl
bienemarta1 R0F qqq com christ101063 8dJ wmv dead daniel i0Y vodafone it
ishkander2302 rD7 okta
tmac1789 vK9 romandie com ana mariana1995 MTd google
jkanika786 N5y netflix alex wt ciE ntlworld com rishab 1985 jindal 0Qu livejournal
waftdasr tCz yandex ry shastina nadezhda 6×3 etsy snydly uVY chello nl
edoz4all IQH otmail com
heatherwil73 ObN wykop pl kenyonm06 fMk microsoft
sarancse10 dpJ online fr zragsdal tKm dpoint jp jlebek 58K yahoo com
micheleottaviani pV6 belk skyazoo coo ameblo jp mm4367 YHp ofir dk
mmujjal Cw7 yhaoo com
jtsebesta 6Rq networksolutionsemail jadoo45320 qSF yahoo com sg
tonigdwn h7z admin com masterholtius b5t 58 lsimply BEF pillsellr com
philippvoss QzV slack ancuta lunic S80 gmail king15977 hcO mail ru
spammuco lsO videotron ca
jessicaleighgonzales IIl hpjav tv denis 95 08 Jvu invitel hu
babipape fKX gamepedia nik bob04 XBl com samhollandco hIQ and
gabo tu amor xf3 centrum cz robert okeke iUI wildberries ru 987654321987654321ad ipw rhyta com
woojoo54 gBf eatel net
gabpivetta gaD yahoo chunar3 Sjl hitomi la
gabriel nt KVk tvnet lv iuiu7977 Z4F gmail co c27269211 Ke6 flightclub
calimodzftw kKu freemail hu abaars123 S7v planet nl kider107 iVV email tst
totya1987 Wbr fake com
zstpyh syc google erik hammar hgc kugkkt de
marlenenelson56 LWg yahoo illyse eXz ifrance com mankza 2544 03z divermail com
rickitaufik CAo yahoo es geertbro 1E3 expedia adriantehks Wej you com
bud4canada Ute pchome com tw
a12418069 pUD netzero net play thesilence YkM hotmail be
sexandpulass hTG wippies com zauber fee94 Ist daftsex bullbar70 N92 nyc rr com
s concepcionjr tkA inbox lv hicker70 9MN offerup laurasb jmdp hz8 market yandex ru
alysmommy84 Y11 cityheaven net
skytrading company Xw8 jumpy it maartendevrijer 9hv etoland co kr
lara stimke1994 bQl live nl cuteviv65 cqh metrocast net rbesand IQ6 con
tam5876 4SY fastwebnet it rbctba SPB gazeta pl marc040 u0c livemail tw
coe50306 LW4 shop pro jp
anr83ra1 BZt bestbuy m rocket99 cGv pinterest it
pavilez Z36 mercari xuliu4300 JHJ gmx de repsacc hwZ qmail com
noafiliation 8pY yahoo it axel du 09 V3g 1337x to kon3993 e02 indamail hu
j man 1212 Gv4 academ org
pedro santos1985 Tbh netvision net il fairy style69 QUv email ru
piacatt0202 rTJ mercadolibre mx coe786746 jUq mail dikkiekaas NIO webmail
malloy4 e3n hush ai emre 350 tv4 komatoz net stephen burrow DlQ craigslist org
monello4793 0v7 stny rr com
tyota6622 9P3 1337x to rajeshvjay 62c spankbang
undeaddirefate KFz ya ru parki ja yvr hotmail com br kde1955 Gdi boots
snichols98 O3p mail aol lehrie10 Guq wmd christian schulze85 5ZK centurylink net
smokeybearfan yRI myloginmail info
vuonanhsang B3t pacbell net arelygomez feb21 tlj mdb
redmoonlx 1hw quora justinbrewer1029 y8Y none com esi farzanegan zzJ hotmial com
valday666b1964 VXK bk ru heikoperl gnA and guermonprez bernard bcc restaurant
ademovic cenkiz Sg4 sohu com
elly reynolds QrM gmail co coe251024 DVx aol
qweqweqwe12312 Cuy amazon es eddie2812 kqe asdooeemail com kusj kusj dTl ppomppu co kr
olya melnikova 1989 9Ac anybunny tv apartman drago gbC bredband net anzelikaandrej sYP skelbiu lt
melindalote3 2UY flurred com
delihalo44 dZV lycos com mohantyshantashree Gv3 index hu
lisa lomi AVc eyny j ita1978 pv9 km ru quanghuy 6464 kV7 duckduckgo
ms andrew 8SL nhentai staslr hcw virgin net vudieulinh2810 zee epix net
tossen27 zLb bk ry
camphan CJN googlemail com wandering renegade 1G8 mundocripto com
zerosrosswind BYR interia pl sexyhotness rMo 2dehands be kkvkkjvjkjxjjvxkjv L8z wordpress
kjpkudla heo tele2 fr jj1711 hWI cmail19 geenacothern964 ifI pub
jakelake11 9lN tlen pl
baringtonpro SjQ avito ru salvelly 1422 h59 booking
evalp03 kQA 2019 ajenricci nSG otomoto pl chosen1sq44 YnI e hentai org
arvindbhai123 smH e mail ua disentchillzz Fh3 spaces ru tattooed rockstar831 1ip cox net
yuusuf mahamed20 qMW dogecoin org
smartworld 10 QPO sina com brewershalanda d8N mail ru
tokessa siecksmeier 1DT internode on net supperhero uss TXG tiktok fonsec IRc iinet net au
miliana401 T0t one lv amcosmetics wJM 9online fr matmyr ZAX bredband net
ragini devi yll yahoo it
luis eduardo 671 zKe webtv net robzippin 86C chello hu
azizbusto saf dailymotion 653528466 Hvr etsy chipie150595 V0F nhentai
fkps2009 05V google com kaeza club acq mail ru a3116081 tab what
hastetheday5393 JfT yahoo com my
herederodeisildur kuF zol cn bpm20 HEc 4chan
0krab0 XqX att malik walker69 jyP consolidated net k0tik70 QUV yellowpages
bedloch BW5 itmedia co jp sandy meyer 1972 eqn kolumbus fi edmond9page odx markt de
malobo6 Q4B telus net
shank3rb SID netvigator com hadi se 1999 LbK stock
maymay skp14 3HB com alexandre2026 wnw barnesandnoble maryan xxl31 Jga home nl
amirhosein 1374 VHz ureach com emcgovern830 T3w 11st co kr jitendrangpl NQU 9online fr
snowboarderajs 9LS outlook es
lolijimenez696 Xwj gmx ch jacobdenton111 vIv gmail com
barot ishan2001 XJv twitter elloventmodders ogk hotmail cl ataraska529 AeO snet net
rnrghkgid111 OPF onego ru vrvtlf 5eZ cdiscount katewiford msw netcologne de
sriboonhuaing OwM live fi
souleater 22 Dcu portfolio unholy182000 RSo freemail hu
unknown 1986 m0I ix netcom com mcf imprezawrx WrS discord reginamabb bai tampabay rr com
lora hanona nYX mailarmada com aiden cds RAU gci net ania6136 UOw nifty com
jsjsjdhs cyJ apple
mejdinidhal lMW zappos ttyrutyns 6Ho yahoo co jp
amrnassar22035 Iia express co uk cyprian bryniarski Vk2 pobox sk isabell rueschoff BRx gmail de
bradenbryce mBM restaurantji paloska SlB blah com my tia YQV deviantart
yoo786 Gii kpnmail nl
thomasmunich F6j ouedkniss id zapa 1N0 forum dk
batmandopao Dpj mail livingsaint tQz programmer net mintomegan ix9 virgilio it
donnaschroder a6Q books tw digitaldragon125 64G nhentai net clover4107 zf1 pochta ru
manitoyo5 1sX alice it
heongoc gabong rFT redd it hamirzin xp 4BO abv bg
ankan490 5xX sohu com theblackopsgods hte redbrain shop dlthompson79 OO0 vraskrutke biz
kevinondo123 wW0 http kenquach MdE exemail 13853
magowiiu 0r2 hot com jack99 1wJ eiakr com
quanqianliu eeg usnews marissa muth uyx pokec sk takkinchan lga netcabo pt
patrickboth Dzj live nl lucas54700 Xbx pinterest au newton pomme 9fQ hotmail
inaz12 mcz hotmail com
nattayaporn jan XNf homechoice co uk 286037548 401 139 com
megamindsociety CyY nevalink net colin0 3127 cDy gmx ch killer416 7qG epix net
flying dyl rUz knology net yolandebarbero vU9 blogspot asdadk wip virgin net
zhouyan61999 kkm fb
dcrajkotjd ytv bazar bg koper koper wpK live net
jbookl823 9tb citromail hu cutipi987 mrw weibo vernoncity kFa nm ru
andrea monteagut Tdt tubesafari 151286882 dNB exemail com au bruce lao lim TIn yndex ru
enriquezcath777 0B8 jmty jp
toth ildiko 5KF live fr andrewgriffiths12345 d2e roblox
langthangxedo qTo orange fr 4254
d6c gazeta pl el curroka myu eml
danandaarah3 GcK gala net mini man marco kXa docm 5409 BmN dsl pipex com
jamespollack C7f twitter
labrat611 Q48 abc com wasper1920 FqD online de
hauke hinz qSY alibaba inc thomas dufaure all zing vn corina negara Hhi friends
c0nd3mn3d jzi yandex ua frenchcountry KjL yahoo co jp jm851124 EIL walmart
banditbuddymolly jrn olx co id
gtemskwv NbT hot com massimo07 l4j live de
287211454 wMP www 1626 WHT lineone net romeu79pontes hxh hotmail net
jack revelll I8F tinder dessertmanager EcE sharepoint ducdren Dhk eyny
cyril3347 xhI yahoo ie
mclovingin YVT hubpremium banjara 28 Ycs vipmail hu
tusa david B2S surewest net kathaponponsan UBv kc rr com 2024maxi p pVl yahoo se
patricemondon IYj ybb ne jp ag an ulP hispeed ch noeliacalvo552 BhX shopee vn
kickup34 XSy yahoo gr
blaze2154 k6d nightmail ru guenther reicht K9O xltx
nareshn 87 CHH linkedin colerubin YPU onlyfans picaisa h3A 2021
zhora lis 00 dbi libertysurf fr jenkins21 lQ9 potx melissa dupas PwE cegetel net
tammyboh701 48Y indiatimes com
ktsvetkov GCm lihkg www sciencegeek444 5Aa xtra co nz
williamsandre pNY tx rr com downenemyrhit 7WY showroomprive dkhelium4 k6t web de
401775361 c3m cogeco ca yum2012 k3w hughes net gcocobee FeE telia com
amatoullah 7 Qmc lihkg
big love sarah C6p hotmil com angelaschaly csl amazon br
baineful gYd xvideos es dady98 ZQG telfort nl lisley rangel 05X alibaba
tikka 69 HjX rogers com jdhomescapes rEu mailbox hu pretty21709 ls5 tyt by
tpvlirem vWc cmail20
wang19
JTs rambler ru sharikcervantes615 9on posteo de
vivi701025 MI7 poczta onet pl fttshevchenko MAT rar ksfiijbq GJn ptt cc
captainjakeio uUn lidl flyer kluwe4ka aV2 excite com vdtttgg uQI last
tristefelisidad KXM yelp
dfhdfhfg un0 atlanticbb net armeet1234 rh4 embarqmail com
nino rivaldo kgr yahoo com tr jss270992 8TS cs com spartacuccia oyo hanmail net
oven83338 4Dj patreon luludo2607 COD olx pl purplerockprincesss AlG kc rr com
susy diaz16 QYP orangemail sk
jokerlame777 XsX paypal kavumahenry198 GCV ee com
danaqarqour 03 SEi kugkkt de aleksandr tatarkin Q10 wmconnect com gailpass WLU hotmail com ar
spm sendler gKN code marocgirl 3000 fRP mail by firefox211 XuW amorki pl
tatami28 Dvv ppomppu co kr
janvallius 3Pl outlook miaomiao0011 p7b hotmail de
silil k9o opensooq lina ya 1994 Uhs hub liska44 3gn auone jp
annalisamoratti rjC cargurus cruzanluva001 mQ3 telkomsa net doraemon472004 EVP laposte net
brenban2000 AWk zoznam sk
ilhama 1984 3M4 superonline com bdjkehib P7u rbcmail ru
pasan31x31 RbM cinci rr com ebrahimi 2929 zX2 random com piskorskihadyn MjY olx ba
ilgizon chell174 UYv dispostable com wuzhikeng tfR wish asb4577 XvI sbcglobal net
parisimic 8Al yahoo in
annenko elena Om9 wp pl cgrams pV6 jpeg
boni 1208 Jan live co uk hazrol 5zC dll kartik2 cNA tokopedia
pjotor 01 T4g docomo ne jp clauplay96 K70 golden net pavzak OJJ roadrunner com
bravepossum ojn yahoo com sg
federicotauro 8NU lds net ua sevinc251 8Ul facebook
okeonyenk KDq hotmail dk joeaoun81 zie shopee co id mcknightrp23 QgM gmail it
shinee 26 c3T numericable fr meshmesh elshaey 5bW yelp khouser77 xg9 wanadoo nl
ginifers BWl asooemail com
shee min0607 gDu hush com lekimano2096 yAc asia com
mrali 7 hCb yahoo com cn alb blood G7b globo com abbyfin00 yUf rambler com
cdunajski paI freemail hu shari graham pjd rock com zet 1207 09C 10mail org
zeekutar 8XE a1 net
scotti4474 sva groupon kullathida c9I netcologne de
1263 2 fFW lanzous bahamut2407 mBG alza cz heike moser ikl snapchat
joker man3 BC4 2021 julia sturge fNz tpg com au cowchowman o6l autoplius lt
durchilurchi RIE op pl
semivolos d mDY hotmail hu matthew bandits66 92c 111 com
charlie reaves SUB gmail orqiwez 3J3 tampabay rr com zachry fulton xLk baidu
yunus 55 4story Mkh rediff com tifresh972 wWz absamail co za qkdihzhb tZ6 tumblr
calliboyles2010 vzx nextmail ru
jaclyngraves sAK fastmail fm drugkota06 Pmd hotmail fi
allegronautyk FZS akeonet com ruba azzam kmG 4chan williamcc info F9f insightbb com
vernonkendrick CE0 asd com 997136311 DYb dodo com au alextilloson LSX yahoo com ph
jerto 74 XG4 shopee tw
bin0514 24Z cheapnet it richard e haddon mni onewaymail com
tom levett52 3ne darmogul com maxgambardella OPt mtgex com donjose 11 dhc live ru
samir dz OlD linkedin d plourde UUu libero it kyletilton EZo healthgrades
maksim gurev Q97 ok de
jonspicer Cfi live com vekentoma doh juno com
head5hoton n0V wowway com rattana acc 15 OSd redd it pierijo Em3 lineone net
qendresa geci 4pF xltm artem van 10 gid nokiamail com yurec1
F7x tripadvisor
blackbyte9 kGZ ieee org
madam sule CgH eim ae schneewitchen2 5PT zhihu
dumbdog7 K3V gumtree au ratchanee998 FKB eps alexmahdessian zZt alivance com
d amicotuning 5g7 sendgrid net 746530450 GGf vk jerem 1218 QV5 kpnmail nl
r2henley NNm milto
cyal8rboiz 8Et azet sk xueyingmylove RfE blah com
isabelle wecker IWX facebook com slivka v DW7 ix netcom com luminara2 7hk maill ru
vicki depp FFq yhaoo com dany vip tp uiR yandex com tinicamakikocic BOG amazon
pashova iva bHP gmx net
dominiquefe xoM gci net luigi sardella AbL oi com br
izabelka 16 czl eml fabriceken86 MCG googlemail com eapea 15 GoB test fr
hannecatheline Xfn arcor de dude924 afo pantip zukey50 zHz triad rr com
adlan77700 bMJ email de
pingforce005 JGf optimum net ateeqrehman786 hJU cn ru
georgettecronin D2t nc rr com boblaurin 40 3Fr telusplanet net lentilgen Mwd netsync net
valy 45 WYg campaign archive mikelucky36 VPK yadi sk lusylue76 5ty supereva it
sosyke 4jb ebay de
kia alvazlo x2I rambler ru payne s taking UOP https
27 55 y4i qq com lord simpson U3N front ru trandinh24575 qWp imdb
asiametz Fza hanmail net hsam18 SNI bestbuy lucut razvan92 VII ewetel net
3
959 HaS hotmail com
paul disalle hGU amazon co uk josecinho10 2wG gmail con
azzad23 f9G slideshare net krzysiek lev gUw nm ru viniciusplayer1712 enR post com
muchobien 29C azet sk patoculona AIF rule34 xxx 450342661 Bdy ro ru
firemen86 aK1 basic
roflcopter72890 ljd twitter hermann91 dwC james com
verena moock 8M9 tiki vn p saffell Sc9 mpse jp mglorena dvV mlsend
trdpon uuD greetingsisland tcaban2000 hsM yahoo gr vay fay 95 dgc cityheaven net
tiot pour marseille PxT hubpremium
joneskre v9r xltx 8 kamal gsits lfx rambler com lgpomchica vWC hetnet nl
cosvictor PaJ 11 com alwiya alkaf O6N online de coolpanda97 hjp hpjav tv
djmagaki TVj pandora be
c flo65 Qop sms at fikipasya 7xG wildblue net
super topa2016 UIj qq com cvetohekk JeN wordpress kikomcf F4f myrambler ru
ya014 VCv rakuten co jp heltoncf83 n5X 2trom com zsilonov qHm wallapop
redariad WKq hawaii rr com
214720032 yzl tmon co kr jnicolew 2f2 ureach com
oisdsdfazcasdijfd vjr fast ugaryan3 ip0 blogger naraku shah eyD mailchi mp
28648657 Bpt cfl rr com getjob09 kk3 newsmth net vuka vuka23 R2a a com
fumlml2668 Grg dfoofmail com
nurripek SvK eroterest net 3picfailzero xEh home com
jibranhassan BCh outlook de petrenko8411 mdn us army mil personalitate nkQ att net
104 tkeubg aLL kakao drquintonwoods ZI3 bk com
ivan bernardi zSg ameblo jp
wangyuan love2 68V konto pl kdflores05 y5x sdf com
wring1 kMU in com 19kevin kelm95 5Hw email com 353379220 p2R bilibili
gurlie gurl0824 8SF showroomprive orion 19 63V eircom net pissesandpooze DWC wikipedia org
davidgroh 96 Go2 fandom
coe stansyourman ZdF tinyworld co uk
mikschin54 mP7 gmail fr
hechtthomas SOo myname info jeanphil67 Xei lenta ru
wxcvbnbn GPR att net
snipindoh 6X1 as com
c upmann XiN office
fukufuku1152001 d9t gmail at
lucdian Wfl chip de kifspb epQ daum net
wayneandkim2004 QXH tiscali co uk
diana davis 0J1 sexy tomdespins CJW hispeed ch
jordinonis IGb ebay
hannahphipps Fg2 nextdoor
emi201 B2Z infonie fr
nivelengun Avz dish
patricia pettus SqV fsmail net viktor gorbunov 1977 e0l jpg
jocelin maurel bVF xlt
seaton2333 seX live it linda8197 BbG live jp
vialer HSm yndex ru
dima kuzmenok xAh wippies com
schnubel11 xJF langoo com
unluckysoulssmile Aeh jcom home ne jp
kilari1 3003 ALa post com doktor In8 psd
gioacchinomunda nEu atlas sk
oigtnj 1 LBH newmail ru nusrat sid 1o6 milto
bossycreeper12 tML aliyun com
ddhartnett MEF lajt hu
poppyautiero 7n0 mercadolivre br
rigislam blD onet eu
olenkaaa77 wrW start no mitterferi EtJ ppt
oudet wahba89 04U fast
ricardo52799 9IS sina com huissa Svy latinmail com
val gol 72X deref mail
luisfajueiro 3zQ yahoo de
.

Нуклеаза цинкового пальца 910 Zinc Finger Nuc1 Fn; триплет-α-Helix	Right Fn; триплет-α-Helix
– нацеленный на HBB ( β ^A ) -ДНК на 5 ‘сайтах

5 ′ _ 82 cCGTTACTGCCCTGT GGGGCAAGG t 106_ ′ 3	F1; RNITLVR; ( ACG )	F1; РНЕХЛКВ; ( AGG )
5 ′ _ 82 г GCAATGACG GGACACCCCGTTCCa 106_ ′ 3	F2; QRSSLVR; ( GTA )	F2; QSTTLKR; ( GCA )
	F3; QDNTLRR; ( GCA )	F3; RTEHLAR; ( GGG )
– нацеливание на HBB ( β ^A ) -ДНК на 3 ‘сайтах
N-
5 ′ _ 1333 cTTCCTCCCACAGCTCC TGGGCAACG t 1359_ ′ 3	F1; QASNLLR; ( GAA )	F1; RSQTLAQ; ( ACG )
5 ′ _ 1333 г AAGGAGGGT GTCGAGGACCCGTTGCa 1359_ ′ 3	F2; RQDNLGR; ( GAG )	F2; QSTTLKR; ( GCA )
	F3; RMDHLAG; ( TGG )	F3; РСДХЛСЛ; ( TGG )
ZFN-unknown-SP-6-1
5 ′ _ 1334 tTCCTCCCACGGCTCC 1334 tTCCTCCCACGGCTCC 43	F1; RTDRLIR; ( GGA )	F1; RSQTLAQ; ( ACG )
5 ′ _ 1334 a AGGAGGGTG TCGAGGACCCGTTGCa 1359_ ′ 3	F2; QSAHLKR; ( GGA )	F2; QSTTLKR; ( GCA )
	F3; RNTALQH; ( GTG )	F3; РСДХЛСЛ; ( TGG )

Zinc Нуклеаза пальца (ZFN)	Left Fn; триплет-α-Helix	Right Fn; триплет-α-Спираль
ZFN-unknown-SP-6-1
5 ′ _ 4231 aGCCACCAC56 TAG_0652 4231 aGCCACCACCTTC_ 4231 aGCCACCACCTTC2	F1; ВПСКЛКР; ( GGC )	F1; DPSTLRR; ( GCC )
5 ′ _ 4231 т CGGTGGTGG AAGA CTATCCGTCGGa 4256_ ′ 3	F2; EAHHLSR; ( GGT )	F2; QSTTLKR; ( GCA )
	F3; ИРХХЛКР; ( GGT )	F3; RRDGLAG; ( TAG )
ZFN-unknown-SP-6-2
5 ′ _ 4234 cACCACCTTC1_TGAT 910 4234 cACCACCTTC1_TGAT 9 AGTGAT	F1; МХХЛАР; ( GGT )	F1; РГРНЛЕМ; ( TGC )
5 ′ _ 4234 г TGGTGGAAG A CTATCCGTCGGACGt 4259_ ′ 3	F2; EAHHLSR; ( GGT )	F2; DSSVLRR; ( GCC )
	F3; QDGNLTR; ( GAA )	F3; QGGTLRR; ( GCA )

Абитуриенту — ГАПОУ «Брянский медико-социальный техникум им.ак. Н.М.Амосова»

Брянский медицинский техникум имени академика Н.М. Амосова

(adsbygoogle=window.adsbygoogle||[]).push({}); (adsbygoogle=window.adsbygoogle||[]).push({}); Я б в нефтяники пошел!

Химия и биотехнологии в РТУ МИРЭА

Международный колледж искусств и коммуникаций

Английский язык

15 правил безопасного поведения в интернете

Олимпиады для школьников

Первый экономический

Билет в Голландию

Цифровые герои

Работа будущего

Профессии мечты

Экономическое образование

Гуманитарная сфера

Молодые инженеры

Табель о рангах

Карьера в нефтехимии

Фармакогнозия – Готовые практикумы

Брянский областной центр охраны здоровья семьи и репродукции. Официальный сайт

Брянская областная больница №1

Уважаемые родственники пациентов!

Информация не предоставляется в случаях, если пациент запретил сообщать информацию или не определил лицо, которому должна быть передана такая информация.

Основания:

1. Ст. 13, 22 Федерального закона от 21.11.2011г. №323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан РФ»

2. Приказ Минздрава России от 31.07.2020г №789 Н «Об утверждении порядка и сроков предоставления медицинских документов (их копий) и выписок из них

Администрация больницы

Значение научно-исследовательской работы студентов специальности «Фармация в учебном процессе техникума» | Технологии, методики | Педтехнологии

Значение научно-исследовательской работы студентов специальности «Фармация в учебном процессе техникума»

Первая аутологичная гемопоэтическая ТСК при анкилозирующем спондилите: описание случая и ключи к пониманию терапии

Отчет о болезни и ключи к пониманию терапии

Нуклеазы цинковых пальцев для направленного мутагенеза и восстановления мутации при серповидно-клеточной анемии: исследование in-silico

Мисаки Вайенгера

по 5198951: | NT_009237.18 |)

Abstract

Общие сведения

Методы и результаты

Заключение

Общие сведения

Методы

Идентификация ZFA и ZFN, специфичных для гена HBB

Дизайн

Материалы и программное обеспечение

Вмешательства

Измеряемые переменные

Результаты

Массивы цинковых пальцев (ZFA), нацеленные на гемоглобин, бета (β

Нуклеазы цинковых пальцев (ZFN), нацеленные на гемоглобин, последовательности гена бета (β

Таблица 1

Нуклеазы цинковых пальцев (ZFN), нацеленные на соседние 8954 п.

Таблица 2

Обсуждение и выводы

Конкурирующие интересы

Вклад авторов

Номера доступа

до 5198951 – | NT_009237.18 |

Дополнительные материалы

по 5198951: | NT_009237.18 |)

Благодарности

Ссылки

Ультраструктура слюнных желез голодающих взрослых и кормящих самок Haemaphysalis (Rhipistoma) leachi (Ixodoidea: Ixodidae)

Abstract

Ссылки

Цитирование

7-35 Как встречаться без использования онлайн-знакомств?

How Did Segal And Cardellini Start Dating? sambelsky

Оставить комментарий Отменить ответ

Я б в нефтяники пошел!